做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的，查询了相关文献，结合本人以往的经验，来谈谈鬼峰的成因及应对策略，主要体现在以下几个方面：1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时，由于开始时有机相比例不高，洗脱能力不强，部分杂质在便富集在色谱柱头处。随着流动相中有机相比例的提高，洗脱能力不断增强，一开始富集的杂质被洗脱下来，流出色谱柱而进入检测器，从而形成鬼峰。2、流动相脱气不完全。当水和有机相在混合器中混合时，产生了气泡。3、操作问题。针对以上原因，给出的对策如下：原因1，主要有几种情况：1、试剂问题：a）有机试剂：甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单，杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广，所以当使用紫外检测器时，尤其是波长较低时，尽量使用乙腈作为有机相，用甲醇的话漂移太大。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高，一般用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。b......阅读全文
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的，查询了相关文献，结合本人以往的经验，来谈谈鬼峰的成因及应对策略，主要体现在以下几个方面：1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时，由于开始时有机相比例不高，洗脱能力不强，部分杂质在便富集在色谱
HPLC故障排除—鬼峰的出现及解决
3.鬼峰问题 鬼峰问题 预防措施和解决方案 鬼峰 柱或注射器被污染 （色谱柱或进样器污染） 仅使用HPLC级溶剂 冲洗柱，以去除杂质 在注射器用于下一个分析物时，应先进行冲洗
为何出现鬼峰？
①进样阀残余峰--每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗; ②样品中未知物--处理样品; ③柱未平衡--重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱); ④三氟乙酸(tfa)氧化--每天新配，用抗氧化剂; ⑤水污染(反相)--通过变化平衡时间检查水质量
做HPLC为何会出现“胖”峰和平头峰？怎样避免？
用比流动相强度大的大体积样品进样，通常会损害色谱图的质量，而出现“胖”峰和平头峰。应遵循下列规则选用溶剂溶解样品： a.最好用流动相溶解样品进样; b.用大体积弱溶剂溶解样品，如，反相色谱中用水溶解样品进样，主要缺点是每次进样后在色谱图的开头出现大的负峰，有时还波及到样品峰; c.需要时
X射线伴峰和鬼峰
能量比特征X射线更高的次要辐射成分使光电子动能增大，将在主峰低结合能处产生与主峰保持一定距离、并与主峰有一定强度比例的伴峰，称为X射线伴峰。在靶材有杂质、污染或氧化等非正常情况下，其他元素的X射线也会激发光电子，从而在距正常光电子主峰一定距离处出现光电子峰，称为X射线鬼峰。
XPS图谱之鬼峰
有时，由于X射源的阳极可能不纯或被污染，则产生的X射线不纯。因非阳极材料X射线所激发出的光电子谱线被称为“鬼峰”。
鬼峰或交叉污染问题
系统的污染主要是由鬼峰或交叉污染造成的。如果鬼峰的峰宽与样品的峰类似（具有类似的保留时间），则污染物很可能是与样品同时进入色谱柱的。进样器中可能存在额外的化合物（即污染物）或样品本身存在这些化合物。溶剂、样品瓶、瓶盖和注射器中的杂质只是某些可能的污染源。进样样品和溶剂空白有助于找到可能的污染物源。如
气相色谱异常峰分析“鬼峰”(怪峰，多余峰，记忆峰)
(1)上一次进样的高沸点杂质峰自然流出； (2)载气不纯过滤器失效使低沸点的污染物冷凝在色谱柱头，程序升温时正常流出； (3)注射垫未经老化或无隔垫清洗而出的污染峰； (4)汽化温度太高或严重污染至使样品某些组分分解； (5)样品某些组分与被污染固定相产生了作用； (6)色谱柱温度太高
实验室分析仪器HPLC－常见故障出现鬼峰的原因分析
1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗 2.样品中未知物 处理样品 3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 尤其是离子对色谱 4.三氟乙酸TFA氧化肽谱 每天新配,用抗氧化剂 5.水污染反相 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水
液相色谱谱图中鬼峰干扰峰的概念
鬼峰&干扰峰 鬼峰(Ghostpeak)：是对未知来源的色谱峰的统称。色谱分离过程中，特别是在梯度洗脱或者仪器使用时间过久容易产生时有时无的色谱峰，因此鬼峰最大的特点就是“飘忽不定”，“神出鬼没”，这种特性通常体现在保留时间不稳定和峰面积不稳定上。鬼峰的来源有很多，但流动相梯度变化产生的鬼峰
气相色谱鬼峰的排除办法
鬼峰（Ghost peak）是指有些峰时有时无，在某个谱图里出现，可能同样的条件再做一次又不出现了。鬼峰的原因不固定，比如信号干扰，色谱柱污染，进样隔垫碎屑，毛细管柱安装不好等，一般可以通过更换进样垫、更换衬管、老化色谱柱、更换溶剂、清洗进样针、清洗离子源等手段排除鬼峰。有时升温烧一下色谱柱、检测
HPLC峰变宽的原因
原因：a.在使用过程中柱本身退化，逐渐降低柱效; b.柱外峰宽效应。一根很好的专用柱用于另一液相色谱系统引起塔板数降低，说明新系统有很大的柱外峰宽效应; c.化学效应，多数是流动相和固定相相互作用所致，改变流动相可使宽峰有所改善。
HPLC维护知识问答
1、为什么溶剂和样品要过滤? 溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。 色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。 仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 （一）概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 （一）概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary ph
为何液相色谱试验时出现鬼峰
（1）进样阀残余峰--每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗； （2）样品中未知物--处理样品； （3）柱未平衡--重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)； （4）三氟乙酸(tfa)氧化--每天新配，用抗氧化剂； （5）水污染(反相)--通过变化平衡时间检查水质量，用HP
HPLC基础知识（一）
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论 一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和
HPLC基础知识（四）
4．柱的使用和维护注意事项 色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内
HPLC基础知识（六）
三、流动相1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数
HPLC基础知识（七）
V．HPLC应用一、样品测定1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。2．样品配
HPLC基础知识（五）
4．与检测器有关的故障及其排除1）流动池内有气泡 如果有气泡连续不断地通过流动池，将使噪音增大，如果气泡较大，则会在基线上出现许多线状“峰”，这是由于系统内有气泡，需要对流动相进行充分的除气，检查整个色谱系统是否漏气，再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内，也可能使噪音增大，可采
HPLC基础知识（二）
3．离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂，常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架，在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基（称阳离子交换树脂）或季氨基（阴离子交换树脂）。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换，根据各离子与离子交换基团具有不同的
HPLC基础知识（三）
3．柱外效应速率理论研究的是柱内峰展宽因素，实际在柱外还存在引起峰展宽的因素，即柱外效应（色谱峰在柱外死空间里的扩展效应）。色谱峰展宽的总方差等于各方差之和，即： σ2＝σ2柱内＋σ2柱外＋σ2其它柱外效应主要由低劣的进样技术、从进样点到检测池之间除柱子本身以外的所有死体积所引起。为了减少柱外
气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(一)
1概述之前介绍了在反相液相色谱应用的时候，经常遇到的鬼峰现象，与之相同，在气相色谱使用过程中，鬼峰出现的概率更大，来源更多，原因查找与排除更加困难。与液相色谱不同的是，气相色谱的载气选择范围有限且没有泵，不存在由于泵的机械原因而导致的假峰现象，但是载气流路上发生的脉冲波动依然也会形成一些鬼峰，但这种
气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(二)
1概述前文【气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(一)】简单介绍了载气、管路以及进样口及其各部件可能引起的鬼峰。除此之外，如进样小瓶，隔垫，配样时佩戴的橡胶手套，进样针，洗针液以及色谱柱的流失等亦会导致鬼峰的出现。2气相色谱峰来源2.1 进样小瓶与瓶盖引入的鬼峰一般地，对于新的未被使用过的进样小瓶与瓶盖是不
HPLC造成峰分叉的原因分析
保护柱或分析柱污染；取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。
HPLC基础知识教程（七）
几种检测器的主要性能全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射信号吸光度荧光强度电流离子流强度散射光强噪音10-510-310-9线性范围105104105宽选择性是是是否否流速影响无无有无温度影响小小大小
HPLC基础知识教程（十一）
全屏显示表格硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有机溶剂++++++++++适用pH范围++++++++抗膨胀/收缩++++++++耐压+++++++++表面化学性质+++++++++效能+++++++注：+++好 ++一般 +差
HPLC基础知识教程（六）
1．柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛
HPLC基础知识教程（八）
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13＜10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7＜1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无