液相试验过程中出现气泡的原因
1、浸在流动相中的过滤器脏了会导致不断气泡产生，或者输液不畅。解决方法是用浸泡乙醇中用超声波震荡清晰30中，污染严重可先用30%硝酸震荡清洗，再用纯水震荡清洗30分钟。2、四氟软管有破裂或褶皱也会产生气泡，同时若四氟软管与泵连接的四氟垫圈密封不好也会产生大量气泡，表现是流动相虽然脱气但还是有大量气泡产生。3、流动相液面过低使浸在流动相中的过滤器裸露再空气中也会产生上述情况。......阅读全文
溶血空斑试验——小室液相法
一、基本原理 溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔，四天后将小鼠杀死，取脾脏制成脾细胞悬液，内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞，补体混合孵育。由于PFC
为何液相色谱试验时出现鬼峰
（1）进样阀残余峰--每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗； （2）样品中未知物--处理样品； （3）柱未平衡--重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)； （4）三氟乙酸(tfa)氧化--每天新配，用抗氧化剂； （5）水污染(反相)--通过变化平衡时间检查水质量，用HP
液相试验过程中出现气泡的原因
1、浸在流动相中的过滤器脏了会导致不断气泡产生，或者输液不畅。解决方法是用浸泡乙醇中用超声波震荡清晰30中，污染严重可先用30%硝酸震荡清洗，再用纯水震荡清洗30分钟。2、四氟软管有破裂或褶皱也会产生气泡，同时若四氟软管与泵连接的四氟垫圈密封不好也会产生大量气泡，表现是流动相虽然脱气但还是有大量气泡
进行液相色谱试验时为何会基线漂移？
①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器)； ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移)； ③流通池被污染或有气体； ④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线)；
液相色谱质谱仪液相部分的维护
液相部分的维护 要求使用220V单相交流电。如发生断电，不管任何原因造成的，首先关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。 仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.6～0.7MPa。 实验开始前先检查液氮罐液体存量是否充足。
高效液相和超高效液相的区别
超高效液相系统耐压更高，可以以更高的流速进行分析，并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高，即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的，高效液相色谱具有更细的流动相传输管路，内径更细的色谱柱，从而使死体积变小，理论塔板数更高，分析时间更短。超高效就是
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化，对分
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能，在泵中产生气泡使流速不稳，气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰，降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大，使紫外检测器基线增高，低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相流动相的使用
a、流动相对样品具有一定的溶解能力b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。c、流动相的黏度要尽量小d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能，在泵中产生气泡使流速不稳，气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰，降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大，使紫外检测器基线增高，低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
什么是气相－液相
气相属于分配层析或吸附层析，仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物（如磨细的耐火砖）上覆盖一层高沸点液体，如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。液相：均匀的溶液也是一个相，称为液相。液相是物质呈现液体的状态，且在这个系统里只有液体，没有固相（即固体），也没有气体（即气相：通常任
正相液相色谱方法
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽，氰基柱通常是首选；与氰基柱相比，硅胶柱可获得更大的值，适合于异构体和疏水性溶质的分离，但分析时必须严格控制流动相中水含量，也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差，仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用；氧化铝
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能，在泵中产生气泡使流速不稳，气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰，降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大，使紫外检测器基线增高，低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
什么是气相－液相
气相属于分配层析或吸附层析，仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物（如磨细的耐火砖）上覆盖一层高沸点液体，如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。液相：均匀的溶液也是一个相，称为液相。液相是物质呈现液体的状态，且在这个系统里只有液体，没有固相（即固体），也没有气体（即气相：通常任
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
什么是气相、液相
气相属于分配层析或吸附层析，仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物（如磨细的耐火砖）上覆盖一层高沸点液体，如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。液相：均匀的溶液也是一个相，称为液相。液相是物质呈现液体的状态，且在这个系统里只有液体，没有固相（即固体），也没有气体（即气相：通常任
液相试验时规则的基线噪音是如何产生的？
（1）原因 ①在流动相、检测器或泵中有空气(尖锐峰)。 ②漏液。 ③流动相混合不完全。 ④温度影响(柱温过高，检测器未加热)。 ⑤在同一条线上有其他电子设备(偶然噪声)。 ⑥泵振动 。 （2）解决方法 ①流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 ②检查管路接头是否松动，泵
请问液相色谱试验时为何出现肩峰或分叉
（1）样品体积过大--用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%； （2）样品溶剂过强--采用较弱的样品溶剂； （3）柱塌陷或形成短路通道--更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件； （4）柱内烧结不锈钢失效--更换烧结不锈钢,加在线过滤器，过滤样品； （5）进样器损坏--更换进样器转子。
液相色谱相关试验时峰展宽是什么原因？
（1）样品体积过大--用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%； （2）在进样阀中造成峰扩展--进样前后排出气泡以降低扩散； （3）数据系统采样速率太慢--设定速率应是每峰大于10点； （4）检测器时间常数过大--设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%； （5）流动相粘度过高--增加
进行液相色谱试验时出现峰拖尾的原因
（1）柱超载--降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相； （2）峰干扰--清洁样品，调整流动相； （3）硅羟基作用--加三乙胺，用碱致钝化柱，增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值，纯化样品； （4）柱内烧结不锈钢失效--更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品； （5）柱塌陷或形成短路
关于液相色谱试验时遇到的相关问题解析
1、除了流速外，还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度；改变柱长、柱内径和填料粒度；柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。 2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下，减少保留时间或缩短分析时
液相色谱在液相检验中的应用方法
液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱法，液相色谱法是现在应用十分广泛的一种液相色谱法，这种方法是20世纪60年代兴起的，经过不断的完善和发展，现已被应用于各个领域。在医药分析领域，液相检验的应用已经普及，而液相色谱法作为液相检验中的一种重要手段，也得到了大力的推广与应用，目前实验室常用的P2
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
液质流动相与液相流动相有什么不同
液质的流动相要求不能含有不挥发性的盐类，如果非要加入的话，质谱要及时清洗。使用液相是因为要进行物质的结构确证。
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混
制备液相和一般液相的区别
制备液相主要特点1、 比玻璃柱安全迅速，分离速度高10倍，时间少于30min，换柱只须30秒；2、 使用40mm或80mm柱子制备量大，分离纯度高，普通为0-50g；3、 成本低，流动相不需要前处理，样品可固体上样，耗品少，维修少；4、 重现性高，放大方便，可以达到公斤级；一般液相特点：1．高压：一
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高压、高速、近代液相色谱，通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法，到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面，现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
液相色谱流动相的特征
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求：（1）能溶解样品，但不能与样品发生反应。（2）与固定相不互溶，也不发生不可逆反应。（3）粘度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效。（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶剂要不吸收紫外光。（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火，价格尽量低等
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1）由强到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍规则：每减少10％的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约增加３倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察