高效液相层析法

高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤为有利。高效液相层析法的基本概念和分离理论与经典的液相色谱法及气相色谱法一致,因而其塔板理论及动力学理论等都可用于高效液相层析。⒈ 高效液相层析仪 典型的高效液相层析仪包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。流动相用一高压泵输入。这种高压泵应满足以下条件:①流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围。②能抗溶剂腐蚀。③有较高的输出压力,一般要达到15~300kg/c,也有的高达800kg/c。④泵的死体积要小。梯度洗脱装置必须具备两台高压泵,一台输送强溶剂,一台输送弱溶剂,两泵运转速度用电脑控制,并......阅读全文

关于高效液相层析的特点介绍

  1、高压  液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~3.5万KPa。  2、高速  流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少

离子交换高效液相层析实验

阴离子交换HPLC 阳离子交换HPLC             实验材料 蛋白质 试剂、

高效液相层析技术的特点

高压液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~3.5万KPa。高速流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于 1h 。高效近来研究

分子排阻高效液相层析实验

实验材料蛋白质试剂、试剂盒SE缓冲液仪器、耗材层析柱实验步骤1.  用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2.  注射100 μl  缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器设定在210

常见色层分析高效液相层析

高效液相层析(又名高压液相色谱)70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。用直径约3~10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1~2微米的二氧化硅,经硫酰氯反应生成Si—Cl,进一步连接疏水的烷基,如Si—C

高效液相层析技术的概念

高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而

纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点

纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又

藻类多糖的结构与生物活性研究实验_高效液相层析法

实验材料大型藻类试剂、试剂盒NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤(1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧杯,边搅拌边加入

反相高效液相层析的基本概念

中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定  义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学

简述高效液相层析的操作注意要点

  1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。  2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。  3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直

高效液相层析的操作注意事项

1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,

反相高效液相层析的概念和应用

中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定  义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学

关于高效液相层析的适应范围介绍

  气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子

高效液相层析的基本定义和特点

高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而

高效液相层析的分离系统相关介绍

  该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(

关于高效液相层析的注意事项介绍

  1)流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。  2)柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。  3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。  4)压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .  5)因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱

高效液相层析的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

高效液相层析的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

关于高效液相层析的基本信息介绍

  高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填

药物鉴别法高效液相色谱和气相色谱鉴别法

一般规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进行试验,要求供试品和对照品色谱峰的保留时间(tR)一致。含量测定方法为内标法时,要求供试品溶液和对照品溶液色谱图中药物峰的保留时间与内标物的保留试剂比值应相同。高效液相色谱和气相色谱鉴别法操作比较复杂,耗时长,一般在检查或含量测定项下已采用色谱法的情况

高效液相层析技术的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

高效液相色谱键合相色谱法简述

键合相色谱法是由液-液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上,克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解,及流动相通过色谱柱时的机械冲击,固定相不断损失,色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体

什么是液相层析?

中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定  义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

液相层析的定义

中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定  义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

高效液相和超高效液相的区别

超高效液相系统耐压更高,可以以更高的流速进行分析,并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高,即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的,高效液相色谱具有更细的流动相传输管路,内径更细的色谱柱,从而使死体积变小,理论塔板数更高,分析时间更短。超高效就是

关于高效液相色谱的内标法介绍

  采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则

高效液相色谱外标法测含量

测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积或峰高计算:含量等于对照品的峰面积/待测物质的峰面积*标准品的浓度

高效液相色谱柱后衍生法特点

保证舌尖上的安全,是国家十三五计划的重要战略。国家卫计委印发的《食品安全标准与监测评估“十三五”规划(2016-2020年)》提出在“十三五”期间进一步完善食品安全标准与监测评估工作体系,制订、修订300项食品安全国家标准,自修订起陆续实施。    3月1日起,新实施的这一批国家标准包括GB 478

高效液相外标法含量测定公式

高效液相外标法含量测定公式是含量%=(A样×m对×样品的稀释倍数)/(A对×m样×对照品的稀释倍数)×100%,高效液相是高效率的液相色谱。高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱

高效液相外标法含量测定公式

高效液相外标法含量测定公式是含量%=(A样×m对×样品的稀释倍数)/(A对×m样×对照品的稀释倍数)×100%,高效液相是高效率的液相色谱。高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱