为什么marker条带出现不规则的条带(如哑铃状等)?
出现上述情况,多与以下几个原因有关:电泳缓冲液陈旧。老化的电泳缓冲液离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;2. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,电压太高可能也会导致marker条带出现不规则现象。此外,凝胶质量差以及凝胶冷却时凝固不均匀也会导致该现象出现。......阅读全文
为什么marker条带出现不规则的条带(如哑铃状等)?
出现上述情况,多与以下几个原因有关:电泳缓冲液陈旧。老化的电泳缓冲液离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;2. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,电压太高可能也会导致marker条带出现不规则现象。此外,凝胶质量差以及凝胶冷却时凝固不均匀也会
为什么marker条带非常弱或者根本没有条带?
出现上述情况可能是:marker上样量较低,可适当增加上样量;2. 凝胶质量较差或凝胶凝固不均匀也会导致电泳条带弱或根本没有条带;3. 电泳时间过长导致marker条带跑出凝胶,可缩短电泳时间,降低电压,增加凝胶浓度。
为什么出现多条带?
为什么出现多条带,每个加样槽中都出现了多条带,而且好像都很有规律,为什么?是封闭时间不够吗?做Western必须要内参吗?一抗、或二抗抗体浓度太高,多克隆抗体本身的非特异性反应,抗体的特异性不强,目的蛋白经过处理后发生变化,而内参的条带基本均匀一致,这样才有说服力。表明的确是处理因素造成目的蛋白的变
蛋白marker为什么能作为显色条带
蛋白marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在western Blot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Wes
蛋白marker为什么能作为显色条带
蛋白marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在western Blot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Wes
电泳Marker问题集锦
Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因: 1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染; 2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;
DNA-Marker电泳常见问题分析
Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2.电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;3.电泳条件
DNA-Marker产品选择指南
1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作
western-blot为什么出现两条带
Western blot出现两条带是经常会发生的情况具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体,故都可以被抗体识别出来或者改蛋白有部分降解,但是未降解部分依然可以和抗体结合另外抗体特异性不高,也会出现非特异性的结合,造成出现两条或者多条带所以Western blot会出现两条带
western-blot为什么出现两条带
Western blot出现两条带是经常会发生的情况具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体,故都可以被抗体识别出来或者改蛋白有部分降解,但是未降解部分依然可以和抗体结合另外抗体特异性不高,也会出现非特异性的结合,造成出现两条或者多条带所以Western blot会出现两条带
western-blot为什么出现两条带
Western blot出现两条带是经常会发生的情况具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体,故都可以被抗体识别出来或者改蛋白有部分降解,但是未降解部分依然可以和抗体结合另外抗体特异性不高,也会出现非特异性的结合,造成出现两条或者多条带所以Western blot会出现两条带
western-blot为什么出现两条带
Western blot出现两条带是经常会发生的情况具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体,故都可以被抗体识别出来或者改蛋白有部分降解,但是未降解部分依然可以和抗体结合另外抗体特异性不高,也会出现非特异性的结合,造成出现两条或者多条带所以Western blot会出现两条带
western-blot为什么出现两条带
Western blot出现两条带是经常会发生的情况具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体,故都可以被抗体识别出来或者改蛋白有部分降解,但是未降解部分依然可以和抗体结合另外抗体特异性不高,也会出现非特异性的结合,造成出现两条或者多条带所以Western blot会出现两条带
marker条带非常模糊,无法辨别具体条带问题分析
出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;3. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃;
为什么pcr阴性总有条带出现
提高退火温度,或重新设计引物,或者是阴性对照被污染,当然还有其它好多小原因,要是还没解决,请细说并追问。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
Western-blot实验电泳时-Marker条带不清晰
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
为什么电泳的条带很粗?
电泳中条带很粗是常见的事,主要是未浓缩好的原因。处理办法:适当增加浓缩胶的长度;保证浓缩胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压;
PCR扩增后没有出现条带
没有条带说明没有PCR产物,应该是PCR阶段原料准备处理线遗漏,建议回忆一下实验过程,重新制备
PCR扩增后没有出现条带
没有条带说明没有PCR产物,应该是PCR阶段原料准备处理线遗漏,建议回忆一下实验过程,重新制备
做western-条带老是出现反白
做western条带老是出现反白可能的原因是化学发光是个耗能过程,局部能量消耗过大,导致能量不足,也就发不出光了,所以条带反白。降低一抗、二抗浓度,蛋白上样量也可以降低。
琼脂糖凝胶电泳-Marker-条带不直
1.首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确,如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则;2.检查电泳槽的电极是否出现移位、歪斜;3.考虑更换电泳缓冲液;4.电压不要太高,否则凝胶会受热。此外,跑出漂亮的琼脂糖电泳照片我有2个经验供参考:1.琼脂糖凝胶配好后在在槽子里先空跑十几分钟然后断电放置备用;2.
为什么Western-blot-出现两个目标蛋白条带
1.因为WB的一抗识别的蛋白质的表位是顺序表位,不是空间表位,所以WB状态下的抗原-抗体识别,与非变性的生理条件下的抗原-抗体识别不同。2.WB之前,先用分子筛纯化同时也是检测一下目的蛋白产物是否成功。也就是目的蛋白是否成功表达了,而且在提取后稳定存在了。3.非特异性的条带分子量偏大可能是SDS P
为什么电泳的一个泳道出现两条条带
应该是PCR的杂带。这种情况的原因可能很多,比如引物设计的特异性不好,或者退火温度不合适等。
为什么电泳的一个泳道出现两条条带
应该是PCR的杂带。这种情况的原因可能很多,比如引物设计的特异性不好,或者退火温度不合适等。