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中国科大解析胆汁盐外排蛋白电镜结构

中国科学技术大学微尺度物质科学国家研究中心和生命科学与医学部陈宇星教授、周丛照教授、孙林峰教授课题组合作,利用冷冻电镜技术解析了人类胆汁盐外排蛋白ABCB11的近原子分辨率三维结构,为深入理解该类膜蛋白的转运机制以及其突变引发的致病机理提供了基础。该研究成果近日在线发表在《细胞研究》。 胆汁盐为人体胆汁的重要组成部分,由胆固醇作为前体在肝细胞中合成,经膜蛋白将其转运至胆小管中参与胆汁的形成。胆汁主要在小肠中帮助脂肪类物质的消化和吸收,胆汁盐的外排阻塞会导致一系列的胆汁淤积相关病症。比如,进行性家族性肝内胆汁淤积(PFIC),良性复发性肝内胆汁淤积(BRIC),妊娠期肝内胆汁淤积(ICP),药物诱导的肝损伤(DILI)。其中进行性家族性肝内胆汁淤积最为严重,该病多发于儿童,伴随肝肿大,肝硬化,以至肝功能衰竭最后导致成年前死亡,大部分该病患者需要进行肝移植得以存活。 研究表明,胆小管上的ABC膜转运蛋白ABCB11是胆汁盐外......阅读全文

免疫电镜技术关键的几个问题

免疫电镜技术关键的几个问题免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几个问题进行探

大跃进 | 中国学者CNS发表超过100篇生命科学领域研究成果

  【50】2019年4月12日,中科院上海药物所徐华强,王明伟,浙江大学张岩及匹兹堡大学医学院Jean-Pierre Vilardaga共同通讯在Science发表题为“Structure and dynamics of the active human parathyroid hormone r

2019年中国学者发表CNS统计,谁是CNS发表之王?

  【51/52】2019年4月4日,清华大学柴继杰课题组、中科院遗传发育所周俭民课题组和清华大学王宏伟课题联合同期背靠背发表两篇重量级Science文章,完成了植物NLR蛋白复合物的组装、结构和功能分析,揭示了NLR作用的关键分子机制,是植物免疫研究的里程碑事件。两篇文章分别是: "Li

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

冷冻电镜:一次又一次的分辨率突破

  过去两年对于冷冻电子显微镜(cryo-EM)而言,是让人兴奋的,甚至可以说是革命性的。到2014年底,两个3.2 Å分辨率的结构通过这种方法确定:一个是β半乳糖苷酶,另一个是酵母线粒体核糖体的大亚基。  冷冻电镜达到3 Å的分辨率,这本身就是一个很大的成就,标志着结构生物学进入新时代。那些一直在

清华大学发文报道首个完整藻胆体的冷冻电镜三维结构

  2017年10月19日,清华大学生命科学学院隋森芳教授研究组在《自然》(Nature)杂志上以长文(Research Article)形式在线发表题为《海洋红藻藻胆体的结构》(Structure of phycobilisome from the red alga Griffithsia pac

生命学院研究组报道首个完整藻胆体的冷冻电镜三维结构

  10月19日,清华大学生命科学学院隋森芳教授研究组在《自然》(Nature)期刊上在线发表题为《海洋红藻藻胆体的结构》(Structure of phycobilisome from the red alga Griffithsia pacifica)的研究论文,首次报道世界上第一个完整藻胆体的

功能化离子液体的合成及其在蛋白质萃取分离中的应用

蛋白质组是指一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质组学是在蛋白质水平上定量、动态、整体性地研究生物体。蛋白质作为生物体的组成部分,在生命活动中发挥着重要的角色,如新陈代谢,基因表达,信号转换等生命现象。许多蛋白质可用于治疗或诊断应用,在治疗领域,很有必要制备纯净的不含任何对人体有危害的污

盘点 | 生物科研界的八件大事

  发现磁感应蛋白,解密第六感之谜  北京大学生命科学学院的研究人员在《Nature Material》杂志发表论文,公开了一种全新的磁受体蛋白(MagR)。该突破性进展或将揭开被称为生物“第六感”的磁觉之谜,并推动整个生物磁感受能力研究领域的发展。在自然界,许多动物物种都有感知地球磁场的能力。它们

免疫球蛋白提取分离纯化技术

实验概要免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。本实验对禽血清IgG和IgA进行了分离纯化。实验原理免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和I

研究解析糖皮质激素与GPR97和Go蛋白复合物冷冻电镜结构

  中国科学院上海药物研究所研究员徐华强团队与山东大学教授孙金鹏团队、浙江大学教授张岩团队等首次解析了糖皮质激素与其膜受体GPR97和Go蛋白复合物的冷冻电镜结构,这也是国际上首次解析的黏附类GPCR与配体和G蛋白复合物的高分辨率结构。相关研究成果以Structures of glucocortic

免疫金标记检测方法标准操作程序

  【目的】  保证免疫金标技术检验准确性  【本SOP适用范围】  免疫金标技术  【原理】  氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶体状态,故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和

免疫球蛋白提取技术

免疫球蛋白提取技术可应用于:(1)推知机体的体液免疫功能;(2)诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相结合的方法,特别是以硫酸铵提纯为基础,再经过层析柱的方法来提高免

免疫胶体金技术介绍

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

不同冻结方式对南美白对虾品质的影响-美国FTC质构仪

  本研究选取新鲜的南美白对虾,通过 4 种不同冻结方式( 静止空气冻结、液体浸渍冻结、真空包装联用静止空气冻结和真空包装联用液体浸渍冻结) 处理,研究不同冻结方式对南美白对虾品质的影响,探索适合南美白对虾的冻结工艺。   实验样品:南美白对虾购于浙江宁波象山某海水养殖场,选取体表无损伤,长( 1

自免肝血清学诊断的相关重要自身抗体

一、 前言1.疾病概述自身免疫性肝病(AIH)与病毒感染、酒精、药物、遗传等其他因素所致肝病不同,是一组由于自身免疫异常导致的肝脏疾病,突出特点是血清中存在自身抗体,包括原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)、自身免疫性肝炎(AIH)、原发性硬化性

中国科学家10月参与发表多篇Nature文章

  10月中国学者参与的多项研究在Nature杂志及其重要子刊上发表,其中包括开花后的胚胎发育重新激活FLC基因的分子机制,病原细菌抑制宿主天然免疫防御的新机制,以及首个完整藻胆体的冷冻电镜三维结构。  来自北京生命科学研究所的邵峰实验室报道了志贺氏痢疾杆菌分泌的的效应蛋白IpaH9.8通过泛素化并

BECIA2017新产品奖大盘点:赛默飞、安捷伦、岛津位居三甲

  分析测试百科网讯 2017年10月10日-13日,国内分析测试行业影响力最大的展会——BCEIA2017在北京国家会议中心开幕,展出当今国内外分析测试领域的前沿技术和先进仪器设备。本次展会上,组委会颁布了BCEIA 2017新产品奖,共计22家国产仪器厂商、74个产品。其中获奖最多的厂商是赛默飞

Nature子刊:中国团队首次揭示ATM激酶精细三维结构

  中国科学技术大学蔡刚课题组与南京农业大学王伟武课题组、中国科大刘海燕课题组合作,首次揭示了毛细血管扩张共济失调症突变蛋白——ATM激酶的精细三维结构,为理解ATM激酶活性严谨调控的分子机制以及研发新型肿瘤放疗的增敏剂提供了重要线索,该研究成果发表于5月27日的《自然·通讯》上。论文第一作者为蔡刚

中国科大等首次揭示ATM激酶精细三维结构

  中国科学技术大学蔡刚课题组与南京农业大学王伟武课题组、中国科大刘海燕课题组合作,首次揭示了毛细血管扩张共济失调症突变蛋白——ATM激酶的精细三维结构,为理解ATM激酶活性严谨调控的分子机制以及研发新型肿瘤放疗的增敏剂提供了重要线索,该研究成果发表于5月27日的《自然·通讯》上。论文第一作者为蔡刚

透射电镜样品制备要求有哪些

  透射电镜样品制备步骤:  一,取材:组织块小于1立方毫米  二,固定:  2.5%戊二醛,徳酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%饿酸固定液固定2-3小时  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次  三,脱水:  50%乙醇15-20分  70%乙醇15-20分

生化项目及其临床意义

项目 标本 参考值 临床意义 丙氨酸氨基转移酶(ALT) 血清 0-30U/L 增高:肝胆疾病:病毒性肝炎、肝硬变活动期、肝癌、中毒性肝炎、阿米巴性肝病、脂肪肝、细菌性肝脓肿、肝外阻塞性黄疸、胆石症、胆管炎、

生物大分子药物口腔黏膜递送研究进展

摘要生物大分子药物的替代给药方式一直是生物大分子药物研究的热点。口腔黏膜因其“柔和”的给药环境、无肝首过效应以及患者依从性好等优点,是生物大分子药物理想的给药部位。由于相对分子质量大、亲水性强的特点,生物大分子药物存在口腔黏膜渗透吸收差、生物利用度低的问题。黏膜促透技术的发展,为生物大分子药物的口腔

显微技术(图)

显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。—、光学显微镜(一)、普通光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组成,是显微镜的主体,为了消除

亚细胞(细胞器)构造的组成与功能

分离与纯化对象之一:“亚细胞(细胞器)”的构造与功能     上世纪20年代以Svedberg为首的欧洲科学家艰难研制的超速离心机原型主要目的是想分离和纯化病毒、细胞和亚细胞构造(细胞器),然而50年代中期开始生产的*代及以后的各代超速离心机,在很长

膜生物学国家重点实验室首次揭示完整藻胆体的三维结构

   光合作用是地球上的生物赖以生存的基础。为了获取更多的光能,生物体发展出了多种捕光蛋白系统。其中存在于蓝藻和红藻中的藻胆体是迄今已知的最大的捕光蛋白复合物,它位于膜表面,并与位于膜中的光和反应中心结合,能将吸收的太阳光以极高的效率传递给光合反应中心以便进一步转化为有机物并释放氧气。这个巨大的超分

重视尿液有形成分检查

重视尿液有形成分检查:尿液分析( urinalysis) 以往称为尿常规检查( routine examination of urine) ,即采用理学、化学、显微镜方法来检查尿液,由于是每个住院患者必须完成的常规检验,故常简称为尿常规。随着科学的发展,新技术、新方法、新仪器(如流式细胞仪、电镜等)

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)

(一)  原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)大总结

(一) 原理免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分

质谱界重磅:继Nature子刊后董梦秋团队又发Nature

  交联质谱技术(英文全称Chemical cross-linking of proteins coupled with mass spectrometry, 简称CXMS或XL-MS);CXMS利用化学交联剂将蛋白质或蛋白质复合体中空间距离足够接近的两个氨基酸通过共价键连接起来,酶切成肽段后用质谱