反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系，对于含有酸碱性组份的样品，流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系；检测波长一般在254nm下检测，因为在此波长处，甲醇、乙腈，磷酸缓冲盐均没有紫外吸收，而且标准样品多为含苯环的物质，在254nm波长紫外吸收强，选择此波长检测可以避免流动相戏外吸收的干扰；柱温一般在室温下测定，均不超过30℃；对于通常的标准柱型，即Φ4.6mm×250mm的柱子来说，流速以1ml/min为宜。柱压则为实测值，它不仅与色谱柱有关，而且取决于流动相，以及评价色谱柱的温度与流速。二、反相色谱柱评价的标准物质通常,以指定的一组标准溶质为样品,测定它们在柱子上的理论塔板数，以作为柱效的衡量指标。这种标准溶质的选择，因不同的色谱模式而异，也因不同的使用目的而有所不同。一般情况下，仅选用3-4中中性，例如芳香烃，最多选用5......阅读全文
解析通用型反相液相色谱柱的再生
关于通用型反相液相色谱柱的再生： 色谱柱污染后把筛板卸下来超声清洗 对于色谱柱的污染，首当其冲的就是筛板，因此常用的做法就是把柱头卸下来，把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害，因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。 自己
能影响到反相色谱柱的因素有哪些？
反相色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇
通用型反相色谱柱使用前处理和保养
通用型反相色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意： 液相色谱柱柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是最佳条件），只有这样，测得的
通用型反相液相色谱柱结构和特点
通用型反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品，主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，被广泛用于多个领域中。在通用型反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
通用型反相液相色谱柱结构和特点
通用型反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品，主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，被广泛用于多个领域中。在通用型反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素有色谱柱物理性质和化学性质。一、色谱柱物理性质：1、硅胶纯度：硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高（硅羟基pKa低），导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶（高纯）由于金属含量低，硅羟基pKa高，碱性化合
反相高效液相色谱柱的原理及使用维护
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色谱条件下，流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液，并加一定比例的能
c8反相液相色谱柱的安装步骤
使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统，确保系统干净，不含任何缓冲盐和污染物。取用c8反相液相色谱柱时避免磕碰掉落。将c8反相液相色谱柱入口端连接到系统上，柱出口端先不要连接，色谱柱身上有箭头标明正确流向。在0.1 mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，然后在2分钟内将流速升至0.5 mL/min。当
反相高效液相色谱柱使用维护注意事项
作为基于极性流动相和非极性固定相所组成的液相色谱体系，反相高效液相色谱柱是通过表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，根据一般有机分子的结构中具有非极性的疏水部分，同时疏水部分越大，一般保留值越高的性质，反相高效液相色谱柱进行相应的工作。 为尽可能减少日常中不正确色谱操作对反向液相色谱柱的损
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相，反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支，用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相，反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支，用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
怎样清洗受强保留组分污染的C18反相柱色谱柱
一般来说正相与反相是相对于使用的流动相与柱子的极性比来说的，这样更为科学，但一般情况下，用c18柱，它毕竟是非极性色谱柱基本上用于反相色谱，也以说可以认为是反相柱，而cn柱一般可用于正相与可用于反相，说是正相或反相不太科学了。
反相高效液相色谱柱是一种怎样的色谱模式
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色谱条件下，流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液，并加一定比例的能
反相色谱介绍
反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚，是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种，对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析，反相液相色谱正受到越来越多的关．反相色语法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。在 HPLC系统的基础
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
反相色谱的反相介质是什么？
反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如
反相高效液相色谱柱的保护要怎么做
反相高效液相色谱柱的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发时间，并使开发的方
c18反相液相色谱柱使用注意事项
c18反相液相色谱柱过程中，须注意以下事项1、新c18反相液相色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到状态。具体操作是，将配制好65%的乙腈/水冲洗后，把色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空（不可连上检测器，以免污染了
反相液相色谱仪ODS柱的化学性质
反相液相色谱仪ODS柱的化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型：1、单体键合：键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高，色谱柱平衡快。2、聚合体键合：键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率：碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率：分辨率高，
蛋白纯化反相柱的选择
HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量，20kDa左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说，4.6mm的内径比较常见，250mm长的柱子比150
关于何时使用HILIC－与反相液相色谱柱的详细研究
摘要：本研究考察了何时使用亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 以及何时使用反相液相色谱(RPLC) 柱分析难以保留的极性小分子和离子化分子。所示数据表明了分析物/样品、流动相、检测模式和其他方法适用性要求（保留性、分离度、灵敏度和峰形）的影响。 前言： 使用反相液相色谱法充分保留和分
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶，采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高，覆盖完全，对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高，寿命长，是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间的增
关于通用型反相液相色谱柱的保存和再生
关于通用型反相液相色谱柱的保存： 保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用 理论上液相色谱柱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内部保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。 通用型反相液相色谱柱应该保存在纯乙腈或甲
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶，采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高，覆盖完全，对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高，寿命长，是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间
关于何时使用HILIC－与反相液相色谱柱的详细研究
摘要：本研究考察了何时使用亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 以及何时使用反相液相色谱(RPLC) 柱分析难以保留的极性小分子和离子化分子。所示数据表明了分析物/样品、流动相、检测模式和其他方法适用性要求（保留性、分离度、灵敏度和峰形）的影响。 前言： 使用反相液相色谱法充分保留和分离极性
关于通用型反相液相色谱柱的保存和再生
保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用理论上液相色谱柱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内部保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。 通用型反相液相色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中根据色谱柱内部保存液具有挥发性，因此为了减少其挥发速度，可
C18反相液相色谱柱的特点和操作步骤
反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品，主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，被广泛用于多个领域中。在c18反相液相色谱柱的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性，延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化，如不
反相键合相色谱中,C18柱的分离原理
针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水