如何从正相柱换为反相柱

同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。......阅读全文

反相色谱柱

 反相色谱柱

反相色谱柱的选择

1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷

反相色谱柱效能评价

一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲

反相色谱柱的选择

 反相色谱柱的选择:   1.柱子的PH值使用范围   反相色谱柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。   一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要

反相萃取柱操作

反相萃取柱操作从极性基体中提取非极性的样品1、活化:以3-5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)4、洗脱:将被测样品,用

反相色谱柱效能评价

一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲盐均没有紫外吸收,而且标

什么是反相色谱柱

固定相为非极性的色谱柱。在反相键合相色谱中,溶剂的极性越弱洗脱能力越强,即弱极性溶剂的洗脱强度更大

如何从正相柱换为反相柱

同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。

如何从正相柱换为反相柱

同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。

反相色谱柱的平衡方法

聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。  

反相色谱色谱柱的选择

  色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优

蛋白纯化反相柱的选择

HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量,20kDa左右的一般用C4或C8,再小一点的可以用C18,太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好,但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对,可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说,4.6mm的内径比较常见,250mm长的柱子比150

反相色谱柱的影响因素

  液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料

反相色谱柱的平衡方法

反相色谱柱的平衡方法    聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的

色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)

衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱

反相色谱柱与正向色谱柱的区别

倒置或法线相位是基于相对于固定相位的移动相位的极性。如果流动相的极性强于固定相,则称为反相色谱;如果流动相的极性弱于固定相,则称为正相色谱。反相色谱流动相极性强,易携带极性分子,留下非极性分子。主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱就是这样,有些人喜欢说,反相液相色谱其实是一种意义,也就是说,

色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)

衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱

正相色谱柱与反相色谱柱的区别

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳

正相色谱柱与反相色谱柱的区别

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳

正相色谱柱与反相色谱柱的区别

色谱柱的安装  1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。  2、为了使色谱柱与仪器系统

如何区分正相色谱柱和反相色谱柱

 本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:1、正相色谱     正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。     由于硅胶

Spursil极性改性反相色谱柱特性

Spursil HPLC 柱是以高纯硅胶为基质,采用独特的极性改性技术生产的色谱柱。这个系列的色谱柱不但保留了传统硅胶基质反相色谱柱的性能,而且又增加了一些新的特性: * 填料表面具有极性基团,适合于高水相流动相条件下的分离;* 增强了对亲水性、极性化合物的保留能力;* 独特的选择性和优异的分离度;

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱?

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据