ELISA方法学：开发实践中不可不知的亲和力测定方法开发2
亲和力数值越小则亲和力越强，亲和力的强弱决定了最终决定反应完成时可逆反应各组分相对多少。如例子B和C同样是和200nM CD279（PD1）反应，抗体pembrolizumab (PD1抗体)相对于CD279的亲和力为0.4nM, 配体CD274（PDL1）相对于CD279的亲和力为8200 nM,最终反应生成的pembrolizumab-CD279复合物是97.86 nM,而CD274- CD279复合物仅仅只有2.35nM，两者相差42倍。有别于不可逆反应，除了抗原抗体的摩尔浓度外，抗原和抗体（配体和受体）两者间的亲和力将极大的影响可逆反应中生成物的多少。三、你知道ELISA进行方法学开发时的基本原则吗？对于亲和力测定方法和原理的概述，读者可参考生物功能学筛选评价技术之亲和力评价篇。本文主要对饱和浓度法进行概括。R代表受体或抗原，L代表配体或抗体。采用饱和浓度法，如果要测定配体相对于受体的亲和力，少量R存在的情况下......阅读全文
微量元素检测的方法学分析
准确检测微量元素在人体中的含量是任何理论研究与临床应用的前提和基础，如果没有准确地检测，根本谈不上研究与应用。虽然从20世纪70年代就开始了微量元素研究，但它毕竟是一个新兴学科，检测微量元素的手段还比较陈旧和落后，无论从采样到测试前处理到测试直到结果分析都需专业人士来操作，步骤相当复杂，污染严重，且
输血传播疾病标志物的筛查检验
本文介绍了我国对献血员开展的输血传播疾病标志物的筛查检验项目，包括乙肝表面抗原、丙肝抗体、爱滋病病毒抗体、丙氨酸氨基转移酶、梅毒抗体。分析了影响检验结果的几种原因，包括实验操作、检验方法、检验试剂的质量、检测标志物的窗口期。提出了几条保证检验质量的措施，包括实验室的全面质量管理、实验室的室内质量
体外功能学实验开发的一般原则
本文从整体角度分析生物学功能评价和检测分析方法的双重间接性，并以最基本的生物学功能实验，配 体受体结合相关实验为实例，介绍采用ELISA技术竞争法进行配体受体结合相关实验方法学开发的一般过程，区分以样品以亲和力大小比较和定量检测为使用目的两个方面具体应用及方法质量的初步评价，并讨论采用同不同检
ELISA－法与化学发光法结果不一致：弄清原因少错报
实验室内同一项目检测存在不同检测方法，结果出现不相符时，我们该如何理清思路？ 由于诸多客观和主观原因，我们实验室内各类检测仪器，推陈出新，方法各异，这在一个侧面反映了检验方法学本身的历史演变，并因各自的优劣是否契合客户的需求，而在百家争鸣着。 举个例子，比如同样是传染病四项检测，在门急
实时PCR检测HSV2－DNA的方法学评价及应用
【摘要】 目的 对本室利用Taq Man MG技术建立的HSV-2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。 方法 收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本，分别用FQPCR和ELISA法同时检测，并进行比较；另对FQPCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方面进行方法学评价。结果 对60
放射免疫技术的方法学评价有什么？
除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定性等指标外，还应注意以下指标： （一）可靠性：又称健全性，是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同。借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判断。平行性好者可靠。 （二）剂量-反应曲线：通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线，待测物
定量分析方法的方法学验证(3)
五，检测限检测限是指试样中被测物质能被检测出的最低浓度或量。检测限是一种限度检验效能指标，即反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白 ( 本底 ) 值的高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。根据所采用的分析方法来确定检测限。当用 GC 和 HPLC
放射免疫技术的方法学评价有什么？
除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定性等指标外，还应注意以下指标： （一）可靠性：又称健全性，是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同。借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判断。平行性好者可靠。 （二）剂量-反应曲线：通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线，待测物
核酸分离与纯化的原理及其方法学进展
核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。核酸分离
微量元素检测的方法学分析(2)
3、关于石墨管的技术 在石墨炉原子吸收中，石墨管的技术的好坏直接影响了测试的灵敏度和重复性以及石墨管的使用寿命，各厂家在此做了许多的技术改进，如镀钯、镀铑、平台、锥型、衬钽、钨舟、浸酸等。目前使用最为广泛的是热解石墨管（PGT），它具有很好的耐检验地带网氧化性能、工作温度高，可达3700℃；它还具
钠钾氯测定方法学评价及标本要求
一、钠、钾测定 （一）标本要求 血浆或全血钾比血清低0.2～0.5mmol/L，是因为血液凝固时血小板破裂释放出一部分K+。因此，报告时必须注明是血清还是血浆。 测血钾时，无论是血清还是血浆标本一定不能溶血，轻微溶血（500mgHb/L）就可引起血钾升高3%。
微量元素检测的方法学分析（二）
４、关于石墨管纵向加热与横向加热的分析比较 自原苏联科学家 LOV`V 发明石墨坩埚分析方法并经马斯曼改为石墨炉以来，原子吸收无火焰分析——石墨炉分析方法一直采用的是纵向加热的石墨管，这种方法已发展到高级阶段，使石墨炉方法成为元素分析最灵敏的检测方法。 到 1980 年以后，美国 P-E 公
核酸分离与纯化的原理及其方法学进展
核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。核酸分离
气相测纯度需要进行哪些方法学验证
气相测纯度需要进行哪些方法学验证检验方法的验证内容：一、准确度指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。二、精密度指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度，一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。三、专属性指在其他成分（如杂质、降解产
电子显微镜应用于法学
刑事案件中对尸体、假币、锁钥。凶器及各种作案工具的判别与分析，为破案提供充分的证据 。
Nature方法学：晶体学技术重大突破
由英国利兹大学研发的一种新晶体技术能帮助科学家们观察到分子是如何工作的。这一研究成果公布在10月5日Nature Methods杂志上，介绍了这种时间分辨晶体学技术怎样帮助研究人员观察分子结构内部的变化。 虽然已经研发出了快速时间分辨晶体学技术（time-resolved crystallog
核酸分离与纯化的原理及其方法学进展
核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现,极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。核酸分
钠钾氯测定方法学评价及标本要求
一、钠、钾测定 （一）标本要求 血浆或全血钾比血清低0.2～0.5mmol/L，是因为血液凝固时血小板破裂释放出一部分K+。因此，报告时必须注明是血清还是血浆。 测血钾时，无论是血清还是血浆标本一定不能溶血，轻微溶血（500mgHb/L）就可引起血钾升高3%。 维持细胞内外钾平衡是依靠细胞膜
我国科学家论述键能方法学创新
近日，中国科学院院士、南开大学化学学院教授程津培课题组在化学顶级期刊《美国化学会志》上以《键能方法学创新与当代有机化学的理性发展》为题发表了前瞻性文章。 近一个世纪以来，键能学的研究成果为人们深刻理解化学物质转化的规律和机制、设计新试剂新反应等提供了定量依据。然而，近年来随着所研究的有机体系变
定量分析方法的方法学验证(1)
定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。
微量元素检测的方法学分析（一）
准确检测微量元素在人体中的含量是医学理论研究与临床应用的前提和基础，如果没有准确地检测，根本谈不上研究与应用。虽然从 20 世纪 70 年代就开始了微量元素研究，但它毕竟是一个新兴学科，检测微量元素的手段还比较陈旧和落后，无论从采样到测试前处理到测试直到结果分析都需专业人士来操作，步骤相
白细胞计数与分类计数的方法学评价
白细胞计数及分类有两种方法：一种是显微目视法，一种是血液分析仪方法。显微镜法是基础，血细胞分析仪在要根据显微镜法准确计数结果进行校正后方能使用，但这种计数不同于常规工作进行的白细胞计数，根据统计学研究白细胞计数结果的总变异系数为： （公式中nb为所见实际数目，nc为用计算盘的次数，np为用吸管
定量分析方法的方法学验证(2)
三，精确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率 ( ％ ) 表示。准确度应在规定的范围内测试。用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。1. 测定方法的准确度可用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分
梅毒检测方法的选择
1． 国内梅毒血清学试验的传统程序是：先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（如RPR、TRUST、VDRL等）进行初筛，再以梅毒螺旋体抗原血清试验（如TPPA、TPHA、FTA-ABS等）进行确认。美国、法国和比利时也采用类似的程序。该程序的优点是排除了大多数感染过梅毒但经过充分治疗的病人，从而使临床更易决
ELISA试剂盒各方面的应用介绍
ELISA试剂盒测定技能的开展首要在于方法学的开展，而方法学的开展依托于试剂生产技能不断进步更新和型符号物的使用。分子生物学正在并终究肯定会让对全部生命科学有一个全部而完全的认识，其对免疫测定技能开展的影响也是直接而又有用的，对以前一些难以检查的生物活性物质的测定，而且大大提高了检查的灵敏度和特异性
封闭抗体的临床应用
封闭抗体的概念 在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性 IgG 抗体，既抗丈夫淋巴细胞抗体(Antipatemal lymphocyte antibody, APLA) ，它可抑制淋巴细胞反应（MLR ），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T 细胞识别胎儿抗原的抑制物，
血红蛋白测定的方法学评价有哪些
1、氰化高铁血红蛋白法（HiCN）： 1966年被ICSH推荐为参考方法。该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。其致命的弱点是氰化钾（KCN）试剂有剧毒，使用管理不当可造成公害。 2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS）： 该法操作简单、呈色稳定、准确性和精确
电子显微镜应用于法学鉴定
刑事案件中对尸体、假币、锁钥。凶器及各种作案工具的判别与分析，为破案提供充分的证据。
DDDC化学合成方法学研究取得重要进展
近些年来，上海药物所药物发现与设计中心(DDDC)合成组研究生在柳红的带领和指导下，瞄准学科发展前沿，积极发展新的化学合成方法，并将其应用于药物合成，取得了一系列重要进展。 柳红带领研究生郭涤亮、黄河等采用廉价、环境友好的铁铜等催化体系，发展了几种快速高效的C–C键与C–N键偶联的方法，实现卤代芳
《自然·方法学》：观察线虫神经活动的新装置
在8月的《自然·方法学》杂志上，来自美国的研究人员报道说，他们发明出两种可以帮助他们研究活体线虫中神经细胞活动与行为之间的关系的新装置。 线虫是一种精微细小的微生物，它的神经系统非常简单，只有302个神经细胞。然而，如果不是使用非侵入性方法或以不符合生理规律的方法将它们固定，则很难监察它们的神