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ES打靶和CRISPR/Cas9如何选择?

近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向。国内企业亦纷纷向生物药领域挺进或转型,生物药市场愈发火热。 其中,基因编辑婴儿事件虽然近日被《科学》杂志列入2018年度十大科学突破的负面事件,但从一年前的专利之争,到年底基因编辑公司Editas人类基因编辑的临床试验获FDA批准可知,基因编辑技术的发展备受期待。 两大技术PK 就药物研发而言,目前基因编辑技术运用最为频繁的莫过于动物模型的制备。 由于普通小鼠的免疫检查点基因与对应人类基因的同源性只有60%左右,一般作用于人源蛋白的抗体并不能识别小鼠体内的蛋白,因此无法使用普通小鼠来进行抗体药物的药效评价,需要通过一定的技术把作为基因靶点的小鼠基因换成人的同源基因——即人源化小鼠来研究靶向药物,让小鼠表达人蛋白或抗体,用于开发新的治疗手段和药物。因此有行业人士预期,2019年,人源化动物模型的需求将继续增加。 目前动物模型基因编辑......阅读全文

Natureasia聚焦:CRISPR/Cas研究进展Top20

  CRISPR/Cas系统是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种后天免疫系统,其以消灭外来的质体或者噬菌体并在自身基因组中留下外来基因片段作为“记忆”。  CRISPR/Cas系统全名为常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白系统(clustered regularly inte

利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型

  国际著名生物学期刊《Nature Biotechnology》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式发表了上海市调控生物学重点实验室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀教授和李大力副教授课题组的最新研究成果。这是继今年6月该课题组在《Nucleic Acids Rese

老年性痴呆的动物模型及评价

  第一节 老年痴呆的定义   阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease,AD),又称老年性痴呆,是一种与衰老相关,以认知功能下降为特征的渐进性脑退行性疾病或综合症。病人整个大脑弥散性萎缩并出现明显的病 理组织学改变——老年斑(senile plaque, SP)(或神经炎性斑,ne

老年性痴呆的动物模型及评价

  第一节 老年痴呆的定义   阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease,AD),又称老年性痴呆,是一种与衰老相关,以认知功能下降为特征的渐进性脑退行性疾病或综合症。病人整个大脑弥散性萎缩并出现明显的病 理组织学改变——老年斑(senile plaque, SP)(或神经炎性斑,ne

老年性痴呆的动物模型及评价(三)

三、以AD发病的遗传学为基础的转基因动物模型(一)Aβ假说自从Alzheimer于1906年首次报道进行性记忆和认知功能减退的AD患者以来,以发现者名字命名的该疾病一直困扰着人们。Alzheimer注意 到病人的大脑有NFT和血管外的SP病理改变,但不能区分这是致病因子或仅仅是疾病的标志物

最新RNAi技术可媲美转基因小鼠模型

  基因编辑技术一直都是生命科学的热门研究领域,近来编辑领域出现了可与转基因小鼠技术相媲美的新RNAi干扰技术,该技术由洛克菲勒大学的研究人员研制出,在全基因组水平上首次对小鼠进行RNAi筛查研究,并在数月内发现了导致表皮肿瘤生长的基因,研究成果发表在《自然》期刊上。   RNAi技术筛查致病基因

基因编辑新进展: 关键酶消除CRISPR-Cas技术脱靶效应

  近来全球兴起的CRISPR-Cas编辑技术是基于细菌和古细菌天然防御机制的一项技术。与真核生物体内的RNA干扰过程极为相似,CRISPR-Cas 技术能够特异性切割核酸片段,不过该技术也有可能发生非特异性切割,引起基因组非靶向位点的突变,这一问题越来越受到科研人员的关注。   CRISPR

基因编辑CRISPR/Cas9技术构建转基因小鼠的优势

当当当!敲黑板!!看这里!!!2016年国家自然科学基金放榜已经有一段时间啦!各位老师是不是还沉浸在喜悦中不能自拔呢?O(∩_∩)O清醒一下,我们的目标是:基金年年有,明年中更多!每年的国家自然科学基金都是中国科研领域的风向标!通过分析国自然,可以看出最新的研究热点、目前国家重视的科目、临床上亟待解

基因编辑CRISPR/Cas9技术构建转基因小鼠的优势

  当当当!敲黑板!!看这里!!!   2016年国家自然科学基金放榜已经有一段时间啦!各位老师是不是还沉浸在喜悦中不能自拔呢?O(∩_∩)O清醒一下,我们的目标是:基金年年有,明年中更多!   每年的国家自然科学基金都是中国科研领域的风向标!通过分析国自然,可以看出最新的研究热点、目前国家重视

赛业生物宣布与Taconic达成战略合作:推动模式动物定制

  纽约州伦斯勒当地时间2018年7月18日,基因工程模式动物服务行业的领导者赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布和Taconic Biosciences达成深度战略合作伙伴关系。两家公司将整合资源共同为全球科研学者提供综合性的模式动物定制及繁殖服务。  定制动物模型在新药研究过

免疫治疗相关的人源化动物模型

昨日,美国FDA批准了全球第二个CAR-T上市,用于治疗特定非霍奇金淋巴瘤,这是继诺华的首个CAR-T疗法的又一次重大突破。肿瘤免疫疗法频传捷报,特别是以嵌合抗原受体T细胞技术(CAR-T)以及免疫检查点阻断技术为代表的新兴肿瘤免疫疗法,发挥着巨大潜力。考虑到该疗法临床前评估需要接近人类免疫系统且具

小鼠模型在转化医学研究中的应用

小鼠模型已经成为研究基因功能与致病机制、建立人相关疾病模型和评价研发药物安全性与有效性等生物医药研究不可取代的模式动物。转化医学研究就是针对来自临床患者实际问题,通过实验室包括分子、细胞及模式动物的相关基础及临床前研究,最终实现解决临床所面临的已知与未知的难题。所以,转化医学研究解决问题的思路与策略

基因修饰小鼠(GEM)模型在肿瘤学研究中的应用(一)

前沿相对于过去常用的肿瘤细胞接种和免疫缺陷小鼠模型,基因修饰小鼠(GEM)模型是建立在天然完整免疫条件下的原发(de novo)肿瘤。因此,作为肿瘤学研究的工具,GEM模型更能模拟人肿瘤的组织病理学和分子学特征,表现为有更好的遗传异质性,其优势在于能反映肿瘤细胞自身,以及肿瘤微环境中细胞等相互作

生物技术产业五大趋势预测 巨头继续重组研发

  在生物技术领域,预测未来趋势是很难的一件事。药物研究的风险无处不在,行内人士常说,如果整个医药产业市场得了感冒,那么生物技术产业就会昏迷。但反过来,如果整体市场有了一丝春风,生物技术产业将会扬帆前进。明年这一领域将延续今年的趋势,当药企巨头继续为销售下滑发愁时,许多生物技术公司却踌躇满志地在新药

基因工程小鼠命名规则

基因工程小鼠的命名规则有没有发现,当你在查询或看paper时,往往会蹦出几个贼长的,还夹杂着数字、上标、符号的名称,比如:129-Trp53tm1Holl/J、FVB-Tg(PomcCre)5Brn...... 看上去很复杂的样子。这些其实是基因工程小鼠的全名。如果把这一长串字符解构一下,常见的基因

Circulation Research器官特异性血管遗传靶向技术及应用

  5月15日,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组在国际学术期刊Circulation Research上发表了题为“Genetic Targeting of Organ-Specific Blood Vessels”的最新研究成果。该项工作建立一套新的遗传操作系统以实现更加精确的遗传靶

Circulation Research |器官特异性血管遗传靶向技术及应用

  5月15日,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组在国际学术期刊Circulation Research上发表了题为“Genetic Targeting of Organ-Specific Blood Vessels”的最新研究成果。该项工作建立一套新的遗传操作系统以实现更加精确的遗传靶

转基因小鼠的“三段进阶”

小鼠转基因的“三段进阶”。这里我们说的转基因小鼠是指:将一段外源基因随机插入到小鼠基因组中,获得过量表达目的基因的小鼠模型。转基因1.0 显微注射法构建完全随机插入转基因小鼠用显微注射针将线性化的外源DNA片段直接注入小鼠受精卵的原核中,使外源基因整合到小鼠基因组中,从而获得转基因小鼠。优点:过程较

国内外实验动物模型概览

  生命是“能够自我营养并独立生长和衰败的力量”,这是亚里士多德(Aristotle,公元前384—322)通过动物、植物的研究对生命的哲学概括。动物也成为古代先哲们探索生命奥秘的主要对象之一,盖伦(Galen,公元130—200)开创了动物解剖学和实验生理学,他将来源于动物的知识推广到对人体的认识

2012国家自然科学基金哪些干细胞项目资助金额最大

  国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位,其科研管理人员可登录科学基金网络信息系统(https:

基因敲除的原理与方法

基因敲除可以说是基因组 学、细胞分离培养以及转基因技术的组合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做个小结,以供大家学习。一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子 生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用D

基因敲除技术概述(三)

2.1.2.2 诱导性基因敲除法诱导性基因敲除也是以Cre/loxp 系统为基础,但却是利用控制Cre 表达的启动子的活性或所表达的Cre 酶活性具有可诱导的特点,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre 基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性

基因敲除技术概述(二)

2.1.2条件性基因敲除法条件性基因敲除法可定义为将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段的一种特殊的基因敲除方法[2]。它实际上是在常规的基因敲除的基础上,利用重组酶Cre介导的位点特异性重组技术,在对小鼠基因修饰的时空范围上设置一个可调控的“按钮”,从而使对小鼠基因组的修

DNA重组及基因工程技术对医学和生命科学发展的贡献 一

  作为分子生物学发展的重要组成部分,DNA重组及基因工程技术给生命科学带来了革命性变化,促进着生命科学各学科研究和应用的进步,对推动医学各领域的发展同样起着重要的作用。  一、对人类遗传信息的认识  遗传信息决定生物的形态和特征,是生物生存之本。估计人类的基因组DNA约有4×109bp,

完全基因剔除转基因动物

实验概要本文介绍了完全基因剔除转基因动物的方法。完全基因剔除(entirely knock-out):又称基因敲除、基因打靶,指应用一段与胚胎干细胞染色体上的一段序列具有高度同源性的外源DNA,通过同源重组直接将靶基因在动物个体中的活性完全消除,来观察靶基因失活、不表达的情况下会对动物个体产

Southern blot检测技术在模式动物制备中的应用‍

  哈喽,小伙伴们!走过不要错过,又到了科普知识的时间了,喜欢做分子实验的小伙伴一定听说过Southern blot这门检测技术,但大家知道为什么叫Southern吗?今天小编就为大家科普一下这门实验技术。   Southern Blot是最早出现的blot(印迹)技术,它是检测DNA的一种方法。

Southern blot检测技术在模式动物制备中的应用‍

  哈喽,小伙伴们!走过不要错过,又到了科普知识的时间了,喜欢做分子实验的小伙伴一定听说过Southern blot这门检测技术,但大家知道为什么叫Southern吗?今天小编就为大家科普一下这门实验技术。   Southern Blot是最早出现的blot(印迹)技术,它是检测DNA的一种方法。

Southern blot检测技术在模式动物制备中的应用‍(二)

图4. Southern blot鉴定同源重组事件[4]另外,在制备基因敲进和条件性基因敲除模式小鼠过程中,Southern blot检测是非常重要的一步。在我们以往的工作中,其中一例Cre定点敲进课题(如图5),Southern blot检测结果显示:小鼠1号,有明显的随机插入现象。图5

完美基因编辑: 新方法可消除CRISPR-Cas的脱靶效应

  前段时间,麻省理工的研究人员发现基因编辑工具CRISPR-Cas系统具有脱靶效应。近日,这个研究小组的负责人张峰教授表示,他们已经找到了影响CRISPR-Cas系统精确度的关键因素,这一发现将使该系统在人类细胞中的应用更安全。目前,这一研究发表在Nature Biotechnology上。

胚胎中细胞基因打靶方法

胚胎中细胞基因打靶方法置换型设计物的制备1.选择靶基因的一个部分作为设计物的组成,还包括有靶基因的另一个部分作为Southern杂交探针,以鉴定细胞中是否已发生同源重组之用。2.在质粒载体中构建一个克隆;neo基因能阻断靶基因的表达,在neo的两侧保持保留同源区;在同源区外的置换型设计物中包含一个胸