微生物接种、分离纯化和培养技术(一)
(一)接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时,需要用到涂布棒。(图3-3) 图3-3 接种和分离工具1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 常用的接种方法有以下几种:1)划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就......阅读全文
培养基的制备与微生物接种技术
培养基的制备 一、实验目的 1、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。 2、掌握基础培养基的制造方法和过程。 二、实验原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。培养基要具备以下条件:①要有适宜的营养物质和水分;②具有适宜的PH值;③配制后应经灭菌呈无菌状态。 培养基按物理状态可分液体培
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数(一)
实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数(二)
2、平板接种培养平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。⑴混合平板培养法将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取1×10-9稀释液各1mL放入编号10-9的3个平板中,同法吸取10-8稀释液各1mL放入编号1×10-8的3个平板
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的:学习从土壤中别离微生物的办法,学习无菌操作技术. 内容: 1.用稀释法别离细菌、放线菌和霉菌. 2.用平板划线办法别离微生物. 3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、资料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus
微生物酯酶的分离纯化技术应用研究
酯酶,又称羧酸酯酶,是一类可以或许对羧酸酯酯键感化的水解酶,可在水分子的参与下,经过水解感化,将酯类切割成酸类与醇类。酯酶遍及存在于动物、植物和微生物中,在水分子的参与下可以或许催化裂解酯键形成响应的醇和酸。微生物酯酶作为生物催化剂,具有很高的催化功能、底物特异性和反应特异性,应用其水解
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数(三)
注:土壤含水量的测定是将一定质量的土壤在105~110℃下烘干至恒重,再称干重。(三)、土壤中放线菌的分离与计数1、土壤稀释液的制备按实验“稀释平板计数法”中的方法进行,将菜园土稀释至10-5。在稀释时,可在盛无菌水的三角瓶中加10滴100g/L的石炭酸溶液和50μg/m L 的制霉菌素以抑制细菌和
土壤微生物分离与纯化实验原理和方法
一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。二、实验原理测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术. 内容: 1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌. 2.用平板划线方法分离微生物. 3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数(一)
一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术.内容:1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌.2.用平板划线方法分离微生物.3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普通变形菌(Proteus vulgar
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数(二)
2、平板接种培养平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。⑴混合平板培养法将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取1×10-9稀释液各1mL放入编号10-9的3个平板中,同法吸取10-8稀释液各1mL放入编号1×10-8的3个平板
微生物的分离与纯化的常用方法有哪些
分离: 稀释倒平皿法 平板划线法 单细胞挑取法 利用选择培养基分离法 纯化: 1、若是你不知道你所要纯化的微生物的特征,最简单的不知道它的菌落特征和形态大小,那现根据你要分离菌的特性,找适合的初筛培养基,找到你要纯化的菌。如纤维素菌,你在培养基中加纤维素粉或CMC-Na作碳源,这样就可以筛选出分解纤
纯种微生物的分离、转种和培养
一、 实验目的 1、了解微生物 分离和纯化的原理;2、掌握常用的分离纯化微生物的方法;3、掌握菌落特征的观察。4、学习掌握微生物的几种接种技术 5、 建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节二、实验原理 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
纯种微生物的分离、转种和培养
实验概要本实验介绍了微生物分离和纯化的基本原理,旨在掌握常用的分离纯化微生物的方法、菌落特征的观察、微生物的几种接种技术、建立无菌操作的概念及无菌操作的基本环节。实验原理从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择
微生物接种方法之平板划线分离法介绍
平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的,故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品
培养基的制备与微生物接种技术(1)
培养基的制备一、实验目的1、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。2、掌握基础培养基的制造方法和过程。二、实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。培养基要具备以下条件:①要有适宜的营养物质和水分;②具有适宜的PH值;③配制后应经灭菌呈无菌状态。培养基按物理状态可分液体培养基、固体培
培养基的制备与微生物接种技术(2)
(9)搁置斜面:将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。(10)无菌检验:灭菌后的培养基放入37℃恒温箱中培养24h,以检验灭菌效果,无污染方可使用。(二)制备马铃薯蔗糖琼脂培养基1、配方:马铃薯(去皮)200g、蔗糖15—20g、琼脂2
微生物如何接种?微生物三点接种法
接种是微生物技术中最基本的操作之一,接种技术在微生物的分离纯化、生理生化等试验中都非常重要。由于接种的目的不同,所采用的接种方式也不同,接种可分成斜面接种、穿刺接种和三点接种等。选择正确的接种方法,对于微生物的分离、纯化、增殖和鉴别都有重要作用。因接种方法的不同,常常采用不同的接种工具,如接种环、接
生物分离纯化系统
生物分离纯化系统是一种用于水产学领域的分析仪器,于2018年12月5日启用。 技术指标 系统泵:双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀,每个泵后都有润洗通路,润洗泵的柱塞杠,延长泵的使用寿命;流速0.001-25ml/min(单泵);装柱可以双泵模式运行,达到0.1–50ml/min;压力范围0
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
分离纯化的流程
粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。
分离纯化的流程
粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
蛋白分离纯化步骤
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
分离纯化的流程
粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。
分离纯化总RNA
1) 用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取纯化组织和细胞中的RNA1. 选取从组织细胞或细胞中提取RNA的适宜方法组织a. 分离组织并立即置于液氮中。b. 将约100 mg冰冻组织含液氮的研钵中,用研棒研磨。研磨过程中可加入液氮使组织保持冰冻状态。c.
mRNA提取、分离纯化
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
蛋白分离纯化步骤
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有