冷冻切片的制作方法及注意事项

冷冻切片的方法及注意事项一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡,使细胞内结构移位。注:取材中目的标本既要明确也要确保其结构的完整性,应避免不必要的脂肪及坏死组织附着;要尽量剔除毛发、硬骨或钙化物;保乳手术切缘由于脂肪组织较多,取材厚度最好不要超过 3mm,厚者冰冻费时,大者难以切完整。甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。三、冷冻切片⒈取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上冰冻,用吸热器压住组织,至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片(1~3分种)。⒉将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。⒊调好欲切的厚度,根......阅读全文

显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验

冷冻切片机可以用于:(2)切制薄而均匀的组织片;(2)组织用坚硬的石蜡或其他物质支持,每切一次借切片厚度器自动向前(向刀的方向)推进所需距离,厚度器的梯度通常为1微米。实验方法原理切制石蜡包埋的组织时,由于与前一张切片的蜡边粘着,而制成多张切片的切片条。实验材料大小鼠大脑试剂、试剂盒手术器械 显微冷

显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验

实验材料 大小鼠大脑试剂、试剂盒 手术器械 显微冷冻切片机 包埋剂仪器、耗材 大小鼠立体图谱实验步骤 1.  安装刀具,移上安全杆。调整切片机温度到-20 ℃((右手边up 和down 二个按钮调节, up调高温度, down,降低温度)。 2.  从-80 ℃冰箱取出脑组织在切片机或-20 ℃冰箱

冷冻切片机维修常见故障和工作程序

SLEE冷冻切片机工作程序1.打开电源主开关,检查/设定冷冻箱温度、冷台温度、样本头温度、切片厚度,进入常规界面(一般情况下.此机为24小时通电,处于常开机状态,所以只要上班时启动冷台制冷,下班时关闭冷台制冷)。2.切片操作程序——将已“取材”的标本伴包埋剂放在样本头上,置速冻台“急冻”,锁紧“切片

冷冻切片机的操作流程和维修保养

  冷冻切片机的操作流程和维修保养   基本操作:   1.在应用前2小时打开开关电源,并将温度设置在-25℃;   2.将适度尺寸和薄厚的标本采集放到蘑菇状杯上,再加冷藏蜡,夹在自动切片机的固定不动槽体;   3.提前准备好玻片,挑选切开薄厚,摇晃摇杆,就能制成切开;   4.将制

冷冻切片机为什么要配备烘干机使用

因为在切片的时候会产生水,所以在切片结束后,要用烘干机烘干。

中国科学家揭示减少冷冻切片损伤新方法

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/505874.shtm7月31日,中国科学院生物物理研究所章新政课题组在国际期刊《结构》发表新研究成果,使用定量分析方法,揭示降低聚焦离子束电压减少其对冷冻切片的损伤。在这项研究中,研究人员建立了一个新方法

电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明

   对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固,螺丝有无松动,机器运转是否流畅,如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后,直径会变小,当刀口离定尺板大时,需松开定尺板背面的紧固螺钉,朝刃口移动定板尺,距刃口2mm间隙为宜,然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小

清华大学仪器共享平台Leica-冷冻超薄切片机

仪器名称:冷冻超薄切片机仪器编号:16002271产地:德国生产厂家:Leica型号:UC7+FC7出厂日期:201408购置日期:201602所属单位:生命学院>蛋白质研究技术中心>冷冻电镜平台样品制备>设施细胞冷冻电镜平台放置地点:清华大学生物译学馆U6-109(何添楼北侧,地下六层出1号电梯连

电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明

  对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固,螺丝有无松动,机器运转是否流畅,如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后,直径会变小,当刀口离定尺板大时,需松开定尺板背面的紧固螺钉,朝刃口移动定板尺,距刃口2mm间隙为宜,然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小时

冷冻切片机的基本操作、维修保养及技术实验

   冷冻切片机的基本操作:    1.在使用前2小时开启电源,并将温度设定在-25℃;    2.将适当大小和厚度的标本放在蘑菇状杯上,加上冷冻蜡,夹在切片机的固定槽内;    3.准备好玻片,选择切片厚度,摇动手柄,即可做成切片;    4.将做成的切片小心的吸附在玻璃片上;

冷冻切片机的基本操作、维修保养及技术实验

冷冻切片机的基本操作:  1.在使用前2小时开启电源,并将温度设定在-25℃;   2.将适当大小和厚度的标本放在蘑菇状杯上,加上冷冻蜡,夹在切片机的固定槽内;   3.准备好玻片,选择切片厚度,摇动手柄,即可做成切片;   4.将做成的切片小心的吸附在玻璃片上;   5.使用结束后关闭电源,清洁腔

冷冻切片机的基本操作、维修保养及技术实验

   冷冻切片机的基本操作:    1.在使用前2小时开启电源,并将温度设定在-25℃;    2.将适当大小和厚度的标本放在蘑菇状杯上,加上冷冻蜡,夹在切片机的固定槽内;    3.准备好玻片,选择切片厚度,摇动手柄,即可做成切片;    4.将做成的切片小心的吸附在玻璃片上;

石蜡切片、冰冻切片及振动切片的区别

一、石蜡切片    把修好的蜡块装在旋转切片机上,即可进行切片(section)。切片必须保持切片刀锐利,切片厚度通常为5~7um,也可根据染色需要切成不同厚度,一般不旋转式切片机超过10um。切好的蜡带,放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述

石蜡切片与冰冻切片

一、组织和细胞标本类型:(一) 组织标本类:1、 石蜡切片:组织形态保存好2、 冰冻切片:抗原性保存好(二)细胞标本类:1、组织印片 2、细胞培养片(细胞爬片) 3、细胞涂片二、组织取材1、脑组织和神经组织应采用灌注固定后,再进行后固定。2、组织取材注意事项:(1)标本新鲜:组织要求离体后30min

石蜡切片和冰冻切片的比较

(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。(2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细

徒手切片

玻片标本的一种。生物实验中用来观察形态结构的一种用徒手制作的切片,不需要什么特殊工具和机械设备,而将欲观察的材料,用锋利的切片或剃刀切成极薄的薄片,薄片应完全透明,切好后,移置一滴水中,放载玻片上,即可进行显微观察。此法适宜观察新鲜的生物材料,方法简便,容易掌握。

冰冻切片

实验概要冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。实验步骤1. 冷冻切片的制作方法    1) 将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度,一般情况下为-18~-25℃。    2) 在标本冷冻托上涂布一层冷冻包埋剂——OCT

连续切片

中文名称连续切片英文名称serial section定  义从同一组织包埋块上连续切成的切片系列。通过对连续切片的分析可构建细胞或组织的三维图像。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

电镜所需的切片之超薄切片介绍

超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供电子显微镜观察用的切片。由于电子穿透组织的能力低, 所以供电子显微镜观察用的切片要求极薄(一般厚度为40~50 nm) ,即为超薄切片  。

石蜡切片和半薄切片的制作

实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液),乙醇,二甲苯,纯石蜡,蜂蜡,树脂胶主要设备真空泵,AO手摇式切片机,Olypmus BH-2型显微镜,LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作   1) 取材固定新鲜配置4%戊二醛固定液(pH7.

超薄切片技术

在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步骤。

组织切片机切片边缘着色的原因分析

原因分析:a组织边缘与玻片粘贴不牢,边缘组织松脱漂浮在液体中,导致洗涤不彻底;b切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。解决措施:组织的前期处理应规范,试剂要充分覆盖组织,尽量避免选用坏死较多的组织。

组织切片机切片背景过深的原因分析

原因分析:a.漂洗不够;b.切片或涂片过厚;c.蛋白质封闭不够或所用血清溶血d.使用全血清抗体稀释不够;e.底物成色反应过久;解决措施:对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。

振动切片方法及与石蜡、冰冻切片的比较

振动切片用振动切片机,可以把新鲜组织(不固定不冰冻)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反应板进行免疫组织化学染色,然后在解剖显微镜下检出免疫反应阳性部位,修整组织进行后固定,最后按电镜样品制备、脱水、包埋、超薄切片、染色观察等。组织不冰冻,无冰晶形成和组织抗原破坏,在免疫组化染色前避免了组织脱水、透

徕卡冰冻式切片机切片制样方法

电镜样品制备技术直接影响样品的结构和反差。制备高质量的超薄切片,是发挥透 射电子显微镜优良性能的前提。透射电子显微镜的分辨率理论上可达到o.3nm左右, 但是六于样品制备技术的限制,分辨率很难达到理论值。对于生物样品来说,一般只能 达到2nm的水平。 高质量的超薄切片基本特征:①样品应该能耐受电子束

组织切片机所有切片呈阴性的原因分析

原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;b.染色未完全按照操作步骤进行;c.漏加一种抗体或抗体失活;d.复染或脱水剂使用不当;e.底物中加入的过氧化氢少或失活。解决措施:设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达,说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性,便是真实的阴性,说明

组织切片机所有切片呈阳性的原因分析

原因分析:a缓冲液配置中未加氯化钠和PH值不准确,洗涤不彻底;B使用已变色的呈色第五溶液,或呈色反应时间过长;C过氧化氢浓度过高,呈色反应过快且粘附剂太厚;D切片在染色过程中抗体过浓,或干片了;E抗体孵育时间过长。解决措施:缩短抗体孵育时间和呈色反应时长,染色过程中防止出现干片情况。

组织免疫荧光是用石蜡切片还是冰冻切片

二者应该都是可以的,具体要看自身的实验条件哪个操作更方便以及抗体的性质。看你的实验要求,冰冻片要求较高(低温环境,液氮,冰冻切片机,OCT包埋剂等等),石蜡片的制作就比较简单,试剂也较便宜。另外看你购买的抗体适用于哪种片子免疫组化的话,一般大都使用石蜡切片。免疫荧光染色的话,都可以的,冰冻切片比较容

石蜡切片如何检测线粒体功能需要多少石蜡切片

线粒体有关的脑组织染色问题(线粒体,脑组织,石蜡切片,认知功能,心理)] 本人心理专业,研究认知功能方面,无奈需要生理的指标,因此对动物认知相关的脑区进行取材,主要想测线粒体功能和形态方面的指标。可是本人对这方面一窍不通,急需大家伙帮忙。我现在把组织分为两组进行处理,一部分-80冷藏了,好像是做分子

冰冻切片的应用

  (1)在手术进行中,突然发现病人的病变与原诊断,原定手术方案不相符合,或者怀疑时,需要病理确定。  (2)了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞,或者转移的程度,以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。  (3)对于已确定为恶性肿瘤的患者,则需要了解其手术范围是否足够,上下切缘是否有残存的