用于杂交瘤上清液浓缩的关键性样本制备工具
摘要本研究的重点是在进行亲和色谱前使用Vivaflow® 200切向流膜包对多达3 L的鼠杂交瘤澄清上清液进行10倍浓缩。研究发现,同时使用两块Vivaflow® 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 时,抗体回收率始终超过98%,浓缩速度约为20 – 25 mL/分。简介采用杂交瘤技术生产的单克隆抗体在 (生物) 制药行业、研究以及体外诊断 (IVD) 产品的生产中均有广泛应用。诸如蛋白质免疫印迹、免疫荧光和ELISA等分析技术应用广泛。生产和加工单克隆抗体——特别是为IVD市场用户生产需要一些保证优质的措施,如实施ISO 9001质量体系以及采用zui新的技术。抗体生产中一个不可缺少的步骤就是使用超滤和微滤膜进行过滤 (1, 2)。搅拌加压过滤曾是最常用的实验室浓缩方法,浓缩体积不到500 mL。以往的常见问题包括速度慢、泡沫过多以及缺少死体积保留导致抗体大量丢失。这迫使生产科学家寻找实验室规模的正......阅读全文
用于杂交瘤上清液浓缩的关键性样本制备工具
摘要本研究的重点是在进行亲和色谱前使用Vivaflow® 200切向流膜包对多达3 L的鼠杂交瘤澄清上清液进行10倍浓缩。研究发现,同时使用两块Vivaflow® 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 时,抗体回收率始终超过98%,浓缩速度约为20 – 25 mL/分。简介采用杂交瘤技
用于杂交瘤上清液浓缩的关键性样本制备工具
摘要本研究的重点是在进行亲和色谱前使用Vivaflow® 200切向流膜包对多达3 L的鼠杂交瘤澄清上清液进行10倍浓缩。研究发现,同时使用两块Vivaflow® 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 时,抗体回收率始终超过98%,浓缩速度约为20 – 25 mL/分。 简介采用杂交瘤
杂交瘤细胞的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死,用75
制备小鼠T细胞杂交瘤
可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 (T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子的条件下大量的扩增。研究证明,杂交瘤对研究T C R 特异性识别抗原以及C D 3-T C R 复合物的生物化学和分子生物
杂交瘤细胞(hybridoma)的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备 选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。 2. 脾淋巴细胞的准备 a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。 b、颈脱位将小鼠致死,
杂交瘤细胞(hybridoma)的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死,用75
杂交瘤制备Z强音——ECM-2001
什么是杂交瘤:杂交瘤:是指两个或两个以上细胞合并形成一个细胞的现象,他可使两个不同来源的细胞核在同一细胞中表达功能。?杂交瘤制备原理:杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主
不同塑料样本的制备
增塑剂分析时前的样本制备 在聚合物中添加增塑剂的目的是更加方便地生产塑料制品。由于增塑剂具有潜在风险,因此,事先对增塑剂的效果进行正确分析很有必要,然而正确的试样制备是得出正确分析结果的前提。 图1.经SM 300磨碎机和Cryomill球磨机粗磨和细磨后的橡胶鸭颗粒。
简化样本制备的微波系统
用于样本制备的多通道微波新技术 样本制备过程中使用微波技术会得到意想不到的效果。它快速、坚固在食品生产过程中的监控中的作用就如塑料在工业领域中的作用一样,结合了两种技术的新系统拥有了更大的灵活性。 在过去几年里,微波消解技术被广泛地应用在元素分析时的样本制备过程。如今,在现代化实
石蜡包埋组织样本的制备
实验材料 组织胰蛋白酶试剂、试剂盒 二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材 尼龙网实验步骤 1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,
FDA的样本制备方法举例
(1)样本的整理在测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。 水果:去掉水果的把、凹处和核。 香蕉:切掉两头。 芒果:去掉皮和核。 甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。
石蜡包埋组织样本的制备
实验材料组织胰蛋白酶试剂、试剂盒二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,更换 1
FFPE样本核酸(DNA/RNA)制备
福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片的存档代表了珍贵且来源广泛的生物医学研究材料。随着越来越多的研究人员转向 FFPE 样品的分子分析,开发特定的操作步骤,考虑这些样品的独特性质就变得越来越重要。QIAGEN 在 FFPE 样本纯化及下游检测整个流程中都提供完善的解决方案。QIAamp
杂交瘤技术制备催化抗体的方法介绍
经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞,与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合,融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养,通过选择培养,以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化,即繁殖成母体的同
如果提升样本制备效率和质量
样品制备的目的有:1、为某研究需要提供少量原料,可以过制取样品提供。2、新产品研发,通过制取样品,对样品进行分析判断是否为需要的产品。3、通过样品制备过程,获取制备的各种工艺参数,设备情况,从而设计生产线进行产品生产。为了保证样品制备的厚度、角度,选择电镜样品制备需要它具有分辨率高和景深长等特点,且
质谱样本制备技术资料
试剂耗材: Milli-Q water、Non-powder gloves、Face mask、Hat、10μl and 200μl tips(eppendorf)、Menthol(Fisher M/4056/17)、Acetonitrile(Fisher A/0626/17)、Try
食品检测样本制备方法举例
(1)样本的整理 测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。水果:去掉水果的把、凹处和核。 香蕉:切掉两头。 芒果:去掉皮和核。 甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。 坚果类:去掉壳。 菠萝:
如果提升样本制备效率和质量
样品制备的目的有:1、为某研究需要提供少量原料,可以过制取样品提供。2、新产品研发,通过制取样品,对样品进行分析判断是否为需要的产品。3、通过样品制备过程,获取制备的各种工艺参数,设备情况,从而设计生产线进行产品生产。为了保证样品制备的厚度、角度,选择电镜样品制备需要它具有分辨率高和景深长等特点,且
如果提升样本制备效率和质量
样品制备的目的有:1、为某研究需要提供少量原料,可以过制取样品提供。2、新产品研发,通过制取样品,对样品进行分析判断是否为需要的产品。3、通过样品制备过程,获取制备的各种工艺参数,设备情况,从而设计生产线进行产品生产。为了保证样品制备的厚度、角度,选择电镜样品制备需要它具有分辨率高和景深长等特点,且
血液样本采集和血涂片制备
一、血液生理概要 要点1: 离体后的血液自然凝固,分离出来的淡黄色透明液体称为血清。血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。血清与血浆差别是:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。 要点2: 全血适用于临床血液学检查,如血细胞计数、分类和形态学检查
食品检测样本制备方法举例
(1)样本的整理 测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。水果:去掉水果的把、凹处和核。 香蕉:切掉两头。 芒果:去掉皮和核。 甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。 坚果类:去掉壳
饲料样本的采集、制备及保存
(一)样本的采集采样是饲料检测的第一步。样本包括原始样本和化验样本。原始样本来自饲料总体、化验样本来自原始样本。四分法:将原始样本置于一块塑料布,提起塑料布的一角,使饲料反复多动混合均匀,然后将饲料展平、用分样板或药铲、从中划“十”字或以对角线连接,将样本分成四等分,除去对角的两分,将剩余的两分,如
抗体酶的杂交瘤技术制备法介绍
经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞,与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合,融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养,通过选择培养,以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化,即繁殖成母体的同
关于杂交瘤细胞饲细胞的制备方法介绍
小鼠腹腔细胞制备方法: 1.引颈处死小鼠,用酒精消毒表体。 2.切开腹部皮肤剥向两侧,暴露出腹壁。 3.用无菌 7 号针头注射器,吸取 3ml 无血清培养液。 4.用小镊夹起腹壁,注入 3ml 无血清培养液,用手反复轻轻揉腹壁,再反复抽吸 3~5 次。 5.收集末次吸得的细胞,注入 5
单克隆抗体上清制备实验——大量制备杂交瘤或细胞系
实验步骤1. 同备择方案 1 中大规模制备 MAb 上清的步骤 1~4,但等细胞长到合适的密度时就应收获细胞,或者是在细胞生长的平台期收获。2. 将细胞倒入无菌的 250 ml 锥形离心管中,于 4℃ 250 g 离心 15 min, 弃上清,置细胞沉淀于冰上。3. 将 10 瓶细胞沉淀用 4℃ 的
生物芯片生物样本的制备方法
分离纯化、圹增、获取其中的蛋白质或DNA、RNA并用荧光标记, 才能与芯片进行反应。用DNA芯片做表达谱研究时,通常是将样品先抽提MRNA,然后反转录成CDNA。同时掺入带荧光标记的dCTP或dUTP。
细菌表达蛋白质和样本制备
一般直接用SDS凝胶加样缓冲液裂解,具体方法如下:[试剂与设备](1)表达待检测蛋白质的细菌。(2)50mmoL/LTris-HCl(pH7.4)。(3)2xSDS凝胶加样缓冲液:100mmol/L Tris—HCl(pH6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4% SDS(电泳级)0.2%
新鲜实体组织样本的制备(机械法)
剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一