大分子量蛋白200KD，在做WB要注意什么？
1）做200kd蛋白的WB时要注意，分离胶最好选择>7%的；剥胶时要小心；2）转移时间需要相应延长；要做分子量参照（否则出现杂带不知道如何分析）；3）转膜液中甲醇含量可适当降低，推荐使用湿装转膜效率更高！......阅读全文
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
常用蛋白质分子量标准参照物
（1）高分子量标准参照 （2）中分子量标准参照 （3）低分子量标准参照肌球蛋白 212,000 磷酸化酶B 97,400 碳酸酐酶 31,00β-半乳糖甘酶B 116,000 牛血清白蛋白 66,200 大豆脻蛋白酶 21,500磷酸化酶B 97,400 谷氨酶脱氢酶 55,000 抑制剂 牛血清白
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
目的蛋白分子量与转膜时间对应关系
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
免疫球蛋白的分子量各是多少
人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白（γ-球蛋白）中。可分为五类：免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE），它们的分子量分别是：免疫球蛋白G相对分子量约为150000道尔顿。免疫球蛋白A相对分子量约为160千道尔顿。
你的－WB－内参选对了么？
你的 WB 内参选对了么？ 关键词： 科研 WB 内参 2019-08-14 17:00 来源：CST 点击次数：19 要想底气十足地秀
SDS－PAGE电泳的基本原理
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS（十二烷基硫酸钠），SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合
什么是层粘连蛋白？
层粘连蛋白又称板层素其分子量为805kD，由一个400kD的α链和两条200kD左右的β链组成。它是构成细胞间质的一种非胶原糖，在肝内主要由内皮细胞及贮脂细胞合成，与胶原一起构成基底膜的成分。其生物功能是细胞黏着于基质的介质，并与多种基底膜成分结合，调节细胞生长和分化。
什么是层粘连蛋白？
层粘连蛋白又称板层素其分子量为805kD，由一个400kD的α链和两条200kD左右的β链组成。它是构成细胞间质的一种非胶原糖，在肝内主要由内皮细胞及贮脂细胞合成，与胶原一起构成基底膜的成分。其生物功能是细胞黏着于基质的介质，并与多种基底膜成分结合，调节细胞生长和分化。
关于WB实验中蛋白样品制备的常见问题分析
WB实验又称免疫印迹实验，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。 对于一直都在做蛋白研究的你，在样品制备
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——Western印迹法
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程（一）
大家好，我是黄博，吉凯一小兵，蛋白质组学实验狗。今天的故事是一个作文从没及格过的闷骚理科男（我一直是这么定位自己的）是如何被陈博内个大尾巴狼生生逼来写文章的故事，真的是有血、有泪、有shi！情节需要，中间可能会穿插一些技术方面的内容，请各位自动忽略。那是一个月黑风高的晚上，本人和大尾巴狼（我实在不想
涂层测厚仪选购要注意什么？
油漆涂层测厚仪选择要注意以下几点：1.首先要确认涂层基材材质，因为仪器有区分材质，如铁基涂层测厚仪，只能测试钢铁等金属材料的油漆涂层，而对于塑料上面喷涂的油漆则无能为力，针对非金属基材的涂层厚度必须选择双功能仪器才能测量。2.测试厚度量程，油漆涂层厚度不能超过仪器本身量程范围，以免无法使用。3.测量
今年过节出行要注意什么？
阳性后多长时间会产生抗体？什么情况下会出现二次感染？元旦春节应该如何做好个人防护？12月22日，记者采访到北京地坛医院急诊科主任兼感染性疾病临床中心副主任王凌航。他表示，如果已经感染了新冠病毒，在4至6周的短时间内感染同一毒株的可能性是微乎其微的。但依然要注意预防流感等其他呼吸道病毒感染，勤洗手
液态物质灭菌要注意什么？
液态物质灭菌要注意实际工作中常需要对液体灭菌，高压灭菌锅说明书中，表明能够对瓶状的液体进行灭菌处理，但在实验中却遇到了意外的情况：用敞口的玻璃瓶灭菌，其结果是玻璃瓶中的液体减少了1/3；用塑料薄膜紧紧封住瓶口，封口塑料薄膜中间破裂，玻璃瓶中的液体仍减少1/3。在对液态物质进行灭菌时，当灭菌结束注意卸
温度检测需要注意什么
温度是表征物体冷热程度的物理量，温度检测就是借助各种物体的热交换及冷热程度变化的物理特性加以间接检测。一.温度检测仪表的分类温度检测仪表按测温方式可分为接触式和非接触式两大类，接触式测温仪表一般分为膨胀式、压力式、热电偶和热电阻。通常来说，接触式测温仪表比较简单、可靠，测温精度较高。但由于受到耐高温
电泳时要注意些什么
1、工件要有工艺孔，防止串槽及内腔无漆膜；2、要注意杀菌；3、控制工艺参数。电泳搅拌是不能停的；4、电泳前除油污、水洗一定要彻底，防止出现缩孔或影响电泳槽液电导率；
电泳时要注意些什么
1、工件要有工艺孔，防止串槽及内腔无漆膜；2、要注意杀菌；3、控制工艺参数。电泳搅拌是不能停的；4、电泳前除油污、水洗一定要彻底，防止出现缩孔或影响电泳槽液电导率；
采购电子地磅要注意什么？
1.比较重要的传感器和仪表。 不熟悉的话，购买知名品牌的比较保险，如宁波柯力，上海耀华等等。知名品牌质量比较好，而且维修起来，也方便。 2.电子地磅厂家的选择。 一般就进原则为好，因为地磅面积较大，也比较重，运费较高，如果选用外地的地磅，则增加了
WB跑胶后没有条带是什么原因
提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多，你可以减少到200-300ul试试，提取蛋白后做个BCA蛋白定量，在做后续的考蓝染色，确定蛋白没有问题再电泳转膜
在WB实验中为什么需要使用内参抗体？
在WB实验中为什么需要使用内参抗体？进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体？ 要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性
在WB实验中为什么需要使用内参抗体？
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子
为什么重铬酸钾在做标准溶液时要烘干2h
如果是刚开启的基准物重铬酸钾，烘两小时可以了。如果开启了放置很久没用的，一般烘两个半小时可以了。你也可以自己多烘几次称重来看它是不是已经恒重了。你可以烘2小时拿出来冷却，称重后，再烘半小时，冷却称重，看这两个数据的变化了。没什么变化就恒重了。
为什么重铬酸钾在做标准溶液时要烘干2h
如果是刚开启的基准物重铬酸钾，烘两小时可以了。如果开启了放置很久没用的，一般烘两个半小时可以了。你也可以自己多烘几次称重来看它是不是已经恒重了。你可以烘2小时拿出来冷却，称重后，再烘半小时，冷却称重，看这两个数据的变化了。没什么变化就恒重了。
为什么重铬酸钾在做标准溶液时要烘干2h
如果是刚开启的基准物重铬酸钾，烘两小时可以了。如果开启了放置很久没用的，一般烘两个半小时可以了。你也可以自己多烘几次称重来看它是不是已经恒重了。你可以烘2小时拿出来冷却，称重后，再烘半小时，冷却称重，看这两个数据的变化了。没什么变化就恒重了。
为什么Western－blot－出现两个目标蛋白条带
1.因为WB的一抗识别的蛋白质的表位是顺序表位，不是空间表位，所以WB状态下的抗原-抗体识别，与非变性的生理条件下的抗原-抗体识别不同。2.WB之前，先用分子筛纯化同时也是检测一下目的蛋白产物是否成功。也就是目的蛋白是否成功表达了，而且在提取后稳定存在了。3.非特异性的条带分子量偏大可能是SDS P
解析为何纯化蛋白与人血清蛋白分子量不一样
蛋白质作为生命活动中起重要作用的生物大分子，与一切揭开生命奥秘的重大研究课题都有密切的关系。蛋白质是人类和其他动物的主要食物成分，高蛋白膳食是人民生活水平提高的重要标志之一。以下针对纯化蛋白与人血清蛋白分子量不一样作分析：客户问：用大肠杆菌表达纯化的蛋白，和人血清中这种蛋白的分子量不同，wester
蛋白质电泳分子量标准试剂的取用规则
蛋白质电泳分子量标准试剂的取用规则：（1）试剂不能与手接触。（2）要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，*不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，方可取用另一种试剂。（3）试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处（
大分子量蛋白转印的5个技巧
做western blot印迹膜时，较大的蛋白质众所周知是难以处理的。 特别是，您可能很难实现良好的转印效率。 在某些方面，蛋白质难以朝着你想要的方向前进。 我们将给5点建议，帮助胶上大分子量蛋白的转印。 01 牺牲胶的韧性来提高效率 低浓度的丙烯酰胺凝胶可能难以操作。一旦手指触摸它就会
凝胶层析(gel－chromatography)法测定蛋白质分子量
一、实验目的1.了解凝胶层析的基本原理。2.掌握利用凝胶层析法测定蛋白质分子量的实验技能。二、实验原理凝胶层析 (gel chromatography)是20世纪60年代发展起来的一种分离分析方法。其法有许多同义词如凝胶过滤、分子排阻层析、分子筛层析、凝胶渗透层析等。凝胶层析是利用具有一定孔径大小的