VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明
一、性能参数产品名称:VigeneFection 简称“VGF” 产品货号: FH880806浓度:1μg/μl 推荐使用浓度:1μg-10μg/ml规格:50μl (赠送) 保存条件:2-8℃ ,切勿放-20℃有效期至: 18个月 ......阅读全文
质粒转染细胞多长时间提取蛋白
需要根据具体情况进行具体分析,推荐从以下角度进行分析:对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计,分别取样然后做SDS-PAGE\WB分析;参考实验室经验数据;尝试采用磁珠IP试剂盒产品(义翘有相关产品)进行小量样品的快速纯化;
质粒转染细胞之后多久测外源性mrna表达
不整合入基因组中,可以整合到细胞基因组上进行表达,比如腺病毒类的表达载体;有些质粒上有整合的序列。一般的表达质粒上后面有自带的polyA序列,所以产生的mRNA是带polyA尾巴的质粒转染细胞后是整合到基因组中还是游离存在这要看你用的是哪一种质粒载体,有些质粒就在细胞中进行表达
六孔板转染质粒加多少ug
你是插入片段6K还是质粒大小6K 不过无所谓 都不算大 可以直接脂质体转染 病毒侵染是为了将质粒整合到细胞的基因组中 保证长期稳定表达 不会随着细胞分裂丢失 如果你不需要这种稳定表达 就直接转染好了 ps 病毒侵。
质粒,一般转染多久可以提蛋白
真核细胞转染么?一般转染48h后目的蛋白表达量达到峰值~单根据具体细胞而定~原核细胞体外表达一般是16度过夜诱导~
质粒转染细胞多长时间提取蛋白
需要根据具体情况进行具体分析,推荐从以下角度进行分析:对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计,分别取样然后做SDS-PAGE\WB分析;参考实验室经验数据;尝试采用磁珠IP试剂盒产品(义翘有相关产品)进行小量样品的快速纯化;
转染的时候质粒浓度太大用什么稀释
影响是因为电转化要比较高的DNA浓度,纯化都会造成大量损失。所以最好在线性化之前把质粒浓度提高到转化所需浓度(大于1ug-ul,略低关系不太大)。
大鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)酶联免疫分析
大鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)水平
用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些
转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生
用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些
转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生
细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞
细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物
细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞
细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物
细胞转染率低-转染试剂要全背锅吗?
细胞转染低都是PCR试剂的问题吗?PCR纯度不够确实会有这样的问题,所以选择PCR试剂很重要 主要还是以下几点影响:1. 其他微生物污染您觉得您养的细胞 ,不,不,不 ,可能您只知道您养的是细胞,你不知道的是您的细胞可能背着您养了一群小三,比如支原体,病毒,黑胶虫等等,特别是支原体它可以更改细胞的特
如何优化GenMuteTM转染试剂,提高siRNA/DNA共转染效率?
GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。siRNA/DNA共转染时,siRNA的最佳浓度范围是0.5ηM到10ηM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”,切勿使用超过20ηM的siRNA。以24孔板为例,如下步骤将对如何优
覆盖更宽广的领域转染试剂
Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Roche新推出FuGENE HD转染试
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FuGENE HD 转染试剂:覆盖更宽广的领域 Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Ro
磷酸钙介导的质粒-DNA-转染真核细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞 试剂、试剂盒 CaCl2 氯喹 Giemsa 染液
磷酸钙介导的质粒-DNA-转染真核细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 CaCl2氯喹Giemsa 染液甘油HEPES 盐缓冲液甲醇磷酸盐缓冲液丁酸钠TE质粒 DNA细胞生长培养基仪器、耗材 组织培养皿(60 mm) 或 12 孔板实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。CaCl
质粒太大转染转不进去怎么办
更换质粒、优化转化条件、使用不同类型的转化方法、检查菌种状态。1、更换质粒。质粒本身太大的问题导致转不进去,可以尝试更换另一种质粒,以确保其质量和兼容性。2、优化转化条件。转化条件如质粒浓度、农杆菌菌液浓度、转化时间、转化温度等,都可能影响转化效果。可以尝试调整这些条件,以优化转化过程。3、使用不同
磷酸钙介导的质粒-DNA-转染真核细胞实验
本方法中介绍的磷酸钙介导的质粒 DNA 转染贴壁细胞是对 Jordan 等建立的方法 (1996) 的改进。Jordan 等大大优化了磷酸钙介导的中国仓鼠卵巢细胞与人胚肾 293 细胞的转染方法。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数
试剂盒提取质粒原理
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。在pH值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8乙
细胞转染实验介绍
一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介
关于转染试剂的基本信息介绍
转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具,而且是基因治疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、
关于转染试剂的历史背景介绍
已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3
CRISPR-技术进行细胞-TP53-基因敲除
实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体,转染 293T 细胞,构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1 载体表达
细胞转染
脂质体介导法 磷酸钙沉淀法 实验方法原理 外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的
cas9-质粒转染细胞后多长时间过流式
看你想不想让cas9整合入细胞核了。如果只是筛选的话,24-48小时,一般的启动子应该已经启动基因表达了
杆状病毒表达系统用于表达融合型蛋白的转染质粒
是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。
DEAE葡聚糖转染试剂的功能特点
DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。
全球首发“基因转染荧光试剂”-瞄准癌细胞
4月18日,“癌症早期诊断与个体化医疗新技术研讨会暨2010纳奥生物产品发布会”在浙江杭州举行,纳奥生物全球首家出产的“基因转染荧光试剂和系列纳米荧光探针产品”正式上市,并现场给多家全国知名医疗机构赠送了试用品。 恶性肿瘤是严重危害人类生命和健康的常见病和多发病,据了解,在35~59岁年龄组中,
如何优化LipoD293转染试剂?
LipoD293DNA转染试剂是脂质体DNA转运工具的升级版本。我们实验室使用LipoD293DNA转染试剂成功转染了HepG2,LNCaP,CHO及HEK293细胞。接下来,我们乐意就如何提高转染效率,降低毒性等方面的小技巧同大家分享。1、LipoD293/DNA的比率。尽管合适的比率由细胞类型决