用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些
转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生shRNA,然后不断产生新的siRNA,因此维持作用的时间长(可以超过两周).另外用质粒还可以同时转入报告基因作为对照,确定质粒确实已经转染进去了.......阅读全文
用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些
转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生
用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些
转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生
什么是共转染?
表达一个DNA分子上的基因标记的细胞经常也表达另一个DNA分子携带的基因标记,这种物理上不相连的基因被整合到同一整合序列并在同一转染细胞内表达的现象叫做共转染。将一种体外的基因片段加在细胞核内DNA上,让其能表达。而转染则是将一种体外基因加在细胞质中,容易丢失。
昆虫细胞共转染实验
实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T
昆虫细胞共转染实验
实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒 ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材 含 10% 胎牛
昆虫细胞共转染实验
基本方案 用线性化杆状病毒DNA 实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞
基因共转染的概念和方法介绍
基因工程中将两个以上的基因同时导入感受态真核细胞的方法,称作共转化(cotransformation,也称共转染)。将目的基因表达载体DNA 和标记基因表达载体DNA 混合后共同转移到靶细胞中,分别使用标记基因与目的基因对应的选择剂进行两次筛选,最后可得到复合转导的转化子。在磷酸钙沉淀物中,两种物理
如何优化GenMuteTM转染试剂,提高siRNA/DNA共转染效率?
GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。siRNA/DNA共转染时,siRNA的最佳浓度范围是0.5ηM到10ηM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”,切勿使用超过20ηM的siRNA。以24孔板为例,如下步骤将对如何优
脂质体简介
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部 生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分
质体DNA的定义
中文名称质体DNA英文名称plastid DNA定 义真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
脂质体的分类
脂质体的分类1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08um;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~lum。多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在1~5um之间。2.按照结构分:单室脂质体,多室
脂质体的特点
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核-巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药锑酸葡胺脂质体,其肝中浓度比普通制剂提高了200~700倍。2、缓释作用:缓慢释放,延缓肾排泄和代谢,从而延长作用时间。3、降低药物毒性:如两性霉素B脂质体可降低心脏毒性。
脂质体的简介
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部 生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分
质体快速检定法
这个方法是以phenol 及chloroform 溶菌后直接进行电泳分析,并未将质体DNA与宿主细菌染色体DNA 分离,得到的DNA 也不能用限制酶作用。但因其快速简便,所以可藉的于短时间内检定大量转形株中质体DNA 的相对分子量,以初步筛选带有重组质体的转形株。药品试剂:LB/Amp plat
脂质体的特点
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核-巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药锑酸葡胺脂质体,其肝中浓度比普通制剂提高了200~700倍。 2、缓释作用:缓慢释放,延缓肾排泄和代谢,从而延长作用时间。 3、降低药物毒性:如两性霉素B脂质体可降
什么是脂质体?
脂质体(Liposomes)是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心),具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同,对皮肤有优良的保湿作用,尤其是包敷了保湿物质如透明质酸、聚葡糖苷等的脂质体是更优秀的保湿性物质。
脂质体的分类
1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08μm;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~lμm。多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在1~5μm之间。2.按照结构分:单室脂质体,多室脂质体,多囊
什么是质体基因?
在细胞质基因中,凡存在于色素体中的称为质体基因,存在于线粒体中的称为线粒体基因等,从线粒体、叶绿体等小细胞器中曾经分离出被染色体那样的DNA。
质体DNA的定义
中文名称质体DNA英文名称plastid DNA定 义真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
什么是质体醌?
质体醌是一种苯醌的衍生物。醌环上联2个甲基,有一侧链联着不同数目的异戊二烯单位。
脂质体的分类
1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。 小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08um;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~lum。 多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在1~5um之间。 2.按照结构分:单室脂质体,
脂质体的分类
脂质体的分类1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08um;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~lum。多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在1~5um之间。2.按照结构分:单室脂质体,多室
什么是质体醌?
质体醌是一种苯醌的衍生物。醌环上联2个甲基,有一侧链联着不同数目的异戊二烯单位。
脂质体的优势
脂质体是由脂双分子层组成的颗粒,可介导基因穿过细胞膜。通过脂质体介导比利用病毒转导进行基因转移具有以下明显的优势:①脂质体与基因的复合过程比较容易;②易于大量生产;③脂质体是非病毒性载体,与细胞膜融合将目的基因导入细胞后,脂质即被降解,无毒,无免疫原性;④DNA或RNA可得到保护,不被灭活或被核酸酶
学习资料:浆质体
浆质体,又称浆逸出体或胞浆球,是早幼粒细胞极度增生时,其胞浆逸出而形成。为圆球形,大小同成熟红细胞,一般直径在8-10微米左右,有些则直径略大,如本图的浆质体则接近白细胞大小。浆染淡蓝色,无细胞核,有类似早幼粒细胞的颗粒。在急性粒细胞性白血病时较易见,偶见感染或正常人。
脂质体介导的真核细胞转染实验——质体介导短暂表达
用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高,重复性更好。实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤1. 按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞,在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜,直至细胞80%汇片。
脂质体介导的真核细胞转染实验——脂质体进行稳定转染
实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒DMEM仪器、耗材培养箱离心管实验步骤1. 接种细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤1)长至50%汇片。 2. 制备DNA/脂质体混合物,转染细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤2和3)。3. 每孔细胞加入1 ml DMEM-20完全培养液,37℃ 培养箱培养48
质体醌的结构特点
质体醌是质子和电子载体,同线粒体的电子传递链的泛醌一样,也是通过醌和醌醇循环来传递电子和氢质子,不过质体醌与泛醌的结构是不同的。
细胞化学词汇质体基因
中文名称:质体基因英文名称:plastogene定 义:存在于质体中的细胞质基因。有相对的自主性,可自我复制,可转录相应的信使核糖核酸(mRNA)、转移核糖核酸(tRNA)和核糖体核糖核酸(rRNA)等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
关于脂质体的简介
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部 生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分