如何优化GenMuteTM转染试剂,提高siRNA/DNA共转染效率?

GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。siRNA/DNA共转染时,siRNA的最佳浓度范围是0.5ηM到10ηM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”,切勿使用超过20ηM的siRNA。以24孔板为例,如下步骤将对如何优化GenMuteTM转染试剂做一指导;至于其他规格器皿的培养的细胞,烦请参考GenMuteTM的实验说明。1、在转染前的30-60分钟,更换培养基,并在每孔中加入0.5ml的完全培养基(含血清和抗生素)。2、将0.5μg DNA各自加入到分别盛有50μl GenMute转染缓冲液(Cat#SL100572)的4个无菌管中进行稀释,接下来分别对4管中的siRNA进行系列稀释·····将5.0pmol siRNA加入到第一管中,2.5 pmol siRNA加入到第二管中,1.25 pmol siRNA加入到第三管中,1.25 pm......阅读全文

如何优化GenMuteTM转染试剂,提高siRNA/DNA共转染效率?

GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。siRNA/DNA共转染时,siRNA的最佳浓度范围是0.5ηM到10ηM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”,切勿使用超过20ηM的siRNA。以24孔板为例,如下步骤将对如何优

什么是共转染?

表达一个DNA分子上的基因标记的细胞经常也表达另一个DNA分子携带的基因标记,这种物理上不相连的基因被整合到同一整合序列并在同一转染细胞内表达的现象叫做共转染。将一种体外的基因片段加在细胞核内DNA上,让其能表达。而转染则是将一种体外基因加在细胞质中,容易丢失。

昆虫细胞共转染实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T

昆虫细胞共转染实验

实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒 ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材 含 10% 胎牛

昆虫细胞共转染实验

基本方案 用线性化杆状病毒DNA             实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞

基因共转染的概念和方法介绍

基因工程中将两个以上的基因同时导入感受态真核细胞的方法,称作共转化(cotransformation,也称共转染)。将目的基因表达载体DNA 和标记基因表达载体DNA 混合后共同转移到靶细胞中,分别使用标记基因与目的基因对应的选择剂进行两次筛选,最后可得到复合转导的转化子。在磷酸钙沉淀物中,两种物理

转染试剂:Roche

     转染试剂:Roche[选购宝典]现转染市场多个新产品涌现而出,一些旧产品更弦易主。一提起罗氏的转染试剂,大家肯定立马想到Fugene 6/HD。即使Fugene 6/HD不在手,罗氏也毫不畏惧,因为它集合二十年的转染经验,推出了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP转染试

各种转染试剂的中文转染方法

FuGENE6(Roche)转染步骤: 转染前一天将细胞分至培养板,转染当天细胞应50-80%融合。将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。 将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。 1. 在PCR管中加入不含血

用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些

转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生

用质粒好还是还是质粒脂质体共转染还是腺病毒好些

转入质粒的原理:质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链(shRNA),在细胞内被细胞自己剪切成siRNA.两种转染方法在功能上是一致的.但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短,用于短期抑制试验(一般维持一周以内).而因为质粒存在于细胞内比较稳定(载体上含有抗生素标记,可以筛选),能够持续表达产生

国际ZLRFect小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

介绍 RFect小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。RFect可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株

关于转染试剂的简介

  哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。  将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类,即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注射、电穿孔、脂质体介导的转染,以及最近出现的以高分子聚合物为载体的基因传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感染

RNA转染试剂的对比

近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下:实验方法转染试剂:Turbofect transfection reage

如何优化PolyJet转染试剂?

我们使用PolyJet DNA转染试剂转染表皮细胞及Raw267.4细胞非常有效,并且毒性很小。对于如何更好的优化PolyJet转染试剂,我乐意分享以下几点:1、DNA的质与量。DNA的纯度对于转染实验至关重要。由E Coli制备的DNA,A260/280必须达到1.80甚至更高。对于6孔板,通常每

RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

RFectPM原代细胞小核酸转染试剂(RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂)                                                       货    号:BIOG-11014: 0.5ml          BIOG-11015

单核细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

RFectMN单核细胞小核酸转染试剂                                                        货    号:BIOG-11024: 0.5ml       BIOG-11025: 1.0ml            BIOG-11026: 1.5m

细胞转染率低-转染试剂要全背锅吗?

细胞转染低都是PCR试剂的问题吗?PCR纯度不够确实会有这样的问题,所以选择PCR试剂很重要 主要还是以下几点影响:1. 其他微生物污染您觉得您养的细胞 ,不,不,不 ,可能您只知道您养的是细胞,你不知道的是您的细胞可能背着您养了一群小三,比如支原体,病毒,黑胶虫等等,特别是支原体它可以更改细胞的特

细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞

细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物

细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞

细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物

DNA体外转染试剂_如何准备转染所需的质粒DNA

转染效率受到诸多因素的影响,除了细胞、培养基和载体等影响因素外,另外一项非常重要的因素便是DNA的质量。为了比较不同厂家的转染效率,我们分别从三家不同的供应商购买了质粒制备试剂盒来制备pEGFP-N3质粒DNA,并通过不同的方法将制备的pEGFP-N3质粒转运至NIH-3T3细胞。pEGFP-N3质

覆盖更宽广的领域转染试剂

Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Roche新推出FuGENE HD转染试

覆盖更宽广的领域转染试剂

FuGENE HD 转染试剂:覆盖更宽广的领域 Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Ro

你所不知道的lipo2000转染原理

  Lipofectamine 2000转染试剂是一种同时便于DNA或RNAi转染的试剂,易于针对广泛的细胞类型进行优化。  Lipofectamine 2000可以在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染,Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。研究人员可使

关于转染试剂的基本信息介绍

  转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具,而且是基因治疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、

关于转染试剂的历史背景介绍

  已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3

VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明

一、性能参数产品名称:VigeneFection 简称“VGF”     产品货号: FH880806浓度:1μg/μl                          推荐使用浓度:1μg-10μg/ml规格:50μl (赠送)                    保存条件:2-8℃ ,切勿放

全球首发“基因转染荧光试剂”-瞄准癌细胞

4月18日,“癌症早期诊断与个体化医疗新技术研讨会暨2010纳奥生物产品发布会”在浙江杭州举行,纳奥生物全球首家出产的“基因转染荧光试剂和系列纳米荧光探针产品”正式上市,并现场给多家全国知名医疗机构赠送了试用品。   恶性肿瘤是严重危害人类生命和健康的常见病和多发病,据了解,在35~59岁年龄组中,

高效转染试剂盒操作说明书

Ø 百恩维公司生产研发的高效转染试剂盒(HET)可有效地转染各种哺乳动物细胞,通常 293 细胞转染率很容易达到 40-50%,优化条件后更能高达 90%以上。并且对细胞基本没有毒 性。不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定细胞株。 Ø 质粒 DNA, DNA, siRNA 等均可使用。 Ø 可用

如何优化LipoD293转染试剂?

LipoD293DNA转染试剂是脂质体DNA转运工具的升级版本。我们实验室使用LipoD293DNA转染试剂成功转染了HepG2,LNCaP,CHO及HEK293细胞。接下来,我们乐意就如何提高转染效率,降低毒性等方面的小技巧同大家分享。1、LipoD293/DNA的比率。尽管合适的比率由细胞类型决

DEAE葡聚糖转染试剂的功能特点

DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。