利用自动细胞成像系统评价线粒体完整性和膜电位变化

简介线粒体功能作为细胞健康度评价的关键指标,可以通过检测其膜电位变化情况获得相应数据。线粒体膜电位去极化作为低氧损伤或氧化应激反应的早期重要的一种信号,阳离子荧光染料是用于线粒体膜电位评估的有效工具。我们利用两种已知的氧化磷酸化抑制剂作为化合物进行短时间 ( 60分钟 ) 的处理。抗霉素A (Antimycin A) 和氰氯苯腙 (CCCP)。化合物处理后利用 MitoTracker Orange和细胞核染料分子进行染色,此实验可直接检测化合物对线粒体膜电位的影响。方法U2OS 细胞 (ATCC) 以 6,500 个每孔的密度预铺于黑色底透 384 孔板中 (Greiner,black clear-bottom plates),随后第二天利用不同浓度的 Antimycin A 和 CCCP(Sigma) 处理 60 分钟,每个处理进行三个重复,化合物 Antimycin A 起始浓度为100 μM 和化合物 CC......阅读全文

化学发光成像系统和凝胶成像系统的区别

化学发光是A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。凝胶成像与化学发光的区别在于化学反应过程中伴随光辐射现象,故称为化学发光。化学发光成像系统是即插即用型一体机,适用于化学发光、多色荧光检测与普通凝胶检测,选

化学发光成像系统和凝胶成像系统的区别

化学发光是A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。凝胶成像与化学发光的区别在于化学反应过程中伴随光辐射现象,故称为化学发光。化学发光成像系统是即插即用型一体机,适用于化学发光、多色荧光检测与普通凝胶检测,选

化学发光成像系统和凝胶成像系统的区别

化学发光是A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。凝胶成像与化学发光的区别在于化学反应过程中伴随光辐射现象,故称为化学发光。化学发光成像系统是即插即用型一体机,适用于化学发光、多色荧光检测与普通凝胶检测,选

化学发光成像系统和凝胶成像系统的区别

化学发光是A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。凝胶成像与化学发光的区别在于化学反应过程中伴随光辐射现象,故称为化学发光。化学发光成像系统是即插即用型一体机,适用于化学发光、多色荧光检测与普通凝胶检测,选

凋亡中线粒体功能评价实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 CMXRos 储存液PBS实验步骤 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 储存液,建议活细胞使用浓度 25~40 mol/L,后续将固定的细胞使用浓度为 50~200 mmol/L。为减少假象,荧光染料浓度应尽可能低。2. 如是贴壁细胞,将细

凋亡中线粒体功能评价实验

△ψm的显微分析 △ψm的流式细胞计量术分析             实验材料 细胞

凋亡中线粒体功能评价实验

△ψm的显微分析 △ψm的流式细胞计量术分析             实验材料 细胞

PNAS:利用新型成像技术追踪细胞突变

这是科学家首次在完整组织里查明突变细胞的数量和位置 美国科学家近日开发出一种新型成像系统,利用它可以观察到经历特殊突变的细胞。这一研究是科学家首次在完整组织里查明突变细胞的数量和位置,也有望帮助他们理解癌症前期突变如何产生。相关论文在线发表于美国《国家科学院院刊》(PNAS)上。 图片说明

利用ImageXpress-Micro进行长时间活细胞成像和心肌...(二)

心肌干细胞细胞的功能评价 ImageXpress Micro采用的软件系统功能强大,具有无限的扩展功能。因此,除了能够实现活细胞的长时间观察和细胞的形态、蛋白表达等分析,ImageXpress Micro还能够实现细胞功能学的评价。     干细胞研究是目前生物学研究的热点,采用人类的干细胞(如心肌

利用ImageXpress-Micro进行长时间活细胞成像和心肌...(一)

利用ImageXpress Micro进行长时间活细胞成像和心肌细胞功能评价活细胞成像技术是最近几年兴起的一项技术,能够在细胞接近生理的状态下观察细胞形态改变和蛋白的表达,该技术能够避免传统采用固定细胞或组织的研究方法中,固定细胞过程中造成的细胞形态的改变和结构改变,能够更加真实的反映出细胞的特性,

细胞成像微孔板检测系统

  细胞成像微孔板检测系统是一种用于生物学、农学、畜牧、兽医科学、基础医学领域的分析仪器,于2016年10月27日启用。  技术指标  孵育温度范围:室温以上5℃-65℃;CO2和O2控制范围:0-20%(CO2);1-19%(O2)控制分辨率:+0.1%(CO2和O2)稳定性:+0.2%at5%C

膜电位的概念和起源

膜电位(Membrane Potential)通常是指以膜相隔的两溶液之间产生的电位差。一般是指细胞生命活动过程中伴随的电现象,存在于细胞膜两侧的电位差。膜电位在神经细胞通讯的过程中起着重要的作用。1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙

膜电位的定义和作用

膜电位(Membrane Potential)通常是指以膜相隔的两溶液之间产生的电位差。一般是指细胞生命活动过程中伴随的电现象,存在于细胞膜两侧的电位差。膜电位在神经细胞通讯的过程中起着重要的作用。1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙

Nikon-Ti2E全自动活细胞显微成像系统共享

仪器名称:Nikon Ti2-E全自动活细胞显微成像系统仪器编号:22009067产地:日本生产厂家:Nikon型号:Nikon Ti2-E出厂日期:购置日期:2022-06-09所属单位:医研院>生物医学测试中心>细胞生物学平台>细胞平台光镜机组放置地点:医学科学楼C119固定电话:固定手机:固定

JC1分析线粒体膜电位的方法2

3. COMMENTARY3.1 Background information The technique of JC-1 staining has been developed with the intent to detect DY in intact, viable cells. For th

JC1分析线粒体膜电位的方法3

3.6 Key references1. Kroemer G., Zamzani N., Susin S.A. Mitochondrial control of apoptosis. Immunol. Today, 18: 44-51, 1997.2. Susin S.A., Zamzami N.,

关于若丹明(-Rh123)-染色法检测细胞凋亡的介绍

  细胞生活状态下,胞膜上的钠 -钾泵、钙泵等的作用,使细胞膜内外维持着不同离子的浓度梯度,包括Na + , K+ ,Cl  -,Ca2 + 等,形成细胞膜电位。FCM 可以检测亲脂性离子荧光染料在胞膜内外的分布,来测量膜电位的高低,以评价细胞的活力。Rh123 是一种亲脂性阳离子荧光染料,对细胞膜

关于细胞凋亡检测—若丹明(-Rh123)-染色法的基本介绍

  细胞生活状态下,胞膜上的钠 -钾泵、钙泵等的作用,使细胞膜内外维持着不同离子的浓度梯度,包括Na + , K+ ,Cl  -,Ca2 + 等,形成细胞膜电位。FCM 可以检测亲脂性离子荧光染料在胞膜内外的分布,来测量膜电位的高低,以评价细胞的活力。Rh123 是一种亲脂性阳离子荧光染料,对细胞膜

共聚焦激光扫描显微镜的应用

膜电位 以往测定膜电位多用微电极直接插入法测量,不仅操作麻烦,而且对细胞也是一种损伤。共聚焦激光扫描显微镜则可利用荧光探针在细胞膜内外分布的差异测出膜电位,不但可以观察细胞膜电位的变化结果,更重要的是可以用于连续监测膜电位的迅速变化。膜电位荧光探针根据其对膜电位变化反应速度的快慢分为快、慢两类探针,

科学家开发出新型靶向心肌线粒体的的双模态探针

近日,中国科学院上海药物研究所分子影像中心的科研人员基于小分子亲脂阳离子F16特有的荧光性能及线粒体靶向机制,设计并合成了一种新型的双模态探针5MEF,可用于心肌的PET成像和荧光成像。相关研究成果以封面文章发表于《药物化学杂志》。 目前,中国城乡居民心血管病死亡率持续升高,位居总死因首位。临床

细胞凋亡研究

前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展,体内平衡,甚至在不同的疾病,例如:癌症,的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里,科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中,细胞会有不同的形态变化。同时,细胞膜(plasma membrane),线粒体(mitocho

《自然》:气候变化或导致海草减少,进而损害生态系统完整性

近日发表在英国《自然·通讯》杂志上的一项新研究发现,气候变化可能导致褐藻和海草的全球分布范围缩减。这一研究为气候变化对海洋生物产生普遍影响提供了新证据。褐藻和海草是构建海洋生态系统的关键植物,它们参与海洋养分循环、促进碳封存、减缓气候变化、促进渔业发展,为沿海地区提供了重要的生态和社会经济功能。在这

线粒体损伤与检测方法研究进展

作者:左钱飞,张海献,鲁鹏飞  摘 要:线粒体是细胞活动的“能源工厂”,在各种致病因素作用下线粒体极易出现各种结构和功能损伤,这在疾病的发展中起着十分重要的影响,文章就线粒体结构和功能损伤及其检测方法作一综述。   关键词:线粒体损伤;mtDNA;凋亡   Abstract:Mitochondria

TEM成像和放大系统

成像和放大系统成像系统是电子显微镜最核心的部件之一,高放大倍数、高分辨率就是通过成像系统获得的。成像放大系统(imagung and amplification system)的主要组成部件如下:样品室、物镜、二级中间镜、投影镜。样品室一般位于聚光镜之下、物镜之上,用以安放载有样品的载网。样品室有一

线粒体microRNA成像研究获进展

  近日,国家纳米科学中心研究员李乐乐课题组在线粒体microRNA成像研究中取得重要进展。相关研究成果以Spatially Selective Imaging of Mitochondrial MicroRNAs via Optically Programmable Strand Displace

线粒体的5个功能

线粒体的5个功能:能量转化、三羧酸循环、氧化磷酸化、储存钙离子、调节膜电位并控制细胞程序性死亡。能量转化线粒体是真核生物进行氧化代谢的部位,是糖类、脂肪和氨基酸最终氧化释放能量的场所。线粒体负责的最终氧化的共同途径是三羧酸循环与氧化磷酸化,分别对应有氧呼吸的第二、三阶段。细胞质基质中完成的糖酵解和在

一种快速简便的进行线粒体膜电位检测的方法

  背景简介:  线粒体是细胞新陈代谢的主要细胞器,起着“能量工厂”的作用。线粒体内部通过一系列的氧化反应去氧化丙酮酸和NADH,以产生储存能量的ATP分子。而这一系列反应的驱动力是线粒体膜上电化学质子的梯度差,也叫做膜电位。由于这种质子的梯度差为磷酸化和氧化反应提供了“驱动力”,因此它也被当作一个

细胞凋亡检测方法介绍

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

细胞凋亡的早期检测方法介绍

1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都

细胞凋亡的早期检测

1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都