石蜡切片的制备指南（四）
前言:制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备，以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明，并提供故障排除建议。06 设定最佳刀片间隙角刀片间隙角可调,必须进行恰当设定以达到最佳性能。间隙角可防止刀面和蜡块表面接触。切面角是形成切削刃的两个切面之间的角度。对于常规使用的刀片和可调换式刀片,切面角大约为35°°,但该角度可能因刀片类型和制造商的不同而发生因此,必须针对每种刀片类型设定最佳间隙角。在进行角度设定时,应遵循切片机制造商指南。对于Leica生物系统的刀片和刀片架,推荐的设定角度为1至5°07刀片最长使用寿命采用一些简单的策略可使每个刀片均达到最长的使用寿命。清洁刀片时,避免沿刀刃拖动任何物品。即使是纤维素纤维亦可以对刀片造成损坏。避免刀刃接触任何硬质物体,如钳子或刷子。有条不紊的使用......阅读全文
石蜡切片制作(苏木精伊红对染法)（一）
实验方法原理 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称 H.E. 对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可
石蜡切片制作(苏木精伊红对染法)（二）
5．透明纯酒精、二甲苯等量混合液15min，二甲苯Ⅰ15min、Ⅱ15min（至透明为止）。由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。透明注意事项（1）使用透明剂时，要随时盖紧盖子，
石蜡切片免疫组化染色实验操作流程
1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置 60℃ 1 小时） 。① 二甲苯 、II，各 10 分钟。② 梯度酒精：100%，2 分钟 95%，2 分钟 80%，2 分钟 70% 2 分钟。③ 蒸馏水洗：5 分钟，2 次（置于摇床）。2．过氧化氢封闭内源性过氧化物酶：3%H2 O2 ，室温 10 分
石蜡组织切片的保存方法和注意事项
许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下，而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。一些研究发现，切片在室温下保存3个月以上，免疫组化染色结果会出现减弱，甚至阴性。因此，有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片，共110片，常温空气中放置1个月
石蜡切片(paraffin－sections)免疫组化染色步骤
1、载玻片的处理：抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：（1）APES：现用现配。将洗净的玻片
光学显微镜的石蜡切片制作过程
I.将组织块放入带标记的盒子内，光学显微镜置于200m1液体中; 2.按选定的温度加热;测定温度。 3.光学显微镜3%戊二醛预固定15秒钟;缓冲液冲洗3次，光学显微镜每次3分钟;1 %OsO;固定15秒钟。如中断操作，预固定后仍需在4℃下保存. 用微波脱水、浸透每一步骤只需
石蜡切片组织有横向裂纹是怎么回事
组织的形态不是很清晰，可能没有固定好。 建议： 1、取材要快，离体5分钟内修整好组织块，放入固定液，越快越好，减少组织自溶； 2、组织固定时体积要小，不大于5mm； 3、固定液充分，固定液与组织的体积比10-20：1。 石蜡切片（paraffin section）组织学常规制片技术中最
石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒
石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 YIJI石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上，通过氧化剂处理，使黑色素由棕色变成无色，来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精
石蜡切片的酶免疫组化注意事项
一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象？一般来说，如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话，如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法：1.一般用APES：丙酮=1:50的处理液来处理片子，处理5min左右，然后水洗，烘干既可用于贴
石蜡切片的酶免疫组化注意事项
一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象？ 一般来说，如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话，如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法： 1.一般用APES：丙酮=1:50的处理液来处理片子，处理5min左右，然
海水鱼卵石蜡切片组织破碎的原因
本人觉得是脱水这个环节有问题，事先应当做一个预备试验，看怎样的酒精梯度比较合适。有时候脱水过度会造成组织脆弱，切片的时候就容易破碎。这里有个参考值，但是建议搂主最好作些修改：小老鼠内脏脱水程序：固定液30分钟85%酒精30分钟95%酒精30分钟100%酒精30分钟100%酒精30分钟二甲苯15分钟二
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色曾经作过脑组织的TUNEL，也指导过别人做心肌的TUNEL，谈谈我的意见：蛋白酶K37度30min，好像有点偏长，我是10min。你是NBT/BICP显色的话，这说明你用的是AP系统，而不是HRP这样的话就不是用3%H2O2来去除内源性酶的了，（H2O2是
植物石蜡切片之溶液配制、实验用品和操作步骤
说到便于观察和保存的组织切片方法，我们的脑海里很容易就闪出四个字来：石蜡切片，不过，你掌握了吗?还是……听说过而已?本文主要对石蜡切片法的主要实验用品、实验步骤、溶液配制这几方面对这一实验方法作介绍。 一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程，为研究植物
石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine－T）荧...
石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）荧光染色试剂盒使用说明主要用途YIJI石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）荧光染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和硫磺素T染色技术，与淀粉样蛋白结合，来分析存档中的石蜡包埋
电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明
对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固，螺丝有无松动，机器运转是否流畅，如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后，直径会变小，当刀口离定尺板大时，需松开定尺板背面的紧固螺钉，朝刃口移动定板尺，距刃口2mm间隙为宜，然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小时
电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明
对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固，螺丝有无松动，机器运转是否流畅，如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后，直径会变小，当刀口离定尺板大时，需松开定尺板背面的紧固螺钉，朝刃口移动定板尺，距刃口2mm间隙为宜，然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小
石蜡切片效果不佳的八大补救措施
之前和大家分享了如何切出符合自己需求的石蜡切片，那切片不佳是什么原因造成的？常见切片问题有哪些？如何补救？ 一、蜡带侧弯——问题分析及补救措施 1、刀口锋利不一，局部产生差异。可移动刀片或改用新刀口。2、切片刀未覆盖整个蜡块。需调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。3、蜡块左右硬度不一致。尽量使用锋
石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒使用说明
主要用途YIJI石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上，通过氧化剂处理，使黑色素由棕色变成无色，来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种石蜡包埋组织切片中的黑色素成分，尤
用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片－DNA－提取方法
实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上，常规烘片，脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以
如何切出理想的石蜡切片固定与脱水操作的重要性
石蜡切片是组织学常规制片技术中应用最为广泛的方法。但在石蜡切片过程中，经常会遇到一些问题：修整蜡块总修不平整？切片时容易碎片、翻卷？摊片时总是铺不平整？今天和大家分享如何切出符合需求的石蜡切片！01正确固定组织离体后，必须在1小时内固定。固定液须是组织体积的4-10倍，浓度准确，过稀或过浓都会影响组
石蜡切片在染色过程中出现脱片现象如何处理？
1）烤片时间不够，或温度不够，可以延长烤片时间和提高烤片温度；2）用含有多聚赖氨酸的玻片，可以购买到或这自己做；3）有些组织本身就容易掉片，如骨组织等，操作时冲PBS不要直接冲到组织上，冲到组织上方，让它流下冲洗组织；4）用高温修复时，温度骤冷也可能引起。
石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂盒使用说明
石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途石蜡切片神经元高尔基法快速染色试剂是一种旨在使用亲银还原技术，分析固定处理的石蜡包埋组织切片中神经元（neuron）、锥体细胞（pyramidal cell）、胶质细胞（glia cell）、少突触胶质细胞（oligodendr
植物组织化学显微镜标本片制作方法_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法。其优点在于①应用范围广，几乎适用于所有的植物材料；②能将材料切成厚薄均一的切片，较清楚地显现细胞、组织的细微结构；③能切成连续蜡带，可观察细胞和组织的动态发生及层次变化过程；④切片可以长期保存，便于以后观察比较。缺点是：操作程序比较复杂，需
液状石蜡
性状本品为无色澄清的油状液体;无臭;在日光下不显荧光本品在三氯甲烷、乙醚或挥发油中溶解,在水或乙醇中均不溶。相对密度本品的相对密度为0.845~0.890(通则060比重瓶法)黏度本品的运动黏度(通则0633第一法),在40℃时(毛细管内径1mm),不得小于36mm2/s检查酸度取本品5.0ml,加
石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）免疫组化染色试剂..
石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）免疫组化染色试剂盒说明主要用途石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）免疫组化染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和免疫抗体显色技术，即通过抗酒石酸酸性磷酸酶多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗，使用染料二氨基联苯胺染色显示棕褐色，分析存档中的石蜡包埋
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温（4～6℃）干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下： 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温（4～6℃）干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下： 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮
IHC石蜡技术
实验概要免疫组织化学 (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA 等免疫测定方法低，但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此，从 IHC 获得的信 息结合显微技术提供了一副“宏图”，使来自其它
IHC石蜡技术
实验概要免疫组织化学 (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA 等免疫测定方法低，但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此，从 IHC 获得的信 息结合显微技术提供了一副“宏图”，使来自其它
冰冻切片
实验概要冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。实验步骤1. 冷冻切片的制作方法 1) 将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度，一般情况下为-18～-25℃。 2) 在标本冷冻托上涂布一层冷冻包埋剂——OCT