使用SpectraMaxM5e读板机进行HTRFcAMPdynamic2和IPOne检测二
IP-One测定CHO-M1细胞按上述方法培养。在测定前一天,细胞以每孔10,000?40,000接种于含有完全生长培养基的384-孔微孔板中。第二天,使用浓度范围从15 nM到33 μM的碳酰胆碱刺激细胞(刺激缓冲液包含用于准备碳酰胆碱浓度的氯化锂溶液)。刺激一小时后,IP1-d2偶联物、裂解缓冲液和抗-IP1抗体-穴状化合物添加于孔中。细胞阴性质控包含接受了抗-IP1抗体-穴状化合物、偶联物和不含IP1-d2的裂解缓冲液的未处理细胞。最终测定体积为40 μL,但是此cAMP测定可针对不同的微孔板类型调整体积。根据IP-One HTRF产品说明书所述在刺激缓冲液中溶解IP1标准品,使IP1标准品终浓度范围从21.5到22,000 nM 4。孵育阳性IP1和不含IP1的阴性质控。IP1-d2添加于所有标准品和阳性IP1质控中,而接受了偶联物的阴性质控和裂解缓冲液不含IP1-d2。抗-IP1抗体抗体-穴状化合物......阅读全文
细胞系开发过程中IgG检测流程的简化
简介在不同的研究人员中,以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员,例如 HPLC 和表面干涉
细胞系开发过程中IgG检测流程的简化
介 在不同的研究人员中,以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员,例如 HPLC 和表面干
利用SpectraMax-Paradigm多功能检测平台同时进行细胞凋亡和..
利用SpectraMax Paradigm多功能检测平台同时进行细胞凋亡和细胞坏死的筛选工作简介 细胞凋亡和细胞坏死的本质均为细胞死亡,但我们可以通过其发生机制和病理形态学方面所表现出的特征加以区别。细胞凋亡指的是细胞程序性的死亡,不会发生细胞膜损伤;细胞坏死则被认为是因病理而产生的被动死亡,会
应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(一)
前言报告基因对于基因表达的研究来说是非常有用的工具,它可以代替要研究的目的基因,从而帮助我们了解目的基因的信号通路和相关的疾病。荧光素酶是最常用的报告基因,使用光度计和化学发光功能的微孔板读板机我们可以很容易的检测到荧光素酶,另一方面,由于在细胞实验中其背景较低,因此具有很高的灵敏度。我们通常用萤火
利用MD微孔板读板机对细胞内氧化自由基吸收能力ORAC
活性氧簇 (Reactive oxygen species, ROS) 是由细胞内正常代谢反应,环境压力 以及紫外辐射产生的一类物质,包括过氧 自由基、羟基自由基、超氧离子和单线态 氧。氧化自由基吸收能力 (oxygen radical absorbance capacity,ORAC) 分析是
利用MD微孔板读板机对细胞内氧化自由基吸收能力(ORAC)...
引言活性氧簇 (Reactive oxygen species, ROS) 是由细胞内正常代谢反应,环境压力 以及紫外辐射产生的一类物质,包括过氧 自由基、羟基自由基、超氧离子和单线态 氧。氧化自由基吸收能力 (oxygen radical absorbance capacity,ORAC)
多功能酶标仪的适用范围
1、DNA/RNA/蛋白质测试及定量。2、所有微孔板的ELISAs、酶动力学,测试药物解离代谢测试。3、细胞毒及细胞发育、死亡测试。4、Caspase-3 以及蛋白酶测试。5、cAMP的结合位点测试。6、IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。7、Intrinsic tryptophan荧光测试。8、绿色
多功能酶标仪的适用范围
1、DNA/RNA/蛋白质测试及定量。 2、所有微孔板的ELISAs、酶动力学,测试药物解离代谢测试。 3、细胞毒及细胞发育、死亡测试。 4、Caspase-3 以及蛋白酶测试。 5、cAMP的结合位点测试。 6、IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。 7、Intrinsic trypt
如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测
点击次数:10296 发布日期:2018-11-14 来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负 引言 活性氧 (Reactive oxygen species,ROS) 是 一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应 活性的一类含氧分子,参与细胞信号转 导、免疫防御
如何使用Molecular-Devices-SpectraMax-Paradigm多功能读扳机进...
如何使用Molecular Devices SpectraMax Paradigm多功能读扳机进行HTRF人肿瘤坏死因子实验?本应用记录了我们如何使用Spectramax Paradigm 多功能读扳机执行稳定,免洗细胞因子实验,并具有良好的Z因子。HTRF是由Cisbio试剂公司研发的多功能技术,
如何使用M5-多功能微孔板读板机和IMAP®-荧光偏振...(三)
结果SoftMax Pro软件中预置的IMAP 荧光偏振模板会自动计算出水平偏振均值和垂直偏振均值(mP值),总的荧光强度,标准方差和CV值。每一组试验样品的组群一栏中,模板会自动扣除背景样品的荧光偏振值,然后计算出最小偏振mP值。也可根据相应的校正曲线计算出样品磷酸化比率。(See IMA
利用EarlyTox细胞活力检测试剂盒评估GMCSF和TNFα诱...(一)
利用EarlyTox细胞活力检测试剂盒评估GM-CSF和TNFα诱导的细胞凋亡前言:肿瘤坏死因子(TNFα)是一个关键的细胞炎症因子,它可以通过许多细胞通路来调控各种细胞事件。此因子是在造血细胞中引起凋亡而被人们熟知的,如U937,通过激活细胞内半胱天冬酶的级联过程。另一方面,粒巨噬细胞集落刺激因子
关于多功能酶标仪的适用范围
1、DNA/RNA/蛋白质测试及定量。 2、所有微孔板的ELISAs、酶动力学,测试药物解离代谢测试。 3、细胞毒及细胞发育、死亡测试。 4、Caspase-3 以及蛋白酶测试。 5、cAMP的结合位点测试。 6、IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。 7、Intrinsic trypt
如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测?
活性氧 (Reactive oxygen species,ROS) 是一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应活性的一类含氧分子,参与细胞信号转导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各项生理活动。然而当细胞处于环境压力时,胞内的ROS 含量水平就会急剧上升造成核酸、蛋白和脂类物质的氧化损伤[1],
如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测
活性氧 (Reactive oxygen species,ROS) 是 一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应 活性的一类含氧分子,参与细胞信号转 导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各 项生理活动。然而当细胞处于环境压力 时,胞内的 ROS 含量水平就会急剧上升造 成核酸、蛋白和脂类物质的氧化
如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测?
引言活性氧 (Reactive oxygen species,ROS) 是 一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应 活性的一类含氧分子,参与细胞信号转 导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各 项生理活动。然而当细胞处于环境压力 时,胞内的 ROS 含量水平就会急剧上升造 成核酸、蛋白和脂类物质的
如何使用M5-多功能微孔板读板机和IMAP®-荧光偏振...(一)
如何使用M5 多功能微孔板读板机和IMAP® 荧光偏振检测平台进行激酶活性的分析?介绍 蛋白激酶在调节许多细胞反应过程时起着核心的作用。近年来已经成为癌症和其它许多疾病药物重要的作用靶点。IMA P是Molecular Devices 公司推出一种快速、非放射性的激酶检测技术,由于技术本身特点其
多功能酶标仪的适用范围
多功能酶标仪的适用范围:1.DNA/RNA/蛋白质测试及定量。2.Delfia(分布镧系荧光免疫分析)测试。3.细胞毒及细胞发育、死亡测试。4.Caspase-3 以及蛋白酶测试。5.cAMP的结合位点测试。6.IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。7.亲油性基团测试。8.绿色荧光蛋白的测试。9.FRE
美谷分子-SpectraMax-Mini-多功能酶标仪-申报ANTOP奖啦!
三月的细语随淌,化了柳梢的轻柔,燕子的呢喃,春光的明媚。2023年ANTOP奖的申报和评审工作如火如荼的开展。由美谷分子仪器(上海)有限公司申报的“可灵活升级酶标仪”ANTOP奖,现在进入大众评审阶段,诚邀各位伙伴们的投票! 奖项名称:可灵活升级酶标仪奖 奖项主体:SpectraMax Mini
多功能酶标仪的适用范围
多功能酶标仪的适用范围:1.DNA/RNA/蛋白质测试及定量。2.Delfia(分布镧系荧光免疫分析)测试。3.细胞毒及细胞发育、死亡测试。4.Caspase-3 以及蛋白酶测试。5.cAMP的结合位点测试。6.IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。7.亲油性基团测试。8.绿色荧光蛋白的测试。9.FRE
多功能酶标仪的适用范围
多功能酶标仪的适用范围:1.DNA/RNA/蛋白质测试及定量。2.Delfia(分布镧系荧光免疫分析)测试。3.细胞毒及细胞发育、死亡测试。4.Caspase-3 以及蛋白酶测试。5.cAMP的结合位点测试。6.IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。7.亲油性基团测试。8.绿色荧光蛋白的测试。9.FRE
应用SpectraMax微孔板检测系统和CyQUANT试剂盒检测细胞增殖2
设置仪器和软件参数步骤1:打开微孔板读板仪开关,打开SoftMaxPro软件并点击ProtocolLibrary中CellGrowth&Viability文件夹中的CyQUANTFluorescenceprotocol。步骤2:按表中所示参数设置仪器,此设置已在预配置的列表中。步骤3:使用Templ
应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析(一)
前言炎症反应的一个重要步骤是细胞表面抗原与血管中免疫细胞的特异性结合。因此,对这些分子变化的及时监控,如VCAM,E-selectin,以及内皮细胞上的HLADR等等,可以为细胞水平的炎症模型提供有效的生理指标上的支持。我们用多通道荧光读取人原代细胞表面的炎症标记,并在此基础上评估不同介质对炎症反应
如何定量检测cAMP和cGMP?
背景介绍 1958年Sutherland发现了cAMP(环磷酸腺苷),并因此获得了1971年诺贝尔生理与医学奖[1]. 1963年Ashman发现了cGMP(环磷酸鸟苷)[2]。50年过去了,人们已明白cAMP、cGMP是在很多生理过程中发挥重要调节作用的第二信使分子。鸟苷酸环化酶可将GTP催化生
在MD两款酶标仪上应用Promega-CellTiterGlo化学发光法检测...
在MD两款酶标仪上应用Promega CellTiter-Glo化学发光法检测细胞活性介绍Molecular Devices公司的SpectraMax® L及SpectraMax®M5型号酶标仪结合Promega公司的CellTiter-Glo化学发光细胞活性检测试剂盒能进行快速灵敏的活细胞数量
利用SpectraMax-Paradigm-多功能检测平台同时进行细胞凋亡...
利用SpectraMax Paradigm 多功能检测平台同时进简介细胞凋亡和细胞坏死的本质均为细胞死亡,但我们可以通过其发生机制和病理形态学方面所表现出的特征加以区别。细胞凋亡指的是细胞程序性的死亡,不会发生细胞膜损伤,细胞坏死则被认为是因病理而产生的被动死亡,会伴随发生细胞膜损伤,导致细胞质因子
应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(三)
荧光素酶检测设定试剂盒中的试剂使用前需在室温下孵育。向装有2 . 2 m g 冻干底物的小瓶中加入220μL水混匀后即为萤火虫酶底物。向装有440μg冻干底物的小瓶中加入220μL水混匀后即为水蛭素肠杆菌素。用萤火虫检测缓冲液按1:50比例稀释萤火虫酶底物后即为萤火虫工作液。用海肾荧光素酶缓冲液
诱导多能干细胞毒性实验(一)
优势:1. 简易、快速的通过检测细胞贴壁面积进行96或384孔板细胞毒性筛选2. 按照一般微孔读板机的简单流程3. 具有细胞影像数据,增加数据可信性药物引起的组织毒性是候选药物未能进入市场的一个重要原因,因此,安全性和有效性试验的高度预测分析是提高药物开发和降低候选药物抗药性的关键。人源诱导多
EMax-Plus-微孔板读板机应用Molecular-Devices
介绍随着光吸收法可以满足越来越多的应用检测领域,终点法读板机在实验室中的占有率也越来越高。例如ELISAs方法进行细胞因子定量和Bradford法进行蛋白定量。本篇应用就是要着重比较使用Bradford法进行蛋白定量检测时,Molecular Devices公司最新的产品EMax® Plu
洗板机的选择和使用
自ELISA问世20多年来,洗板由原来的手工操作,发展到简单的多头加液器,再形成自动化的洗板机,随着时间的推移,逐步融合了冲洗压力、冲洗距离、冲洗时间、震荡、涡流、底部冲洗、两点吸液、连续式冲洗等多种方式,增加了多规格微孔形状的选择等。一、洗板机机理的研究1、 快速的、与残留液量相关的直接稀释过程;