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蛋白质糖基化的检测实验 实验方法原理 用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。 实验材料 蛋白样品 试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液 蛋白溶液 β-巯基乙醇 NP-40 溶液 仪器、耗材 SDS-PAGE 玻璃器皿 植物凝集素柱 实验步骤 一、用 PNGaseF（N-多糖酶）处理 以 0.1 mol/L 磷酸钠（或 Tris-HCl，而不用柠檬酸）缓冲液，pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液，并含 50 mmol/L β-巯基乙醇和 0.1% SDS，在水浴中煮沸 2 分钟。加 1/10 体积的 10% NP-40 溶液（或使 SDS 浓度少于或等于 0.17%，NP-40：SDS 的质量比在终反应中至少是 7:1)。加 PNGaseF 到终浓度为 6 mU/ml。注意这里的 1U 相当于在 1 分钟形成的 1 微摩尔产物；--......阅读全文
【现病史】患者男性，68岁，主因“头昏、乏力半年，上腹痛1天，黑便1次”，于2015年11月5日收住我院血液科。 【既往史】患者自诉半年前无明显诱因出现头昏、乏力，活动后感心悸、胸闷，气促，有头痛，偶有恶心、呕吐，有耳鸣，偶有畏寒、发热，有腰痛、腰酸，无黑便、鲜血便，未行诊治。2015年4
一、概念与临床意义冷凝集实验主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。参考值：凝集价≤1：32；临床意义：由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素，简称冷凝集素，它能与患者自身红细胞或“O”型人红细胞于4℃条件下发生凝集，在37℃时又呈可逆性完全
1、免疫浊度法（免疫透射比浊法、免疫散射比浊法）：（1）带现象（由于抗原或抗体极度过剩，而无沉淀物形成。如抗体过量称为前带现象，如抗原过量称为后带现象）可使结果偏低，甚至假阴性结果；（2）血脂过高，可使结果假性偏高。2、ELISA：（1）钩状效应（类似于后带现象，出现于双位点一步法中，当待测抗原浓度
余云娥 福建省连江县妇幼保健院 梅毒是由苍白螺旋体所引起的一种慢性、系统性的传播性疾病，是我国三大性传播疾病之一，人体受感染后，螺旋体很快播散到全身，几乎可侵犯全身各组织与器官，临床表现复杂，病程较长，且时隐时显，因此，采用简单、快速、敏感性好和特异性强的诊断方
一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能，蛋白质
分析测试百科网讯 2018年9月22日，由中国生物化学与分子生物学会糖复合物专业委员会主办，复旦大学承办的2018年全国糖生物学会议在上海举行。本次会议邀请了国内糖化学及糖生物学研究领域知名的专家和学者，介绍糖化学生物学合成、糖生物学、糖药物、糖组学、糖链结构分析、糖生物工程与技术等糖相关领域的
1、 类风湿因子（RF）类风湿因子（RF）是由于细菌、病毒等感染因子，引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种自身抗体。因为这种炕体首先发现于类风湿关节炎病人，并在类风湿关节炎病人血清中滴度较高，且持续时间较长，所以被命名为类风湿因子。其实，凡是存在变性IgG，并能产生抗变性IgG自身抗体
Omeros Corporation是一家创新型生物制药公司，致力于发现、开发、商业化小分子和蛋白质疗法，用于补体介导性疾病、中枢神经系统疾病、免疫相关疾病等罕见适应症。近日，该公司宣布，美国食品和药物管理局（FDA）已受理单抗药物narsoplimab（OMS721）的生物制品许可申请（BLA
【摘要】 目的: 评价酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体抗体胶体金试验、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。 方法: 同时用ELISA、胶体金试验、RPR试剂和TPPA对1 136例住院及门诊病人血清进行检测，TPP
[摘要]目的寻找应用微柱凝胶法进行交叉配血出现假阳性结果的原因。方法用微柱凝胶法对本院需要输血的患者进行交叉配血,阳性者再用凝聚胺法及抗球蛋白配血法交叉配血后进行比较。结果2537例配血中检测出假阳性14例占0.55%。结论微柱凝胶法进行交叉配血灵敏度高,自动化程度高,但也容易引起假阳性,给交叉配
大鼠半乳糖凝集素-9酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中半乳糖凝集素-9的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测
人半乳糖凝集素-7(Galectin-7)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中半乳糖凝集素-7(Galectin-7)的含量。实验原理：&nb
牛甘露糖结合凝集素(MBL)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中甘露糖结合凝集素(MBL)含量。实验原理： 本试剂盒应用
1、免疫浊度法（免疫透射比浊法、免疫散射比浊法）：（1）带现象（由于抗原或抗体极度过剩，而无沉淀物形成。如抗体过量称为前带现象，如抗原过量称为后带现象）可使结果偏低，甚至假阴性结果；（2）血脂过高，可使结果假性偏高。2、ELISA：（1）钩状效应（类似于后带现象，出现于双位点一步法中，当待测抗原浓度
一、梅毒体外诊断试验 1.梅毒的体外诊断试验分类 梅毒的体外诊断试验按试验所用抗原分为非密螺旋体抗体试验(nontreponemal antibody test, NTrAT)和密螺旋体抗体试验(treponemal antibody test, TrAT)。NTrAT包括快速血浆反应素环状
近年来,随着医院实验室设备的全面改善,各种类型的血液分析仪迅速在全国普及,不但提高了工作效率和检验质量,还为临床提供了实验指标。但由于对血液分析仪的原理尚缺乏足够的了解和经验,有些单位在使用过程中出现了 些问题,甚至得出错误的结果,贻误临床诊断。现就仪器应用中的一些共性的问题作初步探讨。&nbs
近年来，随着科学技术的不断发展，全自动血球仪在临床检验中的应用越来越广泛，大大提高了临床检验的工作效率，保证了检验结果的准确性。然而仪器检测受多种因素的影响，致使检测结果与实际临床不符，给医生的诊断带来很大困难，也使检验医师不敢贸然报告。为此，我们参
补体结合试验中有5种成分参与反应，分属于3个系统：①反应系统，即已知的抗原（或抗体）与待测的抗体（或抗原）；②补体系统；③指示系统，即SRBC与相应溶血素，试验时常将其预先结合在一起，形成致敏红细胞。反应系统与指示系统争夺补体系统，先加入反应系统给其以优先结合补体的机会。如果反应系统中存在待测的抗体
近年来，随着科学技术的不断发展，全自动血球仪在临床检验中的应用越来越广泛，大大提高了临床检验的工作效率，保证了检验结果的准确性。然而仪器检测受多种因素的影响，致使检测结果与实际临床不符，给医生的诊断带来很大困难，也使检验医师不敢冒然报告。为此，我参考了一些资料，对误差原因进行了分析和探讨，特总结如下
刀豆球蛋白 A (ConA)- 过氧化物酶方法（根据参考文献 20 修改的方法)。( 1 ) 通过 1D 或 2D 电泳分离，并转移到硝酸纤维素膜上。( 2 ) 用 TTBS 缓冲液浸泡印迹膜 1 h。( 3 ) 将印迹膜在含有 ConA ( 25 μg/ml）的 TTBS 缓冲液中，室温下温育 2
品牌：Shibayagi 产品：Insulin ELISA Kit， Leptin ELISA Kit 样品准备：1. 样品最好现提现用，或-35度保存几天之内，解冻的样品需充分混匀后使用。2. 溶血和血脂含量过高的样品不宜使用。若需长时间保存，快速冷冻于-35度冰箱，防止反复冻
上海第二军医大学长征医院 廖万清 李秀丽现在机会性深部真菌感染的发病率急剧上升，你知道主要有哪些因素吗？自80年代以来，深部真菌感染的发病率在逐年上升，尤其是免疫抑制等高危患者的增加，以及耐药真菌和新出现真菌的日益普遍，显著改变了深部真菌感染的流行情况，如曲霉菌及其他霉菌的感染不断增加，非白念珠菌成
临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。为做到临床检验质量保证，中华人民共和国卫生部卫生技术标准化委员会已将临床检验标本采集和处理的有关问题，列为国家和行业的标准化文件，以达到对临床检验工作的规范化要求。如中华人民共和国卫生行业标准WS/T225-2002﹑WS/T226-2
ELISA原理 ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性，对标本进行检测；由于结合与固体承载物（一般为塑胶孔盘）上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计 其结合 机制後，配合酵素显色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同，ELI
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 1.测定------分子量、PI &nbs
4. 注释( 1 ) 每个实验均使用新鲜的 3 mol/L 甲醇- HCl 和硅烷化试剂。( 2 ) 要仔细识别蛋白质印迹，因为 WGA 既能识别 N-糖苷的 GlcNAc，也能识别 O-GlcNAc。( 3 ) 用于在硝酸纤维素印迹膜上封闭结合位点的溶液应避免糖蛋白污染。所以我们建议在这一步骤中使
冷凝集对血细胞分析仪检测标本的影响已多有报道,为解决这一问题, 有人提出标本加温的方法, 我们实践发现在环境温度较低时, 单纯的标本加温并不能得到准确的分析报告, 故建立了血液标本与检测试剂双重加温, 15 分钟后用血细胞分析仪自动检测标本的方法, 彻底消除冷凝集素使红细胞(RBC) 凝集的影响
实验概要免疫组织化学 (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA 等免疫测定方法低，但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此，从 IHC 获得的信 息结合显微技术
实验概要免疫组织化学 (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA 等免疫测定方法低，但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此，从 IHC 获得的信 息结合显微技术
细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜，而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接，起到“桥”的作用。实验材料土豆块茎试剂、试剂盒鸭血红