CFX96荧光定量PCR中文操作手册
CFX96是一款中高端荧光定量PCR， 越来越多的被国内使用者们采用， 下面是这台机器的中文手册， 可以打印出来放在机器边上方便学生使用。 CFX96 实时荧光定量PCR仪器的操作流程及注意事项1、开始运行仪器1.1打开电脑1.2打开定量PCR仪底座开关1.3启动CFX Manager软件2、放置样品2.1将PCR反应体系加入到0.2ml底缘八联管，盖上管盖；或加入底缘96孔板，用光学级封膜封好。注意，必须戴一次性塑料手套，不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。3、设置程序，运行试验3.1定量PCR软件操作基本步骤为：a.设置热循环程序文件（protocol tab）b.设置反应板文件（plate tab）。c.点击"start run"键，运行程序。3.2热循环程序......阅读全文
荧光定量PCR的CT值
如果有标准曲线，按照标准曲线计算。一般都是相对量。则用delta delta CT方法来计算。举例如下：对照组基因A的CT值为20， 内参（比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18，内参CT值14。首先算加样量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量是
荧光定量PCR仪主要构造
qPCR仪包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件。常用的荧光激发方式有三种激光激光是纯粹的单色光，用来做荧光染料的激发光强度超级高而且基本上没有背景干扰，但激光光源的价格也和性能一样高高在上，市场上只有最高端的定量PCR设备才会使用激光光源，价格和性能都令我们绝大多数的普通用户高山仰止。卤钨灯相
荧光定量PCR染料法介绍
荧光定量PCR仪负责监控反应体系中荧光强度的变化，记录检测荧光达到阈值时的循环数。从理论上说，每一个qPCR循环会使目标序列翻倍，因此人们可以在Ct值的基础上对样本进行定量。 荧光定量PCR主要分为染料法和探针法两种。染料法一般采用DNA染料，这种方法不仅使用简单，成本也z
实时荧光定量PCR的原理
所谓实时荧光定量PCR技术 ，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。区别：1、二者系统组成不同荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。2、二者原理不同荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。区别：1、二者系统组成不同荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。2、二者原理不同荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测
如何做实时荧光定量－PCR－(realtime－PCR)
标签： 实时 荧光定量 PCR realtime PCR 本生生物 所谓实时荧光定量 PCR 技术，是指在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 原理及材料： 实验材料：细胞样品 试剂、
多重pcr和多重荧光定量pcr的区别
正常啊，定量PCR很灵敏的，体系稍微变化就会误差很大，更何况你这样反应体系都不一样。所以一般定量结果只是作为佐证，最好别太相信。你想做好，就尽量保证每个体系是一致的，最后结果趋势是一致的就行了。
快速了解荧光定量PCR与数字PCR区别
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。区别：1、二者系统组成不同荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。2、二者原理不同荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。区别：1、二者系统组成不同荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。2、二者原理不同荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测
普通PCR梯度PCR－原位PCR－荧光定量PCR仪的区别
普通PCR仪： 一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，称之为普通PCR仪，也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如；（ABI 2720） 梯度PCR仪： 一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称
荧光定量PCR荧光化学物质
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下： 1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；P
荧光定量PCR实验时，荧光基团如何选择？
原则一 每个反应只检测一个基因的，方法就比较简单，对5’端荧光基团的选择以及3’端淬灭基团的选择余地都是比较大的。比如5’-FAM + 3’-BHQ，就是比较常见的方案。 下表为常用荧光染料（基团）的颜色及波长参数，供参考。 原则二 如果在每个反应中要检测的目的
实时荧光定量PCR仪的优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值（限制点的循环数）。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大，这样可以获得最准确，可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品，线性回归分析将产生一条标准曲线，可以用来计算未知样品的浓度。
实时荧光定量PCR的技术概况
实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
关于实时荧光定量PCR的介绍
实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。· Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信
实时荧光定量PCR的技术原理
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增
荧光定量PCR检测仪特点
1.体积小，重量轻，易于携带。轻松满足外出实验的需求。 2.内置10寸高清电容屏PDA，触屏操作，简便快捷。 3.Marlow高品质Peltier制冷片，结合德国高端PT1000温度传感器以及电性电阻加热补偿边缘的温度控制模式，最大升温速度7℃，最大降温速度5℃，大大缩短实验时间。 4.整
关于实时荧光定量pcr仪简述
实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常
实时荧光定量PCR仪－采购要领！
目前购买荧光定量PCR仪系统，一般包括： 实时荧光定量PCR仪 +实时荧光定量PCR仪 开机检测试剂+通用电脑+自动分析软件 荧光定量PCR仪 组成：温控模块、光学系统（光源、检测器、光路传导） 采购要领 1 温控模块/Peltier： 普通的Peltier加热方式具有明显边
荧光定量PCR仪选择要点
光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确，受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天，也许对你来说，最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算，更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资
什么是实时荧光定量PCR仪
实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常
荧光定量PCR技术及其应用（一）
荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简
荧光定量PCR技术及其应用（二）
3 应用由于FQ-PCR具有高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，目前，该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域。3.1 病原体测定由于PCR技术的问世，使得病原体检测能够快速而方便的进行。但由于其高灵敏性，实验操作很容易受到污染而出现假阳性。只要
实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相，中间层以及无色水相
实时荧光定量PCR仪－采购要领！
目前购买荧光定量PCR仪系统，一般包括： 实时荧光定量PCR仪 +实时荧光定量PCR仪 开机检测试剂+通用电脑+自动分析软件 荧光定量PCR仪 组成：温控模块、光学系统（光源、检测器、光路传导） 采购要领 1 温控模块/Peltier： 普通的Peltier加热方式具有明显边
实时荧光定量PCR技术的应用
1. 基因工程研究领域 ① 基因表达研究：对β地中海贫血症患者β与γ珠蛋白mRNA水平进行检测，其结果特异性强、定量准确，为了解β地中海贫血的分子病理机制及其临床诊断提供了可靠的检测数据。 ② 转基因研究：利用两种发光探针及适当的循环阈值，扩增一个转移后的基因和一个对照基因，以分析转基因
荧光定量PCR的主要应用介绍
临床疾病诊断各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断；遗传基因检测实现遗传病诊断。动物疾病检测禽流感、新城疫、口蹄疫、猪瘟、沙门菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病
荧光定量PCR实验的技术要点
1、 目的基因（DNA和mRNA）的查找和比对 从http://www.ncbi.nlm.nih.gov/网点的genbank中下载所需要的序列。下载的方式有两种：一为打开某个序列后，直接点击“save”，保存格式为“.txt”文件。保存的名称中要包括序列的物种、序列的亚型、序列的注册号。然后