MTT法与CCK8法综合优势比较
CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。CCK-8法的优点:1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;2、CCK-8法能快速检测;3、CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;4、CCK-8法的重复性优于MTT法......阅读全文
mtt法原理和步骤是什么
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。(1)单细胞悬液接种于9
细胞生长检测2:MTT检测法
MTT检测法1.取96孔细胞培养板,每孔中加0.1ml含2×104~10×104靶细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2~3小时让细胞帖壁(如果是悬浮细胞可直接进行下一步)2.用RPMI-1640培养液2~10倍递次稀释细胞
细胞生长检测方法:MTT检测法
1、取96孔细胞培养板,每孔中加0.1ml含2×104 ~10×104 靶细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),在37℃ 5%CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2~3小时让细胞帖壁(如果是悬浮细胞可直接进行下一步)2、用RPMI-1640培养液2~10倍递次稀释细胞因子标准
mtt实验法注意事项
加药时间主要看你的实验目的、细胞的生长速度以及你的铺板密度。MTT最好还是吸出来,因为倒的力度太小,溶液倒不干净;力度太大又可能把结晶也倒掉了。如果用枪头吸取,可以倾斜30度慢慢地吸,一定不要把结晶吸出来,也可以用注射器吸取。总的原则就是既要把MTT溶液吸干净,又不能让结晶有所损失,否则都将影响最后
MD酶标仪应用:细胞活力和毒性分析的原理和方法(一)
一、简介靶向细胞的科研研究和药物研发避免不了细胞活力的分析和追踪。但依据实验的最终目的和关注参数的不同,细胞活力的体现,检测方法也会不一样。例如细胞增殖检测适用于比较不同细胞株增殖能力,而细胞毒性分析则可以用于探究候选药物是否有细胞毒性等。从分析仪器上来说,现阶段主流的检测平台,如显微镜,流式细胞仪
DNA定量法比较——紫外—可见吸收光谱和荧光光谱优势比较
通常情况下,对定量DNA应用荧光或紫外-可见光谱。两种方法各有优缺点,重要的是应考虑在整个分析中,包括上、下游工艺的方法。 对分子生物学家而言,DNA定量是一种重要而常规的技术。量化数据本身很少被当作实验的最终结果,更常见的是将其作为生物源提取物和下游使用、分析之间的桥梁。定量是重要的,但
DNA定量法比较—紫外—可见吸收光谱和荧光光谱优势比较
通常情况下,对定量DNA应用荧光或紫外-可见光谱。两种方法各有优缺点,重要的是应考虑在整个分析中,包括上、下游工艺的方法。 对分子生物学家而言,DNA定量是一种重要而常规的技术。量化数据本身很少被当作实验的最终结果,更常见的是将其作为生物源提取物和下游使用、分析之间的桥梁。定量是重要的,但
靶细胞杀伤实验:MTT和CCK8比较
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒
离子对色谱法与反向色谱法相比较优势
在流动相中添加离子对试剂可以改善碱性物质色谱峰的拖尾,增加原本保留很弱的酸性或者碱性离子化合物的保留(并且k值合理)。其和反向色谱法中改变流动相pH导致化合物的保留时间变化性质差不多,但是离子对色谱法能够更好的控制酸性或者碱性化合物的保留行为,而且无须使用极端的流动相pH(pH小于2.5或者大于
气相色谱法与液相色谱法的特点比较
气相色谱和液相色谱各有其优缺点和应用范围: 气相色谱采用气体作为流动相,由于物质在气相中的流速比在液相中快得多,气体又比液体的渗透性强,因而相比液相色谱,气相色谱柱阻力小,可以采用长柱,例如毛细管柱,所以分离效率高。由于气相色谱毋需使用有机溶剂和价格昂贵的高压泵,因此气相色谱仪的价格和运行费用较低,
COD检测方法之高锰酸钾法与重铬酸钾法的比较
COD(Chemical Oxygen Demand化学需氧量)是在一定的条件下,采用一定的强氧化剂处理水样时,所消耗的氧化剂的量,这是一个表示水中还原性物质多少的一个指标。虽然COD不是具体一种物的含量,但是它指示的却是污染程度,并且是污水检测的一个关键指标,与氨氮、金属离子、磷、有机物等污染
比较高效液相色谱法与气相色谱法
HPLC的保留值等色谱分析有关术语以及分配系数、分配比、塔板高度、分离度、选择性等方面均与气相色谱相一致;高效液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率理论也与气相色谱一致。因液相色谱以液体代替气相色谱中的气体作流动相,则速率方程H=A+B/u + Cu式中:纵向扩散项(分子扩散项)B/u对板高的影响与
荧光磁粉探伤法与非荧光磁粉探伤法比较
(1)荧光磁粉探伤法对比率高。由于磁粉探伤主要依据观察缺陷形成的磁痕来判断缺陷的存在与否及其分布严重程度。因此,磁痕与周围背景之间的亮度或颜色差别是十分重要的,这种差别称为对比度。它们对光的反射的相对量称为对比率,其间之差别越大越容易识别。在强光下人跟对光强度的微小区别不敏感但对颜色识别能力很强
蛋白的生物活性测定方法(结晶紫法和MTT法)
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5×105个
cck8实验原理
cck8实验原理是如下:一、实验原理:细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二
cck8实验原理
cck8实验原理是如下:一、实验原理:细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二
cck8实验原理
cck8实验原理是如下:一、实验原理:细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二
cck8实验原理
cck8实验原理是如下:一、实验原理:细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二
比较液相色谱法中正相色谱法与反相色谱法的异同
正相色谱:流动相极性小于固定相极性反相色谱:流动相极性大于固定相极性正相色谱用的固定相通常为硅胶,以及其他具有极性官能团,如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性
比较液相色谱法中正相色谱法与反相色谱法的异同
正相色谱:流动相极性小于固定相极性反相色谱:流动相极性大于固定相极性正相色谱用的固定相通常为硅胶,以及其他具有极性官能团,如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性
农药残留速测法与气相色谱法的验证与比较分析
一、材料与方法 1.材料和仪器 抽取白菜类、甘蓝类、绿叶菜类、瓜类、茄果类、豆类等6类共48个样品,样品均从无公害基地、农户生产基地中随机抽取。仪器采用台湾产农药残留快速检测仪(绿辉牌96通道)、日本岛津GC-2010气相色谱仪(配FPD、NPD、ECD检测器)。 2.方法 (
与经典液相(柱)色谱法比较
经典液相(柱)色谱法使用粗粒多孔固定相,装填在大口径、长玻璃柱管内,流动相仅靠重力流经色谱柱,溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢,柱入口压力低,仅有低柱效,分析时间冗长。 高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相,装填在小口径、短不锈钢柱内,流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱,溶质在固定相的传质
标准法与仪器测定烟点法的比较
油脂烟点是判断油脂品质的重要标准,油脂烟点的测定使用常规的目视法来进行测定,在油脂烟点测定方法中的标准测定方法应该是依据国家标准GB/T17756-1999中的方法来进行的,同时也可以使用仪器法来进行测定,使用植物油脂烟点测定仪来进行测定,植物油脂烟点测定仪简称烟点仪,通过两者的测量来进行了解烟
化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较
临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点,显示出很好的应用前景[1]。为进一步了解化学发光免疫法的特点,本文报告用放射免疫法和化学发光免疫法对比检测60例临床血清标本中AFP的含量,并对结果进行统计分析和比较。
化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较
材料和方法 一、标本 随机抽取60例临床送检血清标本。 二、仪器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ计数仪,中国原子能科学研究所的AFP试剂盒。化学发光免疫法使用美国Chiron公司的ACS180全自动化学发光仪和配套试剂盒。其测定原理为以吖啶酯作
关于界面张力仪铂金板法与铂金环法的特性比较
界面张力的测定通常采用界面张力仪,它是一种用物理方法测试液体的表界面和液体与液体之界面张力的仪器,根据测试原理的不同可分为二种:铂金板法和铂金环法。 铂金板法测量的是液体的界面(或表面)张力的平衡值,铂金环法测试的是液体的界面(或表面)的大力值。 铂金板法在测量时比较铂金环法具有以下
马丁代尔平磨法和TABER耐磨法的比较与选择
皮革的耐磨性能,是皮革所具有的抵抗磨损的特性。皮革的磨损是造成皮革损坏的重要原因。虽然皮革的磨损牢度目前尚未作为国家标准进行考核,但皮革的耐磨性实验仍是衡量其质量所不可缺少的,它对评定皮革的服用牢度有着极其重要的意义。 根据试验用的不同仪器,常用有两种方法:马丁代尔平磨法和TABER耐磨法 1、
MTS法测定细胞增殖的原理与MTT法有何不同
MTS法原理:被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。跟MTT法区别如下:一、指代不同1、MTT法:利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法。2、MTS法:是一种检测细胞存活和生长的方法
kb细胞活力检测比色法检测的介绍
MTT比色分析法是由Mosmann在1983年Shou创,其原理是活细胞内的线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以将MTT[化学名为3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐,外观淡黄色]还原成蓝紫色结晶甲臜,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜 (DMSO) 能溶解细胞中的甲臜,溶液
选择MTT、CCK8试剂盒的原理和方法
MTT、CCK-8试剂盒是进行细胞增殖和细胞毒性检测的常用试剂盒,在进行实验时应该如何从两种试剂盒中进行选择呢?一、原理介绍: MTT试剂盒中含有MTT(化学名:3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐),外源性MTT能够被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原为深紫色结晶甲瓒,该产物不溶