比较液相色谱法中正相色谱法与反相色谱法的异同
正相色谱:流动相极性小于固定相极性反相色谱:流动相极性大于固定相极性正相色谱用的固定相通常为硅胶，以及其他具有极性官能团，如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。以上样品出峰顺序为一般情况，而鉴于实际应用中影响色谱峰的诸多因素，可能会违背以上一般规律。因此欲深入详细的了解，建议参考相关书籍。......阅读全文
反相色谱
根据流动相和固定相相对极性不同，液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
反相色谱柱
反相色谱柱
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。在 HPLC系统的基础
反相色谱介绍
反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚，是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种，对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析，反相液相色谱正受到越来越多的关．反相色语法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
反相色谱RPC
反相色谱（ RPC）是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用，尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系，一般不可能在洗脱时间（体积）的基础上识别被分离的样品。通常，每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析，才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
反相色谱的反相介质是什么？
反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如
反相色谱法
反相色谱法应用中性、非极性大孔的填充材料和极性流动相。分离基于被分析物质与固定相之间的相互作用，换句话说，也就是样品的疏水性。
反相色谱的概念
反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚，是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种，对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析，反相液相色谱正受到越来越多的关．反相色语法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于样品
反相色谱色谱柱的选择
色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30～250 mm,颗粒直径在1.6～5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优
何谓正相色谱和反相色谱
1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离
何谓正相色谱及反相色谱
正相色谱：极性固定相和相对非极性流动相；反相色谱：相对非极性固定相和极性流动相。特点：正相健合相色谱主要用于极性化合物的分析，如脂溶性维 生素、甾族、芳香醇、芳香胺、 脂和有机氯农药等。反相健合相色谱主用于非极性或中等极性化合物的分析， 如同系物、稠环芳烃、药物、激素、天然产物及农药等。
反相色谱仪分类
反相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分：化验室反相色谱仪和工业反相色谱仪。2、按功能可分：分析型反相色谱仪和生产型反相色谱仪。3、按分离规模可分：小型反相色谱仪和大型反相色谱仪。4、按结构可分：台式反相色谱仪和落地式反相色谱仪。5、按用途可分：反相生物色谱仪、反相制药色谱仪、反相化工色谱仪、反相食
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
关于反相色谱的介绍
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
高效反相液相色谱
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液
反相色谱柱的选择
1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系，对于含有酸碱性组份的样品，流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系；检测波长一般在254nm下检测，因为在此波长处，甲醇、乙腈，磷酸缓冲
反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
反相色谱柱的选择
反相色谱柱的选择： 1.柱子的PH值使用范围 反相色谱柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。 一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要
高效反相液相色谱
实验方法原理 反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高
高效反相液相色谱
实验方法原理反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反
何谓反相液相色谱
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相，就称为正相；如果采用相对非极性固定相和极性流动相，则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留，所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反，反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系，对于含有酸碱性组份的样品，流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系；检测波长一般在254nm下检测，因为在此波长处，甲醇、乙腈，磷酸缓冲盐均没有紫外吸收，而且标
什么是反相色谱柱
固定相为非极性的色谱柱。在反相键合相色谱中，溶剂的极性越弱洗脱能力越强，即弱极性溶剂的洗脱强度更大
反相薄层色谱法
反相薄层色谱法反相薄层色谱是利用化学键合反应，将烃基硅烷键合到硅胶表面，制成非极性固定相，用极性较大的液体作流动相进行分离分析的方法，可克服疏水板对溶剂、系统的限制，其流动相含水量根据键合相不同可达20%～80%不等。常用展开剂是水和甲醇混合溶剂，其次是水和乙腈，并可使用强酸或强碱作流动相。本法可用
反相色谱中洗脱顺序
反相色谱中洗脱强度顺序为：水
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相
什么是正相色谱和反相色谱
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非
什么是正相色谱和反相色谱
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非