使用台式高分辨质谱分析非变性状态mAb（一）
张晓夕1,Yue Xuan2, 李静1，顾培明1，吴泽明1，Application Group, LC-MS, CMD, Japan31 赛默飞世尔科技（中国）有限公司2 Thermo Fisher Scientific, Bremen, Germany3 Thermo Fisher Scientific, Yokohama, Japan 1 前言在最近十年中，非变性质谱（Native mass spectrometry） 正在逐渐成为非共价结合的完整蛋白复合物表征的重要技术手段 [1]。对于完整单克隆抗体（mAbs），非变性质谱可提供分子量、糖型等的精确测量结果，还可用于高级结构（二聚、三聚和四聚）的测定；非变性质谱正在成为一种具有稳健性、快速且可靠的一线分析表征工具[2,3]。 赛默飞世尔科技在2013 年国际HUPO 大会上发布的Thermo ScientificTM E......阅读全文
使用台式高分辨质谱分析非变性状态mAb（一）
张晓夕1,Yue Xuan2, 李静1，顾培明1，吴泽明1，Application Group, LC-MS, CMD, Japan31 赛默飞世尔科技（中国）有限公司2 Thermo Fisher Scientific, Bremen, Germany3 Thermo Fisher Scient
使用台式高分辨质谱分析非变性状态mAb（二）
从图3中可以看出，当使用最低一档分辨率（8750）时，单克隆抗体的不同糖型之间无法得到分离，通过解卷积结果也可以发现，其结果与标准分子量有较大差距。这证明当分辨率不够高时，由于测量精确度不够，造成解卷积结果与标准分子量差距较大。 图2 在不同分辨率下测定单抗分子量测试标准品分子量 图3 8750
高分辨质谱仪实现非变性状态ADCs－药物的分析（一）
1 前言单克隆抗体被认为是具有高度特异性的靶向药物，其对肿瘤细胞的靶向性非常高。而抗体- 药物偶联物（Antibody-drug conjugates，以下简称ADCs）技术，就是在抗体蛋白的特定氨基酸上偶联具有抗肿瘤作用的高效应化疗药物（或称小分子药物），以增加单克隆抗体的疗效、并降低小分子药
高分辨质谱仪实现非变性状态ADCs－药物的分析（二）
2.3数据处理采用Thermo ScientificTM Protein Deconvolution 3.0对原始质谱图进行去卷积。 参数如下： Noise compensationONMinimum adjacent charges1 to 3Noise Rejection95% confiden
还原/非还原、变性/非变性SDS具体有什么不同
SDS是一种有效的变性剂，它能够断裂蛋白质分子的氢键和疏水作用，这个是SDS的一般原理，这也就是所讲的还原性SDS，这也是最有效的一种，因为键的断裂伴随的是蛋白质分子的伸展，这样我们的SDS就可以根据蛋白质的情况结合，从而把我们的蛋白质分子带上负电荷，可以电泳。有一点就是这是我们讲的还只是SDS。并
还原/非还原、变性/非变性SDS具体有什么不同
SDS是一种有效的变性剂，它能够断裂蛋白质分子的氢键和疏水作用，这个是SDS的一般原理，这也就是所讲的还原性SDS，这也是最有效的一种，因为键的断裂伴随的是蛋白质分子的伸展，这样我们的SDS就可以根据蛋白质的情况结合，从而把我们的蛋白质分子带上负电荷，可以电泳。有一点就是这是我们讲的还只是SDS。并
9月质谱中标市场整体趋势呈稳定状态
2022年9月中国政府采购网上质谱仪中标项目共有69条，质谱仪的中标金额与中标数量整体形势趋于稳定，其中可详细统计的中标质谱76台/套，质谱中标总金额达到15010.279万元，涉及到国内外20个品牌，5个不同类型的质谱仪。 (注：本文为不完全统计，数据来源为中国政府采购网上发布的采购金额与采购
Purification－of－mAb－(IgG)
1. Materials(1) Antibody 7E3, 2L sup grown in flasks, frozen and thawed overnight.(2) BioRad Affi-Gel Protein A MAPS II Buffers cat. #1530-6160 ($161.
非变性胶蛋白电泳
Section 2.1Nondenaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis of ProteinsJohn M. Walker1. IntroductionSDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commo
Native－gel－electrophoresis（非变性电泳）
Native gel electrophoresis Under native PAGE conditions, polypeptides retain their higher-order structure and often retain enzymatic activity and inte
总RNA－的非变性电泳检测
总 RNA 的电泳检测，原来我使用 Lambda DNA/EcoR I （或者 Hind III）酶切 Marker，现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰，胶浓度 1-1.2%。加样后，开始电泳 (电压的选择的唯一依据是，我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3cm 后
质谱及质谱的目的
质谱，是一种分析方法，原理就是让带电原子、分子或分子碎片按质荷比的大小顺序排列，打出相应的谱线。待分析的样品分子在离子源中离化成具有不同质量的单电行分子离子和碎片离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能并形成一束离子，进入由电场和磁场组成的分析器中；其中离子束中速度较慢的离子通过电场后编转大，
气体分析质谱质谱原理
质谱仪配备QuaderaTM 分析软件, 操作简单, 功能强大, 有128 个检测通道，可生成用户特殊应用软件界面. 在参数设置, 多种实测方式, 谱库, 数据统计, 谱图放大, 光标, 输入输出模块等性能的支持下, 可以更方便地进行定性定量分析以及在线离线分析. Omnistar/
人用抗体偶联药物制品
随着生物制药行业的不断发展及抗体类药物的持续创新，国内已经批准上市的ADC药物越来越多，新版药典更新人用抗体偶联药总论。ADC药物在主要利用公用靶点、偶联方式、偶连比、偶连的药物分子及Payload上都有更新。靶点，抗体，毒性分子，连接子的选择与表征成为药物是否成功的关键，检测与表征技术的不断完
质谱
不同质荷比的离子经质量分析器分离，而后被检测并记录下来的谱图叫作质谱图。简称质谱。质谱图的横坐标是质荷比(m/z) ，纵坐标是离子强度；质谱法(Mass Spectrometry) 即质谱分析法， 一般亦简称为质谱；质谱计(Mass Spectrometer): 采用顺次记录各种质荷比离子的强度的方
不连续非变性凝肢电泳实验
非变性凝胶电泳，也称为天然凝胶电泳。在凝胶中蛋白质的分离取决于它所带电荷及分子大小。按丙烯酰胺凝胶孔径大小去筛分不同尺寸蛋白质的同时，在分离胶酸性 pH 条件下高电荷的蛋白质的泳动速度会更快。这种方法可以区分仅有一个电荷单位差别的分子。与 SDS-PAGE 电泳相比，非变性凝胶大大降低了蛋白质变性发
不连续非变性凝肢电泳实验
实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH（8.8）缓冲液条件下进行。这时，多数蛋白质带负电荷，并向阳极迁移。 实验材料 蛋白质溶液
不连续非变性凝肢电泳实验
实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH（8.8）缓冲液条件下进行。这时，多数蛋白质带负电荷，并向阳极迁移。实验材料 蛋白质溶液试剂、试剂盒 丙烯酰胺双丙烯酰胺Tris 碱盐酸过硫酸铵TEMED甘氨酸甘油溴酚蓝甲醇冰醋酸仪器、耗材 Bio-Rad Min-Protean II 凝胶电泳槽微量注射
蛋白质的非变性－PAGE－实验
实验材料蛋白溶液或块状细胞蛋白试剂、试剂盒丙烯酰胺过硫酸铵电泳缓冲液5X样品缓冲液分离胶缓冲液浓缩胶缓冲液仪器、耗材微量注射器移液器吸头或凝胶上样吸头实验步骤1.安装凝胶灌制模具、灌制凝胶、开始电泳，以及对凝胶进行的操作、保存、染色等步骤均与方案 1 中所述一致。2.若要通过检测生物学活性来确定蛋白
什么是质谱及质谱图
质谱（又叫质谱法）是一种与光谱并列的谱学方法，通常意义上是指广泛应用于各个学科领域中通过制备、分离、检测气相离子来鉴定化合物的一种专门技术。质谱法在一次分析中可提供丰富的结构信息，将分离技术与质谱法相结合是分离科学方法中的一项突破性进展。在众多的分析测试方法中，质谱学方法被认为是一种同时具备高特异性
打质谱打质谱！你知道质谱究竟为何物吗？
随着质谱技术的日新月异的进步，作为研究科研的有利工具，也越来越受到大家的亲睐和欢迎，其中在各类组学中的广泛应用也会各类质谱仪器的选择密不可分，那对于组学中常用的仪器你了解多少，对于其区别和优势有是否清楚，今天我们就主要讲一讲质谱哪些事儿。 那我们先吊一下书袋子， 什么叫质谱？质谱（又叫质谱法）
打质谱打质谱！你知道质谱究竟为何物吗？
随着质谱技术的日新月异的进步，作为研究科研的有利工具，也越来越受到大家的亲睐和欢迎，其中在各类组学中的广泛应用也会各类质谱仪器的选择密不可分，那对于组学中常用的仪器你了解多少，对于其区别和优势有是否清楚，今天我们就主要讲一讲质谱哪些事儿。 那我们先吊一下书袋子， 什么叫质谱
dart质谱和maldi质谱的区别
这个叫做secondary ion mass spectrometry。用在固体分析的多一些。通常直接用粒子束轰击固体表面，然后固体表面会被“离子化”，采集然后分析这些离子称为二次离子质谱法。举个例子，你用DART离子源发射离子到表面，然后生成离子，之后再分析就是二次离子质谱分析。但是如果你用MAL
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱——质谱，利用这一性质，可以进行定性分析（包括分子质量和相关结构信息）；谱峰强度也与它代表的化合物含量有关，可以用于定量分析。 质谱仪一般由四部分组成：
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱——质谱，利用这一性质，可以进行定性分析（包括分子质量和相关结构信息）；谱峰强度也与它代表的化合物含量有关，可以用于定量分析。 质谱仪一般由四部分
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱——质谱，利用这一性质，可以进行定性分析（包括分子质量和相关结构信息）；谱峰强度也与它代表的化合物含量有关，可以用于定量分析。质谱仪一般由四部分组成：进
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱——质谱，利用这一性质，可以进行定性分析（包括分子质量和相关结构信息）；谱峰强度也与它代表的化合物含量有关，可以用于定量分析。质谱仪一般由四部分组成：进
促进质谱新技术，传承质谱文化
——第六届中国仪器仪表学会分析仪器分会质谱专业委员会诞生2022年8月26日，由中国仪器仪表学会分析仪器分会质谱仪器专家组和分析测试百科网主办的《第五届质谱仪器研发论坛》在北京市怀柔区举办。本次大会旨在进一步加强我国质谱新技术研发、应用、产业化及投资等方面的交流、促进我国质谱行业健康快速发展。质谱研
液质联用中的质谱——串联质谱篇（中）
本文举几例常见的串联质谱仪，篇幅较长分为上、中、下三篇。 线性离子阱LIT/FTICR和LIT/Orbitrap QqQ和QTOF都是串联两个“离子束”型分析器，近年来还有一种趋势是串联两个离子捕获型分析器，线性离子阱LIT/FTICR是此类最早的类型，由于维护困难，近年来慢慢被LIT/Or
液质联用中的质谱——串联质谱篇（下）
本文举几例常见的串联质谱仪，篇幅较长分为上、中、下三篇。 串联质谱扫描方式 串联质谱的扫描方式包括以下几种： 1、子离子扫描/产物离子扫描/碎片离子扫描（Product Ion Scan/Fragment Ion Scan）： 选择某一质量的母离子进入碰撞室，与碰撞室内的碰撞气体发生解离