优化色谱质谱参数获得理想的单抗轻重链分子质量(一)
1. 前言现在,越来越多的生物制药公司开始使用 Orbitrap 类型的质谱进行单抗药物的表征分析,包括完整分子质量、轻重链分子质量、肽图、糖链、二硫键、宿主蛋白残留等等。基于分子质量测定的方法更加快速和直接,尤其是通过单抗轻重链分子质量测定的方法,不仅可以得到分子质量的信息,而且可以获得和轻重链相关的二硫键信息、部分氨基酸后修饰位点的信息,糖基化结合位置的信息、ADC 结合位置的信息等等,同时,相对于完整分子质量的分析,单抗轻重链分子质量测定可以帮助客户获得更加细化和准确的信息。在实际样品分析的过程中,我们可以通过优化色谱分离条件、质谱分析条件来获得最佳的轻重链分子质量谱图和相关信息。 目前,基于 Orbitrap 类型的 Q-Exactive 系列、LTQ-Orbitrap 系列、Orbitrap-Fusion 系列的质谱仪器都可以进行各种类型的单抗表征分析,在这里我们以 Q-Exactive pl......阅读全文
优化色谱质谱参数获得理想的单抗轻重链分子质量(一)
1. 前言现在,越来越多的生物制药公司开始使用 Orbitrap 类型的质谱进行单抗药物的表征分析,包括完整分子质量、轻重链分子质量、肽图、糖链、二硫键、宿主蛋白残留等等。基于分子质量测定的方法更加快速和直接,尤其是通过单抗轻重链分子质量测定的方法,不仅可以得到分子质量的信息,而且可以获得和轻重
优化色谱质谱参数获得理想的单抗轻重链分子质量(二)
图 1. Q-Exactive 质谱采集的单抗轻链原始质谱图(SID 代表源内碎裂能量,右上角的数字代表峰强度) 图 2. Q-Exactive 质谱采集的单抗重链原始质谱图(SID 代表源内碎裂能量,右上角的数字代表峰强度) 3.2 液相色谱梯度的优化 在样品初步测试的过程中,我们使用 10 分
华谱科仪液相色谱产品生态链——色谱质谱
通过华谱科仪创始人、董事长王利春的介绍,你了解液相色谱产品生态链了吗?液相色谱产品生态链 华谱科仪目前已建立了以客户为中心,由(超)高效液相色谱仪、三重四极杆质谱仪、色谱柱/前处理耗材、色谱软件、应用和售后服务体系等形成的完整产品生态链。华谱科仪首席运营官 于笑然 华谱科仪首席运营官于笑然先
根据质谱图怎么求出相对分子质量
可以先找母离子,之后通过二级MS的碎片离子进一步确认一般来说对后面的峰有可能是分子离子,要是这样的话,分子量就至个峰的值;
基于-QExactive-平台和-BioPharma-Finder-软件的简单快速抗体...
基于 Q-Exactive 平台和 BioPharma Finder 软件的简单快速抗体药物二硫键解析1. 前言目前,在全球范围内,单克隆抗体药物已经成为生物医药领域中最耀眼的一颗明珠。该类抗体药物具有靶向性专一、特异性高和毒副作用低等特点,代表了药物治疗领域的最新发展方向,并且在抗肿瘤和自身免疫系
高分辨质谱仪应用于完整分子量测定的技术要求
高分辨LTQ-Orbitrap质谱仪测定完整、切糖、还原后的单抗分子 对于分子量150,000 D的单抗,我们可为你提供与理论值相比误差小于10 ppm的分子量测定结果。此外,我们还可以同样测定脱N-糖后去糖(deglycosylated)抗体分子量,以及还原后轻重链的分子量。测量精确度均在理论
华谱科仪参展慕尼黑:色谱+质谱完整生态链-打造知名民族品牌
近日,第十一届慕尼黑上海分析生化展(analytica China)在国家会展中心(上海)盛大举行。本届慕尼黑以临床研究与诊断、生物技术与研发服务、第三方检测为主题,共设有八大展区,同期还举办多场高质量主题会议的活动,吸引了超1200家展商参与。华谱科仪(北京)科技有限公司首席运营官于笑然先生等做客
单抗药物的分子质量、氨基酸序列以及糖基化位点鉴定-一
1. 前言单抗药物主要是由两条重链和两条轻链通过链内和链间二硫键以及非共价键组成,分子质量大约在 150 kD 左右,每条重链和轻链在 N 端都包含一个可变区域,在 C 端都包含一个恒定区域,并且在每条重链上还存在一个 N 糖基化位点,该位点含有不同的糖链结构,如图 1 所示。目前,在生
气相色谱质谱联用仪载气质量要求
(1)检查钢瓶压力。实验室就规定载气压力在3mpa的时候就必须对气体进行更换,因为不能把所有的载气都用完,气体压力不断减少的过程中你会发现测试标液图谱会变得越来越差,因为有杂质气体干扰。(2)检查真空状态。查看真空规,发现真空是否异常。(3)查看图谱来发现真空是否异常,这个就按照(1)所说的那样。
色谱质谱联用
色谱质谱联用中最典型的应用为气相色谱质谱法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)以及液相色谱质谱法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry)。 其优势在于通过色谱质谱的联用,解决了质谱中如果离子之间质量
色谱质谱联用
(1)气相色谱-质谱联用在色谱联用仪中,气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪是开发最早的色谱联用仪器。由于从气相色谱柱分离后的样品呈气态,流动相也是气体,与质谱的进样要求相匹配,最容易将这两种仪器联用。因此最早实现商品化的色谱联用仪器就是气相色谱-质谱联用仪。现在小型台式GC-MS已成为很多实验室的常
ADC-单抗药物的分子量、氨基酸序列、糖基化位点以...(三)
经过 Protein Deconvolution 2.0 软件去卷积处理之后的单抗分子量分布图如下所示(图 4),根据单抗的氨基酸理论序列分子量进行计算,将观察到的质谱峰进行归属,从图中我们观察到,该 ADC 单抗分子之间存在 956 Da 左右的质量增加,由此推断该单抗分子结合了不同数目的
高分辨LTQOrbitrap质谱仪应用于完整分子量测定的技术要求
高分辨LTQ-Orbitrap质谱仪测定完整、切糖、还原后的单抗分子 对于分子量150,000 D的单抗,我们可为你提供与理论值相比误差小于10 ppm的分子量测定结果。此外,我们还可以同样测定脱N-糖后去糖(deglycosylated)抗体分子量,以及还原后轻重链的分子量。测量精确度
高分辨LTQOrbitrap质谱仪应用于完整分子量测定的技术要求
高分辨LTQ-Orbitrap质谱仪测定完整、切糖、还原后的单抗分子 对于分子量150,000 D的单抗,我们可为你提供与理论值相比误差小于10 ppm的分子量测定结果。此外,我们还可以同样测定脱N-糖后去糖(deglycosylated)抗体分子量,以及还原后轻重链的分子量。测量精确度
一例肾脏轻重链沉积病病例分析
单克隆免疫球蛋白沉积病(MIDD)是以单克隆免疫球蛋白及其游离片段轻链和(或)重链沉积于全身组织、器官并引起功能障碍为特征,肾脏最易受累。MIDD可分为轻链沉积病(LCDD)、轻重链沉积病(LHCDD)和重链沉积病(HCDD)3种类型,其中,LCDD较为多见,LHCDD和HCDD罕见,本文将报道1例
测量单分子质量纳米秤问世-或为质谱敞开大门
一个纳米量级的振动梁能够测量单个分子的质量。 图片来源:Scott Kelber、Michael Roukes、Mehmet Selim Hanay 就像浴室里的一台小磅秤一样,一个物理研究小组如今报告说,他们的一个摇摆的小发明已经能够测量单个分子的质量。新的装置为质谱学
糖链分子工程:干细胞质量监控
人诱导的多能干细胞(hiPSC)和胚胎干细胞(hESC)作为再生医学的细胞来源获得了极大的关注。hiPSC和hESC具有永久生长(自我更新)和分化成包含人体(多能性)的任何类型的细胞的能力,甚至少数细胞可在受体内形成畸胎瘤。干细胞质量监控决定着干细胞研究的进展。为了解决这个问题,我们都集中在诱导的多
质谱-色谱-光谱-波谱
质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。 色谱法,又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利
色谱质谱联用技术
色谱质谱联用技术 一、联用技术的必要性 每种分析方法都有其特长和局限性。在线联用不仅能取长补短,而且还具有协同作用,获得两种技术单独使用时所不具备的某些功能。 色谱用于分离,而光谱用于结构鉴定,两者联用,不仅可以对混合物中的各未知组分进行定性,也可用于定量分析。 二、气相色谱-质谱联用(
关注临床质谱质量管理-了解临床质谱前沿应用
分析测试百科网讯2019年4月23-25日,由复旦大学附属中山医院检验科主办,复旦大学生物医学研究院中国医药教育协会检验医学分会、上海市生物医学工程学会检验医学专业委员会和美国临床质谱协会(MSACL)协办的“国家级I类继续教育学习班-第四届液相色谱–质谱技术临床应用培训班”在中山医院东院区18
PE-Sciex-液相色谱/质谱/质谱联用仪
仪器名称:PE Sciex 液相色谱/质谱 /质谱联用仪 仪器型号:API 3000 主要技术指标: 质量范围:5-3000amu多电荷的物质, 可检测的分子量范围达几万Da。 灵敏度:pmol 基本功能: (1)质谱仪配有电喷雾源(ES
PE-Sciex-液相色谱/质谱/质谱联用仪
仪器名称:PE Sciex 液相色谱/质谱 /质谱联用仪 仪器型号:API 3000 主要技术指标: 质量范围:5-3000amu多电荷的物质, 可检测的分子量范围达几万Da。 灵敏度:pmol 基本功能: (1)质谱仪配有电喷雾源(ESI)
气相色谱质谱联用仪的质谱原理
质谱分析是一种测量离子荷质比(电荷-质量比)的分析方法,其基本原理 是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。
气相色谱质谱联用仪的质谱原理
质谱分析是一种测量离子荷质比(电荷-质量比)的分析方法,其基本原理 是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。
液相色谱质谱联用仪包括串联质谱吗
液相色谱质谱联用仪(LC-MS)通常包括液相色谱(LC)和质谱(MS)两部分组成。在LC部分,目标化合物被分离并分解成小分子物质,然后进入MS部分,产生一系列离子化质谱片段,揭示样品的结构信息。联用LC-MS可以为复杂混合物的分析提供更高的分辨率和灵敏度。因此,联用质谱仪是一种非常强大的分析仪器,能
光谱、色谱、质谱、波谱检测
在检测领域,有四大名谱,也是检测领域的“四大天王”分别为色谱、光谱、质谱、波谱,在检测特色和适用范围上各有不同,但总有一款适合你! 质谱分析分子、原子、或原子团的质量的,可以推测物质的组成,一般用于定性分析较多,也可定量。 色谱是一种兼顾分离与定量分析的手段,可分辨样品中的不同物质。 光
中国质量|首台国产液相色谱高分辨质谱联用仪下线
赛默飞迎来了一个重要的里程碑——首台国产液相色谱高分辨质谱联用仪隆重下线。该产品不仅满足了中国客户日益增长的需求,同时也是持续服务本土客户、坚持本土创新、助力本土生态产业发展的价值彰显,标志着赛默飞在高分辨液质领域实现了首次国产化的突破,践行了赛默飞对中国市场的坚定承诺。 践行使命,‘质’在飞
ADC-单抗药物的分子量、氨基酸序列、糖基化位点以...(四)
3.2 糖基化位点确定ADC 单抗蛋白与其他单抗蛋白相同,也都包含 N-糖基化修饰,一般发生在保守序列 NXS 或 NXT 中(X 为除脯氨酸外的任意氨基酸)。在糖链完整的情况下,直接进行 trypsin 酶解,我们在搜库时进行 G0F 糖基化可变修饰设定,可以直接获得该 N 糖基化位点:重
单抗药物的分子质量、氨基酸序列以及糖基化位点鉴定-二
质谱分析条件:具体见表 4; 表 3. 氨基酸序列测定的色谱分析条件表 4. 氨基酸序列测定的质谱分析条件 2.2.3 数据分析方法采用 Proteome Discoverer 1.3 软件对原始谱图进行数据库搜索,具体搜库参数为:包含单抗氨基酸序列的数据库;半胱氨酸(C)烷基化(+57.021
高效液相色谱质谱与液相色谱质谱有什么区别
高效液相色谱-质谱与液相色谱-质谱有什么区别一样的,HPLC-MS联用现在的液相色谱仪均属于高效液相,是采用高压色谱柱洗脱分离