D荧光素钾盐及D荧光素使用中的常见问题
1、D-荧光素适合做哪些实验? D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素，作为Luciferase的作用底物，常用于以下实验：报告基因分析2. In vivo imaging (动物活体成像)3. In vitro imaging (细胞体外分析)4. ATP测定5. 其它luciferase及其基因相关的分析和研究工作2、D-荧光素应用于活体成像的基本原理 细胞中D-荧光素酶参与的化学发光反应遵守酶促反应的基本原理，在底物D-荧光素钾过量的情况下，反应产生的光子数（发光量）与细胞中的D-荧光素酶的量成正相关，从而可以推算出细胞的数量。3、D-荧光素钾盐溶液的稳定性 D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液，溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5（发生水解作用）或>7.5（发生消旋化作用，D型转化为L型）的情况下，D-荧光素......阅读全文
二乙酸荧光素的概念
二乙酸荧光素别名 FDA,荧光素二乙酸盐,荧光素二乙酸酯3,6-DiacetoxyfluoranDi-O-acetylfluorescein
关于荧光素的用途说明
1.沉淀滴定的吸附指示剂： 配成0.1%的乙醇溶液，或用其钠盐配成1%的水溶液。用Ag+滴定Cl-、Br-、I-、SCN-、CN-、C2O42-、SO42-、CO32-等，在中性或弱碱性介质中，滴定终点颜色由黄绿变为玫瑰红色。 2. 荧光素是发光物质的基质。使许多生物具有荧光的物质。它与A
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素luc不表达
双荧光素luc不表达有多种原因，实验过程中的每一个步骤都可能导致双荧光素luc不表达。如果目的基因载体没有成功转移到受体细胞，或者受体细胞没有成活，以及实验过程中出现其他物质抑制了双荧光素luc的表达等等，都有可能导致双荧光素luc不表达。基于荧光素酶（Luciferase）的发光原理，形成了双荧光
什么是双荧光素酶
荧光素酶（Luciferase）是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
二乙酸荧光素的用途
用途 FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488 nm和530 nm。
异硫氰酸荧光素的性状
黄色粉末。有吸湿性。能与各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光，加酸后析出沉淀，荧光消失，微溶于丙酮、乙醚和石油醚。物理参数熔点：>360 °C
双荧光素luc不表达
双荧光素luc不表达有多种原因，实验过程中的每一个步骤都可能导致双荧光素luc不表达。如果目的基因载体没有成功转移到受体细胞，或者受体细胞没有成活，以及实验过程中出现其他物质抑制了双荧光素luc的表达等等，都有可能导致双荧光素luc不表达。基于荧光素酶（Luciferase）的发光原理，形成了双荧光
荧光素的合成方法
将间苯二酚加热至150℃，使之全部熔融，边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐，混匀并熔融后升温至185℃，保温半小时，然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌，当完全溶解后，逐渐升温至210～215℃，整个过程均需不停地搅拌，当反应液开始变稠时，停止搅拌，继续在此温度下加热至完全固化，研碎后得粉状粗品。将粉状
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
异硫氰酸荧光素的概念
异硫氰酸荧光橙红，异硫氰酸荧光黄，异硫氰酸荧光红，异硫氰酸荧光素异构体I，5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末，有吸湿性，是一种生化试剂，也是医学诊断药物，可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。并且它能与各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色
荧光素钠的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约25mg,精密称定,置50m1量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取荧光素钠对照品约25mg,精密称定,置5oml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置00ml
荧光素酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 荧光素 4-单氧酶（ATP-水解）提取于萤火虫，Photinus Pyralis。荧光素＋ATP＋O2→氧和虫荧光素＋PPi＋H2O＋
荧光素酶检测（Luciferase－assay）
Introduction Luciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters, and/or the transfection efficiency. Aims You will be prov
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
什么是双荧光素酶
荧光素酶（Luciferase）是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
双荧光素luc不表达
双荧光素luc不表达有多种原因，实验过程中的每一个步骤都可能导致双荧光素luc不表达。如果目的基因载体没有成功转移到受体细胞，或者受体细胞没有成活，以及实验过程中出现其他物质抑制了双荧光素luc的表达等等，都有可能导致双荧光素luc不表达。基于荧光素酶（Luciferase）的发光原理，形成了双荧光
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素的定义和特征
荧光素又名荧光黄、荧光生、荧光红。有两种变体：稳定的红色变体B及黄色变体A。分子式为C20H12O5，分子量为332.31。B为红色带绿色荧光的结晶粉末。熔点314～316*C(分解)。溶于热醇、热苯胺、热丙酮、热甲酸，稍溶于水、醇、醚、乙酸，不溶于石油醚。A为黄色无定形粉末熔点314～316℃。溶
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
角膜荧光素染色的概述
角膜荧光素染色法，是一种了解角膜上皮有无缺损及角膜混浊是否为溃疡等的检查方法，可用1%～ 2%荧光素钠滴于下穹窿结膜囊内，1～2分钟后观察，角膜上皮缺损的部位有黄绿着色。 亦作泪膜破裂时间 (BUT) 的测定。
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素的结构和种类
荧光素又名荧光黄、荧光生、荧光红。有两种变体：稳定的红色变体B及黄色变体A。分子式为C20H12O5，分子量为332.31。B为红色带绿色荧光的结晶粉末。熔点314～316*C(分解)。溶于热醇、热苯胺、热丙酮、热甲酸，稍溶于水、醇、醚、乙酸，不溶于石油醚。A为黄色无定形粉末熔点314～316℃。
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素酶的测定实验
实验方法原理荧光素 4-单氧酶（ATP-水解）提取于萤火虫，Photinus Pyralis。荧光素＋ATP＋O2→氧和虫荧光素＋PPi＋H2O＋光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相关的式中，H 是 Planck 常量；v 是发射光的频率。当 ATP 浓度非常低（［ATP］＜
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
什么是双荧光素酶
荧光素酶（Luciferase）是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
荧光素钠的检查方法
碱度取本品0.20g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为7.0~9.0有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定溶剂乙腈水(15:85)。供试品溶液取本品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置200m量瓶中,