D荧光素钾盐及D荧光素使用中的常见问题
1、D-荧光素适合做哪些实验? D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素,作为Luciferase的作用底物,常用于以下实验:报告基因分析2. In vivo imaging (动物活体成像)3. In vitro imaging (细胞体外分析)4. ATP测定5. 其它luciferase及其基因相关的分析和研究工作2、D-荧光素应用于活体成像的基本原理 细胞中D-荧光素酶参与的化学发光反应遵守酶促反应的基本原理,在底物D-荧光素钾过量的情况下,反应产生的光子数(发光量)与细胞中的D-荧光素酶的量成正相关,从而可以推算出细胞的数量。3、D-荧光素钾盐溶液的稳定性 D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5(发生水解作用)或>7.5(发生消旋化作用,D型转化为L型)的情况下,D-荧光素......阅读全文
荧光素酶互补(Luc)实验
【导入】基于荧光素酶(Luciferase)的发光原理,形成了双荧光素酶报告基因检测系统。该系统包括萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海参荧光素酶(Renilla luciferase)。两者可与各自的底物发生氧化作用产生生物荧光,产生的荧光值即表示两种酶的表达量多少。图片来源
荧光素钠的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约25mg,精密称定,置50m1量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取荧光素钠对照品约25mg,精密称定,置5oml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置00ml
免疫荧光技术的常见荧光素的特性介绍
常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:紫红色粉末,吸收550nm,发射光620nm,橙红色荧光。4)镧系:Eu、Tb5)
分子荧光光度法测定二氯荧光素
分子荧光光度法测定二氯荧光素实验实验中修改部分一、实验目的:1、(书) 2、掌握荧光分光光度计的结构及基本使用方法 3、熟悉荧光分光光度计的应用二、方法原理:(书)三、仪器和试剂:仪器:Cary/Eclipse荧光分光光度计。该仪器使用氙弧灯作为激发光源。在190
关于荧光素免疫荧光层析技术的简介
荧光素是指具有荧光特性的有机染料。1942年Coons等首次报道了异氰酸荧光素标记抗体用于检测鼠组织切片中肺炎球菌抗原分布的研究,由此出了免疫荧光技术。后来,为了改进异氰酸荧光素的性能,Ruggas等合成了性质稳定、毒性较低的异硫氰酸荧光素。自Marshall等改良了荧光抗体标记技术后,荧光免疫
荧光素酶和腔肠素Coelenterazine的选择及使用
荧光素酶 自然界中的荧光素酶:是自然界中能够产生荧光的酶的系统,如发光真菌,发光海星,发光鱼,发光节虫,发光甲虫等。 萤火虫荧光素酶:目前常用的萤火虫荧光素酶来源于北美萤火虫(Photinus pyralis),是一个61KDa的单体酶,无需表达后修饰,直接具有完全酶活性,反应需要底物荧光素以及
双荧光素酶报道系统详解
一、概述报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 一般的,把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。在基因表达调控的研究中,
简述荧光素钠的特性数据
1. 性状:未确定 2. 密度(g/ cm3,25/4℃):1.601 3. 相对蒸汽密度(g/cm3,空气=1):未确定 4. 熔点(ºC):320 5. 沸点(ºC,常压):未确定 6. 沸点(ºC,8kPa):未确定 7. 折射率:未确定 8. 闪点(ºC):未确定 9.
荧光素钠的基本性状
本品为橙红色粉末或略带金属光泽的块状物,研细后为橙红色粉末;无臭;极具引湿性本品在水中易溶,在乙醇中略溶。
荧光素的毒理学数据
急性毒性大鼠腹腔LDLo: 600 mg/kg小鼠静脉LC50:300 mg/kg小鼠LCLo:600 mg/kg兔子静脉LDLo;300 mg/kg豚鼠LDLo;400 mg/kg。致突变性DNA加合物检测系统:细菌—大肠杆菌:15umol/L
双荧光素酶报道系统详解
一、概述报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 一般的,把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。在基因表达调控的研究中,
双荧光素酶报道系统详解
一、概述报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 一般的,把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。在基因表达调控的研究中,
荧光素的毒理学数据
急性毒性大鼠腹腔LDLo: 600 mg/kg小鼠静脉LC50:300 mg/kg小鼠LCLo:600 mg/kg兔子静脉LDLo;300 mg/kg豚鼠LDLo;400 mg/kg。致突变性DNA加合物检测系统:细菌—大肠杆菌:15umol/L
荧光素钠的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,点于滤纸上,即生成黄色斑点,趁湿置溴蒸气中,1分钟后再使与氨蒸气接触,斑点即变为深粉红色(2)本品的水溶液显强烈的荧光,用大量的水稀释后仍极明显;但加酸使成酸性后,荧光即消失;再加碱使成碱性,荧光又显出。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集2
异硫氰酸荧光素的功能介绍
异硫氰酸荧光橙红,异硫氰酸荧光黄,异硫氰酸荧光红,异硫氰酸荧光素异构体I,5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末,有吸湿性,是一种生化试剂,也是医学诊断药物,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
荧光素FITC标记抗体的方法
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般zui多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FI
双荧光素酶报道系统详解
一、概述报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 一般的,把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。在基因表达调控的研究中,
关于荧光素酶的基本介绍
萤光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyrali'的萤火虫体内的萤光素酶,萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期,这一现象被认为是发展生物分
简述荧光素钠的基本用途
1. 吸附指示剂。氧化还原指示剂。荧光光度分析硫离子。滴定氯、溴和碘。荧光素是发光物质的基质。使许多生物具有荧光的物质。它与ATP形成复合物(荧光素腺苷),然后再与荧光酶(1uciferase)结合。氧化过程中激活的荧光素发光。整个反应用作活的生物的检出或对很低程度的细菌污染作定量分析。例如用荧
荧光素钠的鉴别方法
(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,点于滤纸上,即生成黄色斑点,趁湿置溴蒸气中,1分钟后再使与氨蒸气接触,斑点即变为深粉红色(2)本品的水溶液显强烈的荧光,用大量的水稀释后仍极明显;但加酸使成酸性后,荧光即消失;再加碱使成碱性,荧光又显出。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集273
双荧光素酶报道系统详解
一、概述报告基因 (reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 一般的,把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。在基因表达调控的研究中,
关于荧光素钠的基本介绍
荧光素钠是一种有机化合物,分子式为C20H10Na2O5,橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光,酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;最大吸收波长(水)493.5nm。
荧光素酶的种类以及应用
在细胞和基因的微观世界中研究探索,遗传报告基因是非常有用的"可视化和量化"工具,具有广泛的应用。荧光素酶(萤光素酶)以出色的灵敏度、使用方便、可以定量检测而成为理想的报告基因。荧光素酶不是特定的分子,是一类中能催化产生生物发光的酶的统称,不同来源的荧光素酶各有特点,可催化底物发出不同颜色的光,有的还
抗生素还能带荧光?新型荧光抗生素让耐药菌无处可逃!
要更好地理解多重耐药(MDR)细菌如何逃避新型抗生素,需要更好地了解抗生素的化学生物作用。 这就需要使用新的工具和技术来提高我们对细菌与抗生素如何反应的认识,理想情况下是在细胞中实时选择性地研究细菌生长,分裂,代谢和对抗生素的反应。新型荧光抗生素或许会帮助我们解决这个问题。 抗生素在现代医学
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量.(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量.(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量.(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量.(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光
质粒的荧光会干扰双荧光素酶的测定么
不会。在进行质粒的荧光的时候,是不会干扰双荧光素酶的测定的。双荧光素酶通常是指萤火虫荧光素酶和海肾荧光素。其中荧火虫荧光素是从甲虫中分离得到。