为什么要做细胞STR鉴定?
您是否有过这样的经历…… 在科研工作结束之际,被你所投稿的杂志要求提供细胞STR鉴定报告,而此时你研究中使用的细胞是否被污染,将决定你几个月甚至长达几年科研工作的成败。您又是否有过这样的经历…… 新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么?没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。如果你是等待毕业的学生,等待你的将是延期毕业。细胞系被错误识别不仅会浪费时间和金钱,导致结果前后不一或不可重复,文献被退回,还可能对人类健康产生潜在的威胁。药物、疫苗和其它生物药物都是以实验室的研究发现为基础而产生的,往往都是跟细胞培养相关。基于误导性的或虚假的数据而制造的药物产品将会导致该药品全面投产的延迟,同时还推迟了针对多种疾病的有效治疗手段的推出。研发治疗......阅读全文
小鼠细胞鉴定
STR分型已作为成熟的金标方法用于人源细胞株鉴定,但在小鼠源细胞株鉴定方面,国内则缺乏相关STR鉴定试剂盒;而像IJC等外文期刊已经有条件的要求作者对小鼠源细胞进行鉴定。为满足各位老师对小鼠源细胞株鉴定的迫切需求,苏州鉴达自行研发18位点小鼠源细胞株鉴定试剂盒,正式开启小鼠源细胞株STR鉴定服务。经
细胞系错误鉴定:终结的开始(三)
交叉污染检测许多方法已被用来检测交叉污染,包括同工酶分析、核型分析、人类白细胞抗原(HLA)分型,免疫分型和DNA指纹识别。这些方法都可以鉴别出某一种细胞系,但是分辨能力各不一样。然而,这些方法在不同实验室所得到的数据却不尽相同,以致没有任何一种方法可以用来建立一个标准参考数据库。许多实验室利用ST
细胞系的-DNA-STR-谱_用SGM-Plus®进行扩增
实验材料SGM Plus® PCR 混合物的各种成分试剂、试剂盒纯无菌水仪器、耗材热循环仪实验步骤1. 参照 ABI 的操作步骤,为待扩增样品准备足量的混合物,每个样品管包含:(a) AMPF/STR®PCR 反应混合物 21 μl(b) AMPF/STR®SGM Plus®引物一套 11 μl(c
IJC投稿指南中细胞株鉴定(Cell-Line-Authentication)-的相关政策及解读
1967年Stanley Gartler发现人正常肝细胞(Chang liver)、人喉癌细胞(Hep-2)和人口腔癌细胞(KB)等多种细胞株均已被HELA污染,从那开始,细胞株错误标识与交叉污染的问题在科学界就一直存在。2007年前后,少数的权威机构及国外期刊才真正开始重视这个问题,大家逐渐达成共
ICLAC关于细胞鉴定(Cell-Line-Authentication)的指南与建议
国际细胞系认证委员会 (International Cell Line Authentication Committee, ICLAC)成立于2012年。它的成立是为了帮助学术界发现更多的错误识别/被污染的细胞进而避免在研究实验中使用;同时进一步提高科学家们的细胞鉴定意识以及推动细胞株鉴
细胞鉴定(Cell-Line-Authentication)-FAQs
1. 什么是细胞株鉴定?答:细胞株鉴定是对科研实验中所使用的细胞株进行身份鉴定的过程。进行细胞株鉴定是为了确保细胞株的身份是正确的、没有被其他细胞污染。如果细胞株有问题,就会影响实验结果的有效性。2. 为什么细胞株鉴定非常重要?答:细胞株鉴定对于科研实验来说十分重要。因为使用错误识别 (miside
怎样鉴定细胞凋亡
细胞凋亡的检测细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1 光学显微镜和
原代细胞鉴定技术
PriCells-原代细胞鉴定技术 一、形态学鉴定1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2. 细胞染色检查 :a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中,加细胞悬液后培养;b) 待细胞长满玻片后取出,用PBS清洗,之后放于载玻片上,待其自然干燥;c) 用PBS/甲醇(1:1)固定15分钟;d) 弃固定
植物细胞死活鉴定
1、 用质壁分离法鉴定细胞死活 (1) 原理 活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显,活细胞的原生质具有分别透性;而死细胞则为通透性。分别透性是质壁分离的先决条件,因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的则说明是死的。 (2) 仪器药品及材料 洋葱及其它植物 材
细胞系错误鉴定:终结的开始
2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文
STR分型检测技术介绍
STR(short tandem repeat,短片段重复序列)广泛存在于人类及哺乳动物的基因组中,具有高度多态性,它们一般由2-6个碱基构成一个核心序列,核心序列串联重复排列,由核心序列重复数目的变化产生长度多态性。对于一个特定的个体,染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的,而对于不同的
什么是ystr技术
y-str 是 用于 司法方面的 基因检测 技术,用于 测定某人是否 含 某种 特定的 Y 染色体 片段,(哺乳动物的Y染色体中含有的SRY片段只在雄性后代中传递),从而可 知 此人是否 属 某特定家族。也可用于家族历史的研究。str -- short tandem repeat 的3个首字母。y
什么是STR分型检测?
STR分型检测(short tandem repeat)是一种检测技术。主要用于检测人类及哺乳动物的基因组。
如何鉴定细胞的状态
细胞死亡是细胞衰老的结果,是细胞生命现象的终止。包括急性死亡(细胞坏 死)和程序化死亡(细胞凋亡)。细胞死亡最显著的现象,是原生质的凝固。事 实上细胞死亡是一个渐进过程,要决定一个细胞何时已死亡是较因难的。除非用 固定液等人为因素瞬间使其死亡。那么,怎样鉴定一个细胞是否死亡了呢?通常 采用活体染色法
干细胞鉴定和分离
干细胞鉴定干细胞的功能是明确的。因此,分离和表征这种独立的细胞群体成为一项具有挑战性的任务。胚胎干细胞(ES)是植入前胚胎的内细胞群体,属于多能干细胞群体。干细胞研究主要有两种技术:一种是在体外成功培养人类胚胎干细胞。另一个重大突破是成人干细胞的侧向分化。干细胞的分离理想的分离干细胞群体应在体内确定
皮肤干细胞的鉴定
利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初,一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现,在表皮基底细胞定向分化时,它会失去其对基底膜蛋白的黏附性,而这种黏附性是受细胞表面受体-整合素家族调控的。 整合素为异源双聚体,包括α和β两种亚基。在基底层细胞定向分化过程中,
干细胞的鉴定实验
透 射 电 镜 样 品 制 备 技 术为了满足透射电镜观察的要求,超薄切片必须做到以下几点:①切片能够耐受电子 束 的照射,在热和高真空条件下有一定的稳定性。②细胞的超微结构保存良好,尽量减少人工假象。③ 切 片 厚 度 一 般 在 60〜80nm 为 宜 。切片太薄可得到较高的分辨率,但
细胞活力的鉴定方法
染色排除法(最常用) 台盼蓝法:死细胞染成蓝色,活细胞不着色 苯胺黑法:死细胞染成黑色,活细胞不着色 伊红Y法: 荧光排除法: 生活力强的细胞能发出强烈的黄绿色荧光;生活力弱的细胞发出荧光也较弱;死亡细胞无荧光。 细胞内酶与特定试剂的显色反应: MTT比色实验:琥珀酸脱氢酶可使MT
母系遗传关系是怎样鉴定的?|-DNA亲子鉴定最全详解
亲子鉴定(paternity testing)是利用生物学的理论和技术,判断个体间是否存在亲生关系的鉴定技术。在影视剧和日常生活中,我们看到、听说的亲子鉴定往往是用来鉴定“父-子/女”关系,但亲子鉴定同样可以鉴定“母-子女”关系、兄弟姐妹关系以及其他亲属关系,原理类似,可靠度随具体情况有所变化。
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(含STR)mc3t3-e1细胞怎么养?
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)怎么养细胞中文名称:小鼠胚胎成骨细胞前体细胞细胞形态:成纤维细胞样细胞特性:贴壁培养条件:DMEM+10% FBS规格:T25/ml温度:37°C空气条件:5% CO2,95% AIR培养步骤:1、吸走用于培养基,加入 3-5mL PBS 后轻轻晃动培养瓶
成体干细胞的鉴定方法
1)利用分子标记在活体组织中对细胞进行标记,然后确定它们所产生的特定细胞类型。2)将细胞从活体动物上分离出来,在对其进行细胞培养的过程中进行标记,之后将细胞移植入另一个动物体内,观察该细胞是否可以再生其来源组织。3)分离细胞,进行细胞培养,并对其分化进行控制,通常采用加入生长因子或向细胞内引入新基因
如何鉴定细胞的转染效率
通常是带上一个报告基因,比如绿色荧光蛋白,然后在镜下观察看发光的和不发光的细胞比
什么是细胞系鉴定?
所谓细胞系鉴定即通过STR(短串联重复)图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后,细胞系可以通过定期的检测,以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。
鉴定植物细胞的死活
【实验目的】学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活 【实验原理】活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是通透性的变化最为明显。活细胞的原生质具有选择透过性;而死细胞则为全透性。选择透过性是质壁分离的先决条件。因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的细胞则说明是死的。 死活细胞
胚胎干细胞的鉴定
胚胎干细胞可以通过细胞集落或细胞本身的形态初步鉴定;除此之外,还可以从分子标记和分化潜能等两方面对胚胎干细胞进行鉴定。各基因的表达情况随细胞不同而异。因此,可以用一些在细胞中特异性表达的蛋白质对胚胎干细胞进行鉴定。上述特异性表达的蛋白质又分为两种类型:细胞内的蛋白质以及细胞表面特异性的蛋白质(细胞表
成体干细胞的鉴定方法
科学家尚未就成体干细胞的鉴定标准达成一致,然而,经常被采用的鉴定方法包括:1)利用分子标记在活体组织中对细胞进行标记,然后确定它们所产生的特定细胞类型。2)将细胞从活体动物上分离出来,在对其进行细胞培养的过程中进行标记,之后将细胞移植入另一个动物体内,观察该细胞是否可以再生其来源组织。3)分离细胞,
为什么要进行细胞系鉴定?
首先进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国 ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得来。据估计,15-20%的实验室,实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系,或者与其它细胞系发
如何识破各种污染拯救细胞?(二)
01. 即用型细胞培养中支原体检测PCR试剂盒 检测结果如图: 大家可自行根据检测结果进行对比。02. 支原体处理试剂 03. 支原体预防喷雾 支原体检测/处理/预防全套解决方案 表3. 产品列表 中文名称 货号
一文了解STR分型分析
短串联重复序列(short tandem repeat, STR)是核心序列为2-6个碱基的短串联重复结构。20世纪90年代初,STR基因座首次作为一种重要的遗传标记在人类亲权鉴定中被使用(Edwards et al.,1992;Edwards et al.1991)。 细胞STR分型(cel
如何知道细胞系是否发生交叉污染了?
如果存在细胞系之间发生交叉污染,而且鉴定用的细胞可能有两种以上的细胞系时,那么在进行STR位点检测的时候,多个位点会出现两个以上的峰。峰高值表示该等位基因的信号强度,理论上峰值与样本的DNA浓度有直接的关系。因此,存在交叉污染的混合细胞系中,其中一个位点中某些峰会明显高于其他的峰,其中大峰是属于混合