国际ZLRFect小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

介绍 RFect小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。RFect可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株、肿瘤细胞株等。目前,无论国外还是国内,转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI),这两种成分都具有很大的细胞毒性,并且转染效果不好。RFect采用新型的动物源性的纳米材料,毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。与其它品牌的小核酸转染试剂相比,RFect的细胞转染阳性率一般在90%以上,Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上,而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过70%,Lamin A/C 基因抑制效率不超过75%。RFect细胞毒性很低,转染细胞死亡率不......阅读全文

国际ZLRFect小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

介绍 RFect小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。RFect可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株

RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

RFectPM原代细胞小核酸转染试剂(RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂)                                                       货    号:BIOG-11014: 0.5ml          BIOG-11015

单核细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

RFectMN单核细胞小核酸转染试剂                                                        货    号:BIOG-11024: 0.5ml       BIOG-11025: 1.0ml            BIOG-11026: 1.5m

如何优化GenMuteTM转染试剂,提高siRNA/DNA共转染效率?

GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。siRNA/DNA共转染时,siRNA的最佳浓度范围是0.5ηM到10ηM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”,切勿使用超过20ηM的siRNA。以24孔板为例,如下步骤将对如何优

转染试剂:Roche

     转染试剂:Roche[选购宝典]现转染市场多个新产品涌现而出,一些旧产品更弦易主。一提起罗氏的转染试剂,大家肯定立马想到Fugene 6/HD。即使Fugene 6/HD不在手,罗氏也毫不畏惧,因为它集合二十年的转染经验,推出了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP转染试

各种转染试剂的中文转染方法

FuGENE6(Roche)转染步骤: 转染前一天将细胞分至培养板,转染当天细胞应50-80%融合。将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。 将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。 1. 在PCR管中加入不含血

VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明

一、性能参数产品名称:VigeneFection 简称“VGF”     产品货号: FH880806浓度:1μg/μl                          推荐使用浓度:1μg-10μg/ml规格:50μl (赠送)                    保存条件:2-8℃ ,切勿放

siRNA的转染

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种: 1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至

siRNA-转染程序

 A.siRNA转染的方法   哺乳动物转染的常见方法有:磷酸钙共沉淀、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、机械法(例如,显微注射和基因枪)、阳离子脂质体试剂,其中阳离子脂质体试剂转染法是目前最常用的转染方法。应用脂质体型转染试剂进行转染需要注重的几个方面:1.       转染试剂的用

siRNA的转染

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种: 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙,RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转

原代细胞转染小核酸siRNA等操作步骤和注意事项

原代细胞相对普通传代细胞要难转染,但用对了试剂一样可以拥有很高的转染效率和实验结果,下面以RFect为例,简单介绍下原代细胞转染的操作步骤和注意事项。原代细胞转染操作步骤(以24孔培养板为例):A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔500 μl培养基(不可加抗生素),使细胞在转染时密度在30-50

siRNA体外转染——GenMuteTM-siRNA体外转染的优化

GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例,如下步

siRNA的转染方法

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至关

siRNA的转染方法

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞 中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞 膜并通过胞饮进入目的细胞 的细胞 质。沉淀物的大小和质量对

如何优化PolyJet转染试剂?

我们使用PolyJet DNA转染试剂转染表皮细胞及Raw267.4细胞非常有效,并且毒性很小。对于如何更好的优化PolyJet转染试剂,我乐意分享以下几点:1、DNA的质与量。DNA的纯度对于转染实验至关重要。由E Coli制备的DNA,A260/280必须达到1.80甚至更高。对于6孔板,通常每

关于转染试剂的简介

  哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。  将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类,即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注射、电穿孔、脂质体介导的转染,以及最近出现的以高分子聚合物为载体的基因传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感染

RNA转染试剂的对比

近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下:实验方法转染试剂:Turbofect transfection reage

VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明书

  一、性能参数   产品名称:VigeneFection 简称“VGF” 产品货号: FH880806   浓度:1μg/μl 推荐使用浓度:1μg-10μg/ml   规格:50μl (赠送) 保存条件:2-8℃ ,切勿放-20℃   有效期至: 18个月 运输条件:常温运输   

细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞

细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物

细胞转染率低-转染试剂要全背锅吗?

细胞转染低都是PCR试剂的问题吗?PCR纯度不够确实会有这样的问题,所以选择PCR试剂很重要 主要还是以下几点影响:1. 其他微生物污染您觉得您养的细胞 ,不,不,不 ,可能您只知道您养的是细胞,你不知道的是您的细胞可能背着您养了一群小三,比如支原体,病毒,黑胶虫等等,特别是支原体它可以更改细胞的特

细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞

细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物

DNA体外转染试剂_如何准备转染所需的质粒DNA

转染效率受到诸多因素的影响,除了细胞、培养基和载体等影响因素外,另外一项非常重要的因素便是DNA的质量。为了比较不同厂家的转染效率,我们分别从三家不同的供应商购买了质粒制备试剂盒来制备pEGFP-N3质粒DNA,并通过不同的方法将制备的pEGFP-N3质粒转运至NIH-3T3细胞。pEGFP-N3质

覆盖更宽广的领域转染试剂

Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Roche新推出FuGENE HD转染试

覆盖更宽广的领域转染试剂

FuGENE HD 转染试剂:覆盖更宽广的领域 Roche的FuGENE 6 转染试剂低毒高效、使用方便,应用细胞株已达500多种,可谓有口皆碑——即使近10年来Roche在试剂领域甚为低调甚少宣传,一支独秀的FuGENE 6 依然让Roche保持在转染领域数一数二的地位。经过10年的沉积,如今Ro

RNA实验方案和应用(二)

miRNA 模拟物是化学合成的,双链RNA分子(通常长度为18–24个核苷酸),通过转染到细胞中,模拟成熟的内源性miRNA分子。miRNA抑制剂是单链(通常长度为21–25个核苷酸),经过修饰的RNA分子,通过转染到细胞中,特异性的抑制miRNA的功能。模拟物和抑制剂包含一些化学修饰,以便提高活性

hepg2细胞siRNA转染条件

之前我们用过Lipo,说明书上要求细胞的密度在70%左右,同时在转染后的4-6小时注意要换培养液,后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent,细胞密度在45%左右 ,设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度最好做2个复孔,一

RNAi及siRNA转染相关实验攻略

RNAi 是一种高效的特异性强的基因表达抑制,应用RNAi生物学机制进行基因功能研究已经成为一种创新性的新方法,人们第一次可以如此快速和方便地抑制细胞中特定基因的表达水平,从而用于分析特定基因在细胞中的功能。RNAi 技术还为新药开发、疾病治疗提供了创新性的方法和途径,有着极其广阔的应用前景。转染是

实时荧光定量PCR技术

通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析1 导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRN

关于转染试剂的基本信息介绍

  转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具,而且是基因治疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、

关于转染试剂的历史背景介绍

  已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3