抗体常见问题
ABGENT抗体是通过什么动物来制备的?我们的单克隆抗体大多是通过BALB/c小鼠制备的,多克隆抗体大多是通过新西兰兔制备的。客户抗体定制服务也主要是使用这两种动物Western Blot检测中你们是如何区分特异性目标条带的?多克隆抗体的Western Blot检测结果通常会出现多条带,我们通过对免疫后血清和免疫前血清的检测结果进行比较:在抗体和免疫后血清中都出现而免疫前血清中未出现,且符合预测分子量的条带,就可以认为是特异性的目标条带。为什么我买的抗体Western Blot检测没有阳性结果?在ABGENT的Western Blot实验流程中有一些细节是避免背景深和没有结果的关键。① 不要过度清洗膜,膜的清洗使用含有0.1% Tween-20的TBS,3次,每次5分钟即可。过度的清洗可能会把一抗洗掉。合适的清洗条件能够很好的消除背景并得到最好的结果。② 不要过长时间的封闭。过度的封闭会导致信号减弱。③ 请确认您所要检测的抗原是......阅读全文
抗体结构
抗体(antibody,Ab)是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链),含450?550个氨基酸残基,相对分子质量在55000?700
Science专题:癌症抗体,艾滋病抗体
早在一百多年前,Paul Ehrlich就创造出“magische Kugel(魔球)”,“magic bullet”这样的短语,科学家们多年以来也一直努力不懈的进行研究,希望能研发出对抗从癌症到克罗恩病的疾病靶向治疗方法。终于在四十年前,一项技术的诞生,令这一期望不再遥不可及,这就是杂交瘤
抗原抗体反应抗体基因的改造简介
将鼠源抗体的V区基因与人源抗体C区基因重组,获得的嵌合抗体(chimericalantibody),可保留鼠抗体对抗原的高亲和性,又减弱鼠源抗体对人的免疫原性,提高治疗性抗体的效果。 重组的嵌合抗体基因转化骨髓瘤细胞或中国地鼠卵细胞(CH0),可在其中表达。为了进一步地消除鼠抗体V区框架区(F
REAfinity重组基因工程抗体REA抗体
REAfinity流式抗体,即Recombinant Engineered Antibody(重组基因工程改造抗体),经基因工程改造,对Fc段序列进行点突变,使其不会对FcR受体产生非特异性的结合。序列优化和突变后,使得REA抗体与传统大鼠、小鼠单克隆抗体相比优势明显。 1 |
IgM抗体和IgG抗体的区别是?
IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生
单克隆抗体技术:抗体检测
用检测抗体的方法从杂交细胞中筛选出生产指定抗体的杂交株是很重要的。检测抗体的方法很多,从沉淀反应到放射免疫测定。由于细胞培养液中的抗体浓度通常是很低的,而且传统的检测方法多是以多价抗原与多克隆抗血清相反应。杂交瘤产生的抗体则是单克隆的,所以并不是每项方法都能适用。一定要选择敏感的、快速的、一次又能检
关于多克隆抗体的抗体鉴定介绍
抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼
概述抗原抗体反应抗体催化的原理
1986年,由P.G.schultz和R.A.Lerner分别领导的两个小组同时证明抗体具有催化活性。针对一个四面体带电荷的磷酸酯半抗原产生的抗体,能有选择性地催化相应的碳酸脂和羧酸脂的水解反应。他们将这种有催化活性的抗体称为催化性抗体(catalytic antibody),又称抗体酶(abo
抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(三)
单克隆抗体杂交瘤技术基本流程单克隆抗体的制备步骤1、免疫原的制备;2、免疫动物 ;选择体重18-20g BALB/C 雌性小鼠用于免疫。50-100ug抗原/只与等体积福氏完全佐剂混合,充分乳化后,经背腹部皮下多点注射及腹腔注射相结合的方式免疫,总的免疫体积0.2-0.3ml每只;间隔3周,取与
抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(一)
抗体的概念动物机体受到抗原物质的刺激后, 由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的, 能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白, 这类免疫球蛋白称为抗体(Antibody,简称 Ab)。免疫球蛋白免疫球蛋白(Immunogolobulin, 简称Ig) 是指存在于人和动物血液(血清)、组织液及其它外分泌液
抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(二)
构成抗原的条件:一、异物性,又称为异质性或异源性正常情况下,自身组织或细胞对机体本身无免疫原性。而异种或异体物质,以及化学组成或结构发生改变的和由于某种因素而暴露的在胚胎期与免疫系统隔绝的自身物质则为良好的抗原。二、理化性状大分子物质抗原的免疫原性与其分子大小有直接关系:1、免疫原性良好的物质分子量
关于多克隆抗体的抗体制备介绍
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤: 1、制备抗原。 2、选择实验动物。 3、动物免疫。 4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。 6、纯化出抗体。 7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。 具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。 (
ANA抗体谱分抗体临床意义
高滴度的抗U1-nRNP抗体是混合性结缔组织病(MCTD,夏普综合征)的标志,阳性率为95-100%,抗体滴度与疾病活动性相关。在30-40%的系统性红斑狼疮患者中也可检出抗U1-nRNP抗体,但几乎总伴有抗Sm抗体。 抗Sm抗体是系统性红斑狼疮的特异性抗体,与抗dsDNA抗体一起
人源化抗体嵌合抗体的基本介绍
嵌合抗体是利用DNA重组技术,将异源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转化哺乳动物细胞表达出嵌合抗体,这样表达的抗体分子中轻重链的V区是异源的,而C区是人源的,这样整个抗体分子的近2/3部分都是人源的。这样产生的抗体,减少了异源性抗体的免疫原性,同时保留了亲本抗体特异性结
有冷自身抗体干扰的抗体鉴定试验
一、原理:冷凝集综合症的患者血清中或红细胞上存在冷凝集素,为IgM类完全抗体,在低温时可使自身(或O型、同型)红细胞发生凝集。凝集反应的高峰在0~4℃,当温度回升到37℃时凝集消失或减弱。如血清中同时存在同种抗体时冷自身抗体会干扰同种抗体的鉴定,做以下处理后可以进行同种抗体的鉴定。二、前处理:冷自身
His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标
抗环瓜氨酸肽抗体(CCP抗体)检测
类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病。由于一方面自身免疫的病理机制决定了这类疾病的疑难和复杂;另一方面由于这类疾病累及多个系统和器官,临床表现较为复杂。所以RA以往在临床上更多的表现为“疑难杂症”。随着自身免疫性疾病基础研究和实验学科的进步,以及众多先进的临床检测手段的采用,类风湿关节炎的临床诊
自身抗体检测项目介绍抗Sa抗体
抗Sa抗体介绍: 抗Sa抗体是Despres等于1994年报告的出现于类风湿性关节炎患者血清中的一种自身抗体。靶抗原(Sa抗原)最初发现于人脾,之后又在人胎盘、类风湿滑膜翳中发现,可能是人体的正常组织成分。用免疫印迹技术分析,人脾中Sa抗原分子量为50kD,而人胎盘Sa抗原为50和55kD两种。抗S
第一抗体与第二抗体的区别
第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质
HLA抗原和抗体的概述/抗原/HLA抗体
1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座位,至少含4个与移植有关的基因区:即HLA-A,HLA-B,HLA-C和HLA-D.HLA-D又分为
流式抗体(荧光抗体)细胞染色步骤与注意
染色缓冲液(BSA)的配制:PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱备用。准备单细胞悬液:淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。用冰染色缓冲液洗细胞2次,离心细胞,用冰染色缓冲液重悬细胞,使终浓度为2×107细胞/ml。各取50ul(106细胞)细胞悬液到2个圆底的Ep管中。根据
抗体标记方法
Biotinylation of Antibody ( Contributed by Nanci Donacki) Antibody labeling (House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers. Coupling
什么是抗体?
抗体是机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。人类免疫球蛋白有五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。 含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 免疫球蛋白(Ig)是机体受抗原刺激后产生的,其主要作用是与抗原起免疫反应,
多克隆抗体
Making Antibody· Production of Polyclonal Antibody in Rabbit (Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,
抗体的概念
抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征
抗体的介绍
抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。
抗体的保存
腹水:腹水重组后可加入少量叠氮纳等来阻止细菌生长。腹水应当冻存。单抗最好能够小包装保存以避免反复冻融。若要保存较长时间,则不要在4℃。和血清不同,腹水中含有蛋白酶,会使抗体效价下降,因此加入蛋白酶抑制剂可以选择。纯IgG:不要稀释抗体后来保存,除非加入羊血清,BSA等后。IgG会和玻璃,塑料等粘附。
Rh系统抗体
Rh系统抗体是检验主管技师考试要求掌握的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 Rh抗体中,除偶尔可见天然的抗E、抗CW抗体外,其余各种Rh抗原的抗体多系输血或妊娠时,由外来红细胞免疫刺激后产生。这些抗体均为IgG,但在免疫应答的早期,也可有IgM成分。 D抗原是非AB0红细胞抗
抗心肌抗体
心脏黏液瘤,心肌梗死后心包炎,扩张型心肌病,新生儿心肌炎,心肌炎,抗体,小儿风湿热