磷酸化蛋白做WB小妙招

1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂;2、加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间,因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分;3、选择优质的磷酸化抗体,所以要选好的厂商,Novus为全球高端抗体品牌,其磷酸化抗体效果不错;4、抗体的稀释倍数要优化,可以根据厂商建议进行优化;5、用含5% BSA的TBST稀释抗体,不要用常见的5% -Fat Milk的TBST;6、磷酸化蛋白WB时背景也往往较深,所以压片时间要适当,不能太长或过短,太长则背景太深盖住想要的那条条带,时间过短则可能没有条带或者条带太浅;7、磷酸化蛋白WB时,用TBST洗时也要注意一下,摇床的转速不要太快,洗的时间不要太长,孵育一抗和二抗之后分别洗5min 3次即可,宁愿背景深一些,总比做不出来强得多.另外,洗的时候,最好不要把几张膜叠在一起洗。 ......阅读全文

选购多功能真空滤油机的“小妙招”

    随着市场需求增长,多功能真空滤油机行业得到高度重视,发展前景被看好。伴着滤油机市场需求的扩大,使得行业之间的竞争加剧,市场呈现五花八门的滤油设备,那么,用户该如何选购适合自己的滤油机呢?    据了解,多功能真空滤油机是利用重力、压力、离心、真空蒸馏等技术方法去除不纯净油中机械杂质、氧化副产

避免ELISA试剂盒显色淡的小妙招

在实验室工作的科研人员们在做ELISA实验的时候,难免会遇到elisa试剂盒显色淡灵敏度偏低的问题,其实这些问题我们只要稍微注意一点是可以避免的,今天就为大家整理了一些避免ELISA试剂盒显色淡及灵敏度偏低的操作方法,希望能对您有所帮助!避免显色淡及灵敏度偏低的方法:A、尽量缩短运输时间,夏季应放冰

分光光度计的检验小妙招

  1.波长准确度的检验:  分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。  检验波长准确度最简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收

如何炒白菜不出水?生活小妙招交给你

炒白菜,不要直接下油锅,掌握2个妙招,白菜爽脆入味,还不出水冬天,在北方人的餐桌上,是少不了白菜的,我们家最近真的隔三岔五吃。我买的是8毛钱一斤,看上去还挺不错的,买了50斤带回家,准备留着最近慢慢吃了。这两天还下雪,一点都不想外出买菜,囤货是最好的选择。北方人在冬天囤货最多的,肯定是大白菜,这一点

判断桑葚是否加了染色剂的小妙招

桑葚酸酸甜甜,桑椹营养丰富,可吃起来却有烦恼:牙齿和舌头会被染黑。洗后水变黑的桑椹有可能是被染色的,这是真的吗?成熟的桑葚果实里含有一种天然色素花青素,在洗桑葚的时候,很容易把桑葚的皮洗破,花青素就会流出来,造成液体发黑,这是正常现象,跟染色没有半毛钱关系。 花青素(anthocyanidins

这个简单的小妙招,或许可以预防儿童肥胖!

  宾夕法尼亚州立大学(Penn State)最近的一项研究显示,不喝水的孩子每天从含糖饮料中摄入的热量比喝水的孩子高出近100卡路里。大约五分之一的儿童属于无水儿童。  但是在纽约市公立学校进行的一项涉及100多万名学生的多年实验发现,在学校安装饮水机可以改变这种状况。有自动售货机可以增加孩子们的

反渗透纯水机的故障及维修小妙招

一、制出的纯水不达标,为什么?1.检查RO膜除滤效果,是否降低或失效。2.检查RO膜壳的纯水和废水端是否隔断或出现裂缝。3.检查RO膜橡皮圈一端是否大小合适或破损。4.检查后置活性碳作用是否有效。 二、日产水量达不到要求是何原因?1.检查是否计算有误。2.检查水泵压力是否到位(0.6Mpa)。3.检

分享超低温保存箱的保养小妙招

  随着离心机的发展,离心机相关技术都有了提升。在国家政策的支持和广大离心机企业的不断努力下,相信我国离心机行业的明天会更加美好。较之于国产离心机,进口进口微量高速离心机优势主要可体现在以下几方面。   1.市场需求继续扩大,将有更多企业进入该行业   由于化工、纺织、医药等领域持续不断的发展速

气相色谱的日常维护的10个小妙招

购买一套了气相色谱仪价格不菲,都希望使用时间能长一些,所以日常的维护和良好的使用习惯可是必不可少的,这也可以让气相色谱仪器工作正常而且能保持好的检测效果,今天小编就给大家总结10个日常维护小妙招,抛砖引玉,仅供大家日常使用的参考。一、按仪器使用说明书的规程操作这一点主要是针对新购置和安装的仪器,不仅

气相色谱的日常维护的10个小妙招

  购买一套了气相色谱仪价格不菲,都希望使用时间能长一些,所以日常的维护和良好的使用习惯可是必不可少的,这也可以让气相色谱仪器工作正常而且能保持好的检测效果,今天小编就给大家总结10个日常维护小妙招,抛砖引玉,仅供大家日常使用的参考。  一、按仪器使用说明书的规程操作   这一点主要是针对新购置和安

磷酸化蛋白-WB-做不好?文献指出了你可能忽略的原因

WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法,然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做!这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时,磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分,处理不得当时,还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多,比如封闭问题,抗体问题,或所需的磷酸化

【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提

  锐赛小课堂1222-158   一、贴壁细胞蛋白提取   A   1..将水浴锅的温度调至100℃,等水浴锅达到100℃温度后,取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。   2.将缓冲液(1Xloading buffer)置于100℃水浴锅中预热10min。   (loding buffe

使用气相色谱仪的25个小妙招(三)

(3)TCD桥电流设置大小与载气种类有关,也与热导池工作温度有关,并要考虑被分析对象对灵敏度的要求,具体请参照热导池桥电流给定曲线;

使用气相色谱仪的25个小妙招(十四)

(14)TCD载气出口及分流出口流量除了用皂膜流量计来精确测定外,还可在主机左侧外装一只6~60ml/min的玻璃转子流量计来连续监视;

使用气相色谱仪的25个小妙招(十九)

(19)为了保证FID在高灵敏度下使用时的基线稳定,气体应除去气体中微量CH(烃类)杂质;色谱柱固定相必须在略低于最高使用温度下充分老 化,从而可减少固定液流失和固定液中溶剂残留量对基线的影响;高温使用汽化室时,进样器的硅橡胶垫必须事先高温老化处理并开启隔膜清扫气路;

使用气相色谱仪的25个小妙招(二十)

(20)FID放大器屏蔽铁盒内放有干燥剂(硅胶、分子筛类),用以保持放大器输入级的高度绝缘性能。由于环境空气中水份的影响,使用一段时间 后,应更换干燥剂或将原来放在里面的干燥剂取出,在150℃下烘烤(活化)二小时再回用,这样可降低噪音,保证基线稳定性; 

超微量分光光度计的检验小妙招

  1.波长准确度的检验:   分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。   检验波长准确度简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器

使用气相色谱仪的25个小妙招(十八)

(18)FID点火后,由于基始电流的作用,点火后电压会高于原先值,高出的大小可大致判断气体净化程度和色谱柱老化的好与不好;

使用气相色谱仪的25个小妙招(十)

(10)气相色谱仪使用后关机时,必须牢记在热导池出口接头处旋上闷头螺帽,防止在切断载气后,外界空气中氧返进色谱柱和检测器系统,是为了保护色谱柱和检测器,在高温使用后,尤其要注意必须在柱箱和检测器温度降到70℃以下,才能关闭气源;

使用气相色谱仪的25个小妙招(二)

(2)热导检测器的操作必须严格遵守热导检测器先通载气后通热导恒流源的操作原则。在长期停机后重新启动操作时,应先通载气15分钟以上,然后检测器通电,以保证热导元件不被氧化或烧坏;

使用气相色谱仪的25个小妙招(十三)

(13)在采用小口径毛细柱分流进样时,用户可在分流气路中分流调节阀前的流路中自行串接一段(f3×0.5mm管,长50~60mm)活性炭(40~60目)吸附管用以吸附有机物保护分流调节阀;

在线气相色谱仪使用小妙招你是否“get”?

  在线气相色谱仪的使用灵敏度高,可检测出ppm和ppb级的组分含量;高选择性可有效地分离性质极为相近的组分;所需的试样量少,一般气样需要几毫升,液样需要几微升或几十微升;应用范围广,可分析低含量的气、液体,亦可分析高含量的气、液体,可不受组分含量的限制。我们列举了几个仪器的“使用妙招”,一起来看看

使用气相色谱仪的25个小妙招(十二)

(12)色谱柱连接用密封圈可根据不同使用温度采用不同材料,一般在200℃以下可采用硅橡胶圈,200℃~250℃以下可采用聚四氟乙烯圈,250℃以上可采用紫铜圈或柔性石墨圈;

使用气相色谱仪的25个小妙招(一)

(1)气相色谱仪使用时,务必检查一下微机控制系统机架右面下方的TCD桥电流钮子开关状态,应处在正确的位置,例如使用FID时,钮子开关应放在桥电流断开位置;否则在面板按键操作时一不小心误按TCD桥流按键,就会造成TCD热导元件的损坏;

分享盐雾试验箱喷嘴保护的几个小妙招

    盐雾腐蚀试验需要盐雾试验箱产生盐雾,其关键是试验溶液在一定压力的压缩空气下通过喷嘴喷雾而成。喷嘴的好坏直接影响到试验的成败,在制造喷嘴时对于喷嘴的孔径、弯曲角度等就有严格控制,以保证能产生符合标准的盐雾。       在实际应用中,喷嘴经常堵塞、破裂而影响试验正常进行,为此小编整理了一些小妙

解决高低温试验箱噪音我有小妙招

一、适当垫高高低温实验箱的四个角      将高低温实验箱垫高3-6厘米并调整四角平衡,使箱体底部空气对流空间增大。这样,压缩机噪音和下部其他噪音从箱体底部出来,减少了从高低温实验箱两侧及上部出来的噪音。二、管路与高低温实验箱箱体加固牢靠      要检查调整外管路与箱体之间连接加固部分是否松动,从

使用气相色谱仪的25个小妙招(十七)

(17)FID联用标准小口径毛细柱时,毛细柱可插入FID石英喷咀内孔,柱端面略低于喷咀口1~2mm为最佳,这样可保证最佳柱效;

解决高低温试验箱噪音我有小妙招

  解决高低温试验箱噪音我有小妙招:   一、适当垫高高低温实验箱的四个角    将高低温实验箱垫高3-6厘米并调整四角平衡,使箱体底部空气对流空间增大。这样,压缩机噪音和下部其他噪音从箱体底部出来,减少了从高低温实验箱两侧及上部出来的噪音。   二、管路与高低温实验箱箱体加固牢靠   

使用气相色谱仪的25个小妙招(十一)

(11)在使用气相色谱仪进样分析达一定次数后,由于色谱柱(不管是填充柱还是毛细柱),内积累吸附了一些水份或其它物质,将会影响柱效和基线稳定性,因此必须对色谱柱进行活化处理, 长期停用的柱子,在重新使用前也须活化处理。在气相色谱仪上进行活化处理的简单方法就是通高纯氮并将柱子加热恒温,氮气流量5

解决高低温试验箱噪音我有小妙招

  解决高低温试验箱噪音我有小妙招:   一、适当垫高高低温实验箱的四个角    将高低温实验箱垫高3-6厘米并调整四角平衡,使箱体底部空气对流空间增大。这样,压缩机噪音和下部其他噪音从箱体底部出来,减少了从高低温实验箱两侧及上部出来的噪音。   二、管路与高低温实验箱箱体加固牢靠