ELISA技术综述(五)

2.4 结合物的保存酶标抗体中的酶和抗体均为生物活性物质,保存不当,极易失活。高浓度的结合物较为稳 定,冰冻干燥后可在普通冰箱中保存一年左右,但冻干过程中引起活力的减低,而且使用时需经复溶,颇为不便。结合物溶液中加入等体积的甘油可在低温冰箱或普 通冰箱的冰格中较长时间保存。早期的ELISA试剂盒中的结合物一般均按以上两种形式供应,配以稀释液(见3.2.5)临用时按标明的稀释度稀释成工作 液。现在较先进的ELISA试剂盒均已用合适的缓冲液配成工作液,使用时不需再行稀释,在4-8℃保存期可达6个月。由于蛋白质浓度较低,结合物易失活, 需加入蛋白保护剂。另外再加入抗生素(例如庆大霉素)和防腐剂(HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠),以防止细菌生长。2.5 结合物的稀释液用于稀释高浓度的结合物以配成工作液。为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上,在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1......阅读全文

ELISA技术综述(五)

2.4  结合物的保存酶标抗体中的酶和抗体均为生物活性物质,保存不当,极易失活。高浓度的结合物较为稳 定,冰冻干燥后可在普通冰箱中保存一年左右,但冻干过程中引起活力的减低,而且使用时需经复溶,颇为不便。结合物溶液中加入等体积的甘油可在低温冰箱或普 通冰箱的冰格中较长时间保存。早期的ELI

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

ELISA技术综述(四)

以下简述固相载体和包被过程。1.2 包被的方式将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合 的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。这种物理吸附是非特异性的,受

ELISA技术综述(三)

以下简述固相载体和包被过程。1.2 包被的方式将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合 的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。这种物理吸附是非特异性的,受

ELISA技术综述(六)

其他内容:酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统: 一、AP底物放大系统substrate ampiification systemAP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催 化下脱氢,同时四唑

ELISA技术综述(二)

ELISA的商品化试剂盒成分和分类:在临床检验或者科研检测中,ELISA 实验通常有商品试剂盒提供。ELISA试剂盒中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的

ELISA技术综述(一)

ELISA原理ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELISA

RNAseq综述(五)

第1阶段-测序读长的比对(alignment)与组装(assembly)测序完成后,分析的起点就是数据文件,这个数据文件包含了测序计数的碱基,这些数据文件通常是以FASTQ文件的格式存在。处理这些FASTQ文件最常见的第一步操作就是将测序读长回贴到已知的转录组上(或已经注释的基因组上),将每个测序读

PCR技术综述

前言      一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有

Cell推出五篇精选衰老综述

  衰老会使器官慢慢走向死亡,这个过程由基因决定同时也受到环境的调节。目前我们对衰老的了解还很有限,不过科学家们正在紧锣密鼓地研究这个问题。饮食限制、促衰老的毒素、辅酶和激酶,人们终将完成衰老这张复杂的拼图。  最近Cell杂志以“Understanding the process of aging

DNA测序技术综述

1977年,Sanger团队完成人类历史上第一个基因组序列噬菌体X174测序,并在3年后,成为“两度”获得诺贝尔化学奖的人(前一次是1958年)。Sanger测序技术诞生,让DNA片段的测序成为现实,此后这一技术独领风骚20多年。再后来的20年里,二代测序走向成熟、三代测序崭露头角,DNA测序技术以

食品缉毒技术综述(二)

2.限制通行基质(RAM) RAM用于分析药物和农药中的杂质和代谢物,最大的优点是可以直接进样。现在用得最普遍的是Dual-mode packings吸附剂。这个吸附剂外层是亲水的吸附剂层,内层是疏水的吸附层,有机化合物留在内层。RAM-SPE用于分析人血或其他蛋白质含量高的样品。RA

食品缉毒技术综述(一)

食品、农产品安全已经成为中国最为关注的焦点话题,农药残留超标、微生物及毒素污染、重金属污染、非法食品添加剂等等,都在严重挑战着中国的食品安全检测。此外,作为食品、农产品出口贸易大国,我国频繁遭遇贸易性技术壁垒,屡屡造成巨大的经济损失。本文从检测技术的角度对我国相对薄弱的样品制备、农残多残留检测

制备薄层色谱技术综述

制备薄层色谱使用薄层色谱板进行制备分离,从混合物中提取所需要的单体。与常用的柱色谱相比,具有简单、快速与节省溶剂与人力的优点,是实验室比较常用的制备方法之一,比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三个类别。1、 制备薄层板色谱制备板:一般使用200X200mm的薄层色谱板,吸

材料表面分析技术综述

材料表面分析技术是通过分析探束或探针与材料表面发生作用产生的许多信息而研究表面的。主要分为表面形貌分析、表面组分分析和表面结构分析等几大部分,其中表面形貌分析技术有扫描电镜、透射电镜、扫描隧道显微镜、原子力显微镜等;表面组分分析技术主要有俄歇电子能谱、光电子能谱、二次离子质谱、电子探针显微分析、离子

直扩PCR技术综述

直接PCR(Direct PCR)是一种不经核酸提取而直接使用动物或植物组织等直接进行扩增的反应。在许多方面,直接PCR的工作方式类似于常规PCR。主要区别是直接PCR中使用的定制缓冲液,样本可不经过核酸抽提,直接进行PCR反应,但对于参与直接PCR反应的酶的耐受性和buffer的兼容性有相对应的要

基因诊断技术的综述

  当细胞的基因组DNA用特定的内切酶如Eco RⅠ切割时, 基因诊断凡有GAATTC的地方都被切开,得到许多长度一定但互不相等的片段,需要分析、分离的基因或DNA片段就在其中某一特定的的片段上。 然而许多长短不同的DNA片段混合在一起是很难分析的。因此首先必需将它们按大小(长短)分离开来,这可借助

拉曼光谱技术综述

   【摘要】本文从拉曼散射原理出发,介绍了拉曼技术的特征,以及拉曼技术的优势和不足,从激光技术和纳米技术出发介绍了当前拉曼技术的广泛发展和应用。综述了近年来了曼技术的主要的分析技术。涉及拉曼光谱技术的发展简史,发展现状和最新研究进展等方面。  1、拉曼光谱的发展简史  印度物理学家拉曼于1928年

ELISA技术

   ELISA   ELISA是酶联接免疫吸附剂测定 Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay 的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。   一

ELISA技术

 ELISAELISA是酶联接免疫吸附剂测定 Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay 的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。   一 原理ELISA是

ELISA原理与分类介绍(五)

3.2.3  结合物的制备 酶标记抗体的制备方法主要有两种,即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。(1)戊二醛交联法:戊二醛是一种双功能团,它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接加入酶与抗体的混合物中,反应后即得酶标记抗体。ELI

4G通信技术综述

移动通信技术已经历了三个主要发展阶段。每一代的发展都是技术的突破和观念的创新。第一代起源于20世纪80年代,主要采用模拟和频分多址(FDMA)技术。第二代(2G)起源于90年代初期,主要采用时分多址(TDMA)和码分多址(CDMA)技术。第三代移动通信系统(3G)可以提供更宽的频带,不仅传输话音,还

细胞转染(Cell-Transfection)技术综述

一、细胞转染途径转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于物理介导技术;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。1、物理介导(1)电穿

高通量筛选技术简要综述

  药物高通量筛选(HTS)技术,是发现创新药物的重要技术手段之一,已受到药学同行的极大关注。现将近年来药物高通量筛选技术的研究进展做一综述。  发展中的高通量筛选技术  高通量筛选的组合模式近年来,由于自动化技术特别是机器人的应用,在新药研究中出现了高通量筛选技术,该技术将化学、基因组研究、生物信

超声波萃取技术综述

  超声波萃取(Ultrasoundextraction,UE),亦称为超声波辅助萃取、超声波提取。是利用超声波辐射压强产生的强烈空化效应、扰动效应、高加速度、击碎和搅拌作用等多级效应,增大物质分子运动频率和速度,增加溶剂穿透力,从而加速目标成分进入溶剂,促进提取的进行。  超声波是一种弹性机械振动

食品安全检测技术综述

摘 要 目前,我国食品安全存在着巨大的隐患,情况不容乐观,三氯氰胺等恶性食品安全问题时常发生,冲击着消费者对食品生产企业的信任,随着重大食品安全案件的频频发生,我国食品检查相关部门相应的加大了管制的力度,科研所等机构在食品安全检测技术研究与开发上也加快了进程,虽然已小有成绩,但未来食品安全检测之路仍

化学发光技术(CLIA)综述

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太赫兹时域光谱与频域光谱研究综述(五)

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ELISA常见技术

   如今生物科技日益突飞猛进的时代,像ELISA试剂盒产品五花八门品牌也众多,让你目不暇接,那么我们该如何选择适合于我们科研实验用的ELISA试剂盒呢?我们来看看ELISA常见技术指南:   1、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体