溶解曲线出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光值变化的,自然就没有溶解曲线了。但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料,情况就不同了。......阅读全文

什么是realtimePCR溶解曲线

如图所示,这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读:1、随着温度的升高,DNA双链断裂;接着温度降低,到达退火温度的时候,DNA双链复性,荧光分子绑定在DNA双链上,所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度,继

qpcr不做溶解曲线可以吗

没有溶解曲线说明对应的pcr管中没有产物。qpcr的溶解曲线就是对应孔内pcr产物对应的tm值。如果一个孔没有溶解曲线说明这个孔中没有产物,没有产物的原因有很多种,例如:pcr反应体系中可能没有加模板或者加酶或者引物等,少一个成分都会导致相应的孔没有溶解曲线,也有可能是。

qPCR的溶解曲线有多个峰值

溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。

荧光定量pcr溶解曲线没有峰

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为:一般每加温一度,读一次信号,当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多,曲线的横坐标是温度,纵坐标是荧光信号的变化,开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的。当加热接近于PCR产物Tm时,双链开始解离,荧光强度变小,机器会比较前后2个温度点的荧光强度,把2者的差

什么是realtimePCR溶解曲线

如图所示,这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读:1、随着温度的升高,DNA双链断裂;接着温度降低,到达退火温度的时候,DNA双链复性,荧光分子绑定在DNA双链上,所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度,继

qPCR的溶解曲线有多个峰值

溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。

荧光定量pcr溶解曲线没有峰

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为:一般每加温一度,读一次信号,当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多,曲线的横坐标是温度,纵坐标是荧光信号的变化,开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的。当加热接近于PCR产物Tm时,双链开始解离,荧光强度变小,机器会比较前后2个温度点的荧光强度,把2者的差

怎么通过看扩增曲线和溶解曲线看引物的好差

具体要看你做什么实验,模板和扩增的基因实怎样的.1、扩增曲线:一般来说如果你做双ΔCT法那么你的扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);同一个基因在...

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

荧光定量pcr溶解曲线出现杂峰

用来做测试的cDNA浓度应该比较高,而正式进行定量的模板浓度应该是有高有低吧,低浓度下出现非特异性溶解峰比较正常

荧光定量PCR-溶解曲线与什么有关

荧光定量的溶解曲线主要是看是否存在非特异性扩增,如引物二聚体等,当只有单一峰时且值在退火温度说明特异性扩增,结果可用

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

荧光定量PCR中溶解曲线的意思

溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线,顾名思义,其跟模板(或其浓度)没有关系,扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线,类似于电泳。那么你扩增几种基因就应该有几种对应的峰(一般SYBR法的目的基因在80~90℃之间),我说的是一般情况,这个跟扩增片段长短有关系。出现其他峰就该考虑是否为引物二聚体(一般

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

荧光定量PCR中溶解曲线的意思

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。出现怪异的溶解曲线大部分都是机器设置或者反应体系的问题,建议:1、将扩增产物跑一

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

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1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

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1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正

怎么通过QPCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果

1、扩增曲线(如果做双ΔCT法):(1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);(2)同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增,其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。当然这是理论值;另外阴性对照不能有扩增(40个循环以后出CT值属正