溶解曲线出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光值变化的,自然就没有溶解曲线了。但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料,情况就不同了。......阅读全文
溶解曲线出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是
溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。
溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。扩
荧光定量PCR结果溶解曲线有双峰
根据曲线初步判断,整个实验设计还可以!你做相对定量吗,将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了! 如果绝对定量,需要进一步实验吧!
溶解曲线有双峰则ct值是否可信
如果有标准曲线,按照标准曲线计算。 一般都是相对量。则用delta delta CT方法来计算。举例如下: 对照组基因A的CT值为20, 内参(比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18,内参CT值14。 首先算加样量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说。
QPCR做出来溶解曲线双峰,是什么原因
可能是引物二聚体,也可能是污染了,也可能是引物的非特异性扩增
QPCR做出来溶解曲线双峰,是什么原因
可能是引物二聚体,也可能是污染了,也可能是引物的非特异性扩增
蛋白质洗脱曲线为什么有双峰
原因可能有很多种。有可能是你在洗脱时,当出现第一个洗脱峰后,洗脱液已经接近柱床表面,没有及时加入洗脱液曹成蛋白被洗脱下来的较少;然后补加洗脱液,大量蛋白又继续被洗脱下来;或者层析柱发生倾斜、移动等;如果粗心把样品的顺序搞错也不是没有可能哈……
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃_芙馇叻治隹梢杂美慈范ú煌姆从Σ铮ǚ翘匾煨圆铩?_芙馇?(Dissociation curve):随温度升高,DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度(Tm)。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。不排除极度
荧光定量标准溶解曲线
全球大爆发的新型冠状病毒肺炎或新型冠状病毒感染疾病的诊断有多种方法,其中针对其病毒核酸的实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测是病原学诊断的金标准。PCR 方法是所有核酸(RNA、DNA)定量检测的重要方法,对于新冠病毒等RNA核酸首先需要逆转录为cDNA,而后PCR方法则基本一致,下面
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃随温度升高,DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度(Tm)。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。不排除极度偶然的情况:1.两个序列的溶解曲线一样 2.没有目标产物,只有一种非特异产物。
在粒度分析中的双峰曲线是怎么回事
见附图,就是双峰曲线,说明颗粒群中,有两种尺寸的颗粒较多。单峰,就一种尺寸的颗粒较多。
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
pcr溶解曲线的峰值太低
横坐标是温度,每个温度点一个.一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身).一开始加热的时候,虽然荧光强度比较强,但是由于双链没有解离,所以荧光强度保持不变.当加热接近于PCR产物Tm时,双链开始解离,荧光强度变小,机器会比较前后2个温度点的荧光强度,然后把2者的差值标在图上.Tm到达
PCR溶解曲线要跑多久
一次pcr的时间不是固定的,要根据循环数决定。一般一次pcr需要70-90分钟,如果加上前面加样时间,一般两个小时左右。一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度(假定65度为退伙温度).在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。因为染料是插到双
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。