植物组织培养中常用灭菌方法(二)

4、不耐热的物质采用过滤灭菌一些生长调节剂,如赤霉素、玉米素、脱落酸和某些微生物是不耐热的,不能用高压灭菌处理,通常采用过滤灭菌方法。一些化学成分在高温高压下会发生降解而失去效能或降低效能。经高温灭菌后赤霉素GA3的活性仅及不经高温灭菌的新鲜溶液的10%。蔗糖经高温后部分被降解成d-葡萄糖和d-果糖,果糖又可被部分水解,产生抑制培养的植物组织生长的物质。高温还可使碳水化合物和氨基酸发生反应。维生素具有不同程度的热稳定性,但如果培养基的ph值高于5.5,则维生素b1会被迅速降解。泛酸钙、植物组织提取物等要过滤灭菌,不能高温灭菌,否则会失去作用。防细菌滤膜的网孔的直径为0.45微米以下,当溶液通过滤液后,细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻,在需要过滤灭菌的液体量大时,常使用抽滤装置;液量小时,可用注射器。使用前对其高压灭菌,将滤膜装在注射器的靠针管处,将待过滤的液体装入注射器,推压注射器活塞杆,溶液压出滤膜,从针管压出的溶......阅读全文

植物组织培养中常用灭菌方法(二)

4、不耐热的物质采用过滤灭菌一些生长调节剂,如赤霉素、玉米素、脱落酸和某些微生物是不耐热的,不能用高压灭菌处理,通常采用过滤灭菌方法。一些化学成分在高温高压下会发生降解而失去效能或降低效能。经高温灭菌后赤霉素GA3的活性仅及不经高温灭菌的新鲜溶液的10%。蔗糖经高温后部分被降解成d-葡萄糖和d-果糖

植物组织培养中常用灭菌方法(一)

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料

组织培养常用术语介绍(二)

随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用,不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱,因此,在系统学习细胞培养之前,有必要将有关术语含义介绍如下:1.In vitro malignant transformation(体外恶性转化)2.In vitro transformation

组织培养常用术语介绍(二)

  随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用,不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱,因此,在系统学习细胞培养之前,有必要将有关术语含义介绍如下:   1.In vitro malignant transformation(体外恶性转化)   2.In vi

常用的灭菌方法介绍

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类:即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料

植物组织培养中的无菌技术

一、目的要求  通过实验掌握植物组织培养中的无菌操作技术。学习培养基的配制及灭菌,掌握植物外植体表面消毒的常规方法。 二、基本原理近年来,植物组织培养作为一种研究技术已被广泛。植物组织培养是应用无菌操作方法培养植物器官或组织地任何一部分,甚至单个细胞的观察。植物组织培养中的无菌

植物组织培养的培养方法

1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培瓶等器皿中在无菌

植物组织培养材料与方法

从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(

植物组织培养技术知识汇总(二)

三、生根 生根是获得完整植株的一个关键。通过侧芽和不定芽途径产生的芽长成嫩枝后(此时的嫩枝叫试管苗),必须诱导生根才能移植。促使试管苗生根的方法通常有两种。一种是在固体培养基上诱导生根。当试管苗长到2~3厘米高时,将它从基部切下,转移到只含0.2~0.5毫克/升的萘乙酸或吲哚丁酸的固体培养基

几种常用的灭菌方法汇总

物理灭菌法(一)加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿,湿热的穿透力比干热大。干热灭菌法  常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法

常用的灭菌方法的原理

(1)加热灭菌法利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长

常用的灭菌方法的原理

(1)加热灭菌法利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长

实验室常用灭菌方法

  实验医学微生物学常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。   (一)消毒灭菌方法   目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀

灭菌常用的方法有哪些?

灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌。热灭菌法热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。干热灭菌火焰灼烧法或烘箱内

简介植物组织培养的培养方法

  1、非试管微组织快繁  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。  2、试管组织培养  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培

植物组织培养培养方法的特点

1、培养条件可以人为控制组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长,摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,便于稳定地进行周年培养生产。2、生长周期短,繁殖率高组培是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求而提供不

组织培养时各种灭菌特点

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料

常用6种灭菌方法有哪些

1、热灭菌法。热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。2、干热灭菌。火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法(dryheatsterilization)。把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内,在150~170℃下维持1~2

植物组织培养过程

一、培养材料的采集组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。在快速繁殖中,最常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘

植物组织培养简介

  植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其

组织培养中培养基配制灭菌及保存操作流程

培养基的配制 1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂  放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂  加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入

植物基因转化常用方法

一 植物遗传转化的方法  植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

植物基因转化常用方法

一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

植物组织培养和植物快速繁殖

组织培养是一种利用人工培养基(液)使细胞在体外发育和繁殖的技术。除了能够为许多实验提供大量的动植物细胞材料之外,它也是一项克隆植物细胞和个体的实用技术。实际上,在日常生活中必不可少的蔬菜、花卉及粮食作物中,许多种类都是克隆植物,例如,脱病毒马铃薯和红薯、百合和兰花、水稻等等。病毒是威胁园艺和蔬菜种植

植物组织培养中的脱分化和再分化

植物组织培养(plant tissue culture)的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,成为离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,植

植物组织培养中的脱分化和再分化

植物组织培养(plant tissue culture)的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,成为离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,植

植物组织培养培养方法的技术优势

1、占用空间小,不受地区、季节限制;2、培养脱毒作物;3、培养周期短;4、可用组培中的愈伤组织制取特殊的生化制品;5、可短时间大量繁殖,用于拯救濒危植物;6、可诱导之分化成需要的器官,如根和芽;7、解决有些植物产种子少或无的难题;8、不存在变异,可保持原母本的一切遗传特征;9、投资少,经济效益高;1

植物组织培养应用介绍

植物组织培养指的是在特定条件下用人工手段是植物细胞分裂增殖的生物学技术。

植物组织培养技术简介

上世纪30年代white首次由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,验证了l902年Haberlandt提出的植物细胞全能性的理论。所谓植物细胞全能性就是每个植物细胞就像一粒种子,在适宜条件下具有发育成完整植株的潜力。20世纪50年代——诱导培养银胶菊愈伤组织得到天然橡胶从胡萝卜体 细胞培养

植物的组织培养技术

一. 实验目的: 1. 学习固体培养基的配制; 2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导方法。 二. 实验原理: 植物组织培养理论依据是植物细胞具有全能性。 植物组织培养是指用无菌培养的方法,在人工制备的培养基上培养植物体的一个离体器官、离体的一种组织,或单个细胞