色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)

衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱柱的过程。1.2:常用的溶剂针对于反相色谱柱,通常是用到纯的水和有机溶剂,水主要是作为冲洗掉色谱柱中的盐和其他添加剂,而有机溶剂则是用来冲洗掉一些在色谱柱上有较强保留的污染物,除了在分析中常用到的甲醇和乙腈之外,还有一些对污染物去除能力更强的有机溶剂也可以使用,比如异丙醇。第二个问题:冲多久色谱柱到底要冲多久,这个是经常困扰大家的问题,20分钟,30分钟,还是一个小时?2.1.1:色谱柱冲洗的计算原理其实,冲洗色谱柱并不是一个时间概念,而是一个体积的问题:通常要完全置换色谱柱中的流动相,需要至少十倍柱体积,也就是说,要有至少十倍于色谱......阅读全文

反相色谱仪色谱柱的维护与清洗

色谱柱是反相色谱仪最主要的部件,被测样品能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性作用。因此,应注意色谱柱的维护与清洗,以延长色谱柱的使用寿命。一、色谱柱清洗体积确定:色谱柱清洗体积一般是柱体积的10~20倍。根据柱内径和柱长计算出柱体积,清洗时间可计算出。二、色谱柱清洗:为了使被测样品和杂质不

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱?

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu

探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu

导致液相色谱仪反相色谱柱污染的因素

反相色谱在高效液相色谱中是应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的。    反相色谱柱在分离检测过程中,分析物和基质污染能使固定相受到影响,使用过程中应当注意固定

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

高性能聚合物基质反相色谱柱

图1.  ODP2 HP-4D与早期产品聚合物基质反相色谱柱(ODP-50 4D)相比,理论塔板数(N)提高了约2倍。 创新点: 与早期产品(ODP-50)比较理论塔板数提高了约2倍。 对高极性物质保留力强。 可以很好地分离蛋白质和药物。   图2. 各种色

常规反相色谱柱安装及使用维护指南

何谓常规反相色谱柱?在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如C18、C8、C4或苯基等键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中zui常使用的分离模式,而C18柱是zui常使用的反相色谱柱之一。新色谱柱开启和安装的推荐步骤:使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不

如何对反相色谱柱进行保养和保存

色谱柱保存,要避免的是两点:细菌滋长导致的发霉以及因保存溶剂挥发导致的填料变干。有机相成分有杀菌作用,在保存试剂中含量不能太低;但100%有机相或接近100%有机相,因为挥发性太强也不好。所以80%上下甲醇含量的甲醇水作为保存溶剂是适宜的。当然,无论选什么作为保存试剂,色谱柱两端的Peek堵头是一定

反相液相色谱柱原理及运用维护

反相液相色谱柱是根据溶质、极性活动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱形式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是运用面较广的一种别离形式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,活动相多选用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶

极性改性反相色谱柱有哪些新特性

Spursil HPLC 极性改性反相色谱柱是以高纯硅胶为基质,采用独特的极性改性技术生产的色谱柱。这个系列的色谱柱不但保留了传统硅胶基质反相色谱柱的性能,而且又增加了一些新的特性: * 填料表面具有极性基团,适合于高水相流动相条件下的分离;* 增强了对亲水性、极性化合物的保留能力;* 独特的选择性

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法:    1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。    2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min

反相色谱

根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。

反相液相色谱柱应当怎样维护和使用

反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶

通用型反相色谱柱安装分为几个步骤

在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照通用型反相色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 通用型反相色

反相液相色谱柱开启和安装的步骤

反相液相色谱柱开启和安装的推荐步骤:反相液相色谱柱使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。取用色谱柱时避免磕碰掉落。将色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至

c8反相液相色谱柱的平衡

c8反相液相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,就会在处理问题方面获得zui大的"补偿",而且c8反相液相色谱柱的寿命也会变得更长! c8反相液相色谱柱

C4反相色谱柱特点及试用范围

C4反相色谱柱特点:1、定量结果更准确、更精确: (1)纯度分析。 (2)稳定性分析。 2、灵敏度更高: 检测下限更低,对低浓度杂质有更强的检测能力。 3、分离度更好: 更有利于相邻色谱峰的分离。 4、色谱柱间重现性: 指同一批次合成的填料之间的重现性。 (1)柱床填充质量控制: 1)理论塔板数。 

反相液相色谱柱是一种怎样的色谱模式

  反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:满足不同的分离要求。由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形良好:满足定量精度、灵敏度和分离度要求。

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

  反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:        满足不同的分离要求。        由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形

反相液相色谱仪色谱柱的pH值使用范围

反相液相色谱仪色谱柱的优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂,但以硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的pH范围。一般的C18柱的pH值范围在2~8。当流动相的pH<2时,会导致键合相水解;当流动相的pH>7时,硅胶易溶解;经常使用缓冲液,固定相会降解。一旦发生上述情况,色谱柱入口处会塌陷。

反相萃取柱操作

反相萃取柱操作从极性基体中提取非极性的样品1、活化:以3-5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)4、洗脱:将被测样品,用

通用型反相色谱柱使用前处理和保养

通用型反相色谱柱在使用前,zui好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意: 液相色谱柱柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的