免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（一）
标签： 流式 细胞仪流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪，是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。实验方法流式细胞仪实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验材料淋巴细胞 外周血的白细胞试剂、试剂盒FACS缓冲液 PBS 叠氮钠溶液 仪器缓冲液 FACS清洁液 FACS洗净液仪器、耗材流式细胞仪实验步骤一、细胞和试剂的准备1. 细胞样品：来源淋巴细胞或外周血的白细胞。2. 荧光标记单克隆抗体：常用的有FITC（fluorescein -isothiocyanate）和PE（phyco......阅读全文
免疫组化技术要点
1. 固定最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。（1）BouinS固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较
细胞调亡的流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法1）PI单染色法方法一1．收集细胞（1～5）×106个，500～1000r/min离心5min，弃去培养液。2．3ml PBS洗一次。3．离心去PBS，加入冰预冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。5．400目的筛网过滤1次，500～
实验室HIV检测技术概述及进展（一）
艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查，控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进展做一综述。
蛋白质技术专题：蛋白等电聚焦凝胶电泳技术（一）
等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场
土壤“三普”专题检测技术与应用线上研讨会
今年，国务院发布《第三次全国土壤普查工作方案》，以全国耕地、草地、园地、林地等农用地和部分未利用土壤普查的对象，以土壤性状、类型、条件、立地、利用状况等为普查内容展开工作，其普查结果将会对我国经济社会生态建设重大政策的制定提供决策依据。 为提升三普检测实验室的土壤检测技术能力，高效、精准开展土
PCR实验技术（一）
PCR（聚合酶链式反应）【原理】PCR（polymerase chain reaction）用于在体外将微量的目标DNA大量扩增，以便进行分析。反应体系：①样品DNA；②引物（primer），是人工合成的一对寡核苷酸链（约15-20个核苷酸），用于扩增夹在双引物与模板DNA互补区之间的区域；③4种d
石蜡切片免疫组化实验
实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头
免疫组化实验方法
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
成分输血专题讲座（一）
输血是血液病的重要支持疗法，是多数血液病得以有效治疗的重要保障，在某些情况下，输血也是目前个别血液病的唯一有效治疗手段。随着血液分离技术的进展，输血已从传统观念的输全血逐渐发展为成分输血，输血的应用范围也从原来的单纯替代治疗发展为包括干细胞移植等重要的治疗技术。全血输血输血的传统观念是输全血，随着现
免疫组化病理诊断（一）
在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些
免疫组化－－病理诊断－（一）
在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20个世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一
免疫组化技术规范
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标
Stratedigm流式细胞仪技术优势及特点（一）
1973年，从BD公司推出第一台FACS I流式细胞仪开始，到目前为止流式细胞仪的发展已经有近乎30年的历史，除了传统品牌如BD、Beckman Coulter以外，其间仍不断有新的品牌型号推出市场如德国Partec、密理博Guava、ABI等。2008年，Stratedigm公司集合当前市
CISILE－2016：材料检测专题论坛
分析测试百科网讯 2016年5月22日，第十四届中国国际科学仪器及实验室装备展览会（CISILE 2016）于北京国家会议中心开幕。展会同期举办的材料检测专题分论坛于2016年5月23日举行。 材料检测专题分论坛现场 北京航空材料研究院 赵文侠 会议伊始，来自北京航空材料研究院的赵文侠博士
不溶性微粒的检测专题
射液里的大颗粒检测一直是制药行业中大量/少量注射药物中的杂质微粒的监控的一个重要标准，本文介绍了AccuSizer 780SIS注射型颗粒计数器按照USP788测试的方法以及判断标准。详情请下载附件
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（二）
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（三）
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层，是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间，见消化液混浊、组织块呈絮状，或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
细胞技术专题：人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以：（1）获得人脐动脉平滑肌细胞；（2）作为重大动脉疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
设备更新－|－细胞组织更新迭代，病理诊断焕然升级
024 年 3 月 7 日国务院印发了《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》的通知，通知中指出推动大规模设备更新和消费品以旧换新是加快构建新发展格局、推动高质量发展的重要举措，在实施设备更新行动中也特别指出加强优质高效医疗卫生服务体系建设，推进医疗卫生机构装备和信息化设施迭代升级，鼓励具备条
免疫组化的实验试剂及实验步骤
一、试剂（1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。（2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。（3）0.
流式细胞仪技术
测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光,经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，以调出显示和进行分析。一、样品的制备细
流式细胞仪技术
利用各种显微镜进行形态学观察通常只能对细胞凋亡进行定性而不能定量。利用荧光素或者免疫组织化学方法标记凋亡细胞，则可以通过在显微镜下分别计数凋亡细胞数和总细胞数，计算两者的比值而进行半定量研究。数100～200个总细胞，既费时又费力；显微镜下视野的不同还会造成结果的变异。流式细胞仪（flow cyto
石蜡切片免疫组化实验步骤
脱蜡和水化1. 将切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ（10 min）。2. 再次浸入无水乙醇Ⅰ（5 min）-无水乙醇Ⅱ（5 min）-95%酒精（5 min）-80%酒精（5 min）-70%酒精（5 min），然后去离子水冲洗2次，每次2 min。 抗原修复 (可选)3. 将组织切片放入
免疫组化实验注意事项
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。那么在做免疫组化实验注意事项有哪些呢？下面我们来详细了解一下： 对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育
石蜡切片免疫组化实验4
实验方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法，是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法：一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC（链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素）+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从
石蜡切片免疫组化实验3
卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法实验材料蜡块切片试剂、试剂盒多聚甲醛蒸馏水蔗糖过氧化氢甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白叠氮纳一抗二抗仪器、耗材冰箱显微镜烧杯实验步骤1. 4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中过夜。蜡块制作。切片，贴片。0.01 M KPBS清洗5
石蜡切片免疫组化实验2
链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法实验方法原理SP（streptavidin-perosidase）法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。SP法是最常使用的方法。试剂、试剂盒二甲苯酒精PBS双氧水枸橼酸缓冲液羊血清工作液辣根过氧化物酶链霉素卵白素苏木素DAB仪器、耗材冰箱显微镜烧杯玻璃缸
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10 min，倒掉（不能冲洗）；3、加入一抗（按照说明书推荐浓度和孵育条件）；4、使用含有0.05