免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10 min，倒掉（不能冲洗）；3、加入一抗（按照说明书推荐浓度和孵育条件）；4、使用含有0.05%吐温20的PBS( TPBS)，冲洗5 min×3次；5、加入100 ul（2滴）生物素化的二抗（试剂2)，室温孵育10 min；6、用TPBS冲洗5 min×3次；7、加入100 ul（2滴）链霉亲和素-AP（试剂3）的二抗，室温孵育10 min；8、用TPBS冲洗5 min×3次；9、准备底物溶液：将1滴试剂4A和4B加入到1 ml去离子水中，充分混匀。再加入1滴试剂4C，充分混匀；10、加100 ul（2滴）配好的AP底物溶液，室温孵育（镜下掌握孵育时间）；11、使用含有0.05%吐温20的去离子水冲洗终止反应。三、第二抗体的......阅读全文
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10 min，倒掉（不能冲洗）；3、加入一抗（按照说明书推荐浓度和孵育条件）；4、使用含有0.05
免疫组化双染实验protocol
第一抗体的染色： 1、 将切片浸在3％H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10分钟，PBS冲洗2分钟×3次 2、 加100ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10分钟，倒掉（不能冲洗） 3、 加入一抗（按照说明推荐浓度和孵育条件） 4、 使用含有0.05％吐温20的PBS( TPB
银染实验的操作流程
实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下，用甲醛将蛋白带上的硝酸银（银离子）还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂：乙醇、冰醋酸（纯乙酸）、乙酸钠、硫代硫酸钠
免疫组化流程
实验步骤 第一天：1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min，脱蜡3、水化：100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注：以下步骤切勿让组织处于干燥状态！4、将切片置于修复盒，
石蜡切片免疫组化染色实验操作流程
1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置 60℃ 1 小时） 。① 二甲苯 、II，各 10 分钟。② 梯度酒精：100%，2 分钟 95%，2 分钟 80%，2 分钟 70% 2 分钟。③ 蒸馏水洗：5 分钟，2 次（置于摇床）。2．过氧化氢封闭内源性过氧化物酶：3%H2 O2 ，室温 10 分
免疫组化方法的具体实验流程步骤
实验流程简介一、SP三步法1）石蜡切片，常规脱蜡至水。2)0.3%或3%H2O2去离子水（无色液体）孵育10-30分钟，以灭活内源性过氧化物酶活性。3）蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟4）候选步骤：采用抗原修复：微波（建议30分钟内4次中火）、高压、酶修复方法。自然冷却，再用3分钟×3次.5）血清封闭：
免疫组化的操作流程
实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程，主要有：脱蜡和水化，抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位
免疫组化的操作流程
实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程，主要有：脱蜡和水化，抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位
银染实验
试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇 AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤 试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓
银染实验
试剂、试剂盒甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动
银染实验
银染实验 试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3
免疫组化ABC法操作流程
1、4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）过夜，蜡块制作，切片，贴片。0.01M PBS清洗5min×3次；2、脱蜡、水化：用二甲苯两次10min，用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化；3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80ml＋0.01M PBS 100ml＋30%过氧化氢）
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC温箱中，将多聚赖氨
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 ℃温箱中，将多聚赖
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC温箱中，将多
tunel和dapi双染的意义
为维持内环境稳定，能够与DNA强力结合的荧光染料。1、细胞凋亡是指为维持内环境稳定，生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下，其死亡途径被激活，并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。2、DAPI，即4'，6-二脒基-2-苯基吲哚，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测
Annexin－VPI双染法
Annexin V-PI 双染法在细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在DNA片段化之前，因而检测PS的表达，能反映早期凋亡。AnnexinV是相对分子质量为35 000大小的Ca2+依赖的磷脂结合蛋白，对PS有很高
单染和双染有什麼区别
不是太懂，知道多少说多少了，单染是染缸中只加入一种染料，双染是加入两种染料，比如染全涤的加入一种就行了，染阳离子和涤混纺的就要加入两种染料对其分别上色
银染实验用水指南
SDS聚丙烯酰胺凝胶染色是蛋白质研究的一个基础方法。染色方法有很多，实际应用中，考马斯亮蓝染色（考染）和银染是运用的最多的方法。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色，它与蛋白质结合后变为蓝色，结合物在595 nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。银染实验中
实现蛋白marker与Annexin－V双染的同时检测的实验方法
要用AnnexinV双染法测凋亡，又想同时标记蛋白marker，甚至还有胞内指标，可是PI和7-AAD都不能洗，怎么办？ eBioscience的可固定细胞活力染料Fixable Viability Dye帮您完美解决固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色，
免疫组化实验
实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水
PCR－产物电泳银染实验
实验方法原理聚丙烯酰胺凝胶（PAG）是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺，在引发剂过硫酸胺（AP）提供自由基和催化剂四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合，所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中，置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性
PCR－产物电泳银染实验
常用的核酸电泳法有两种。①水平电泳：琼脂糖凝胶，紫外光下判断条带。此法经济省时，但分辨率较低。②垂直电泳：聚丙烯酰胺凝胶，可见光下判断条带。此法相对费力，但分辨率较高。分辨率高是聚丙烯酰胺电泳法被优先用于克隆性基因重排条带判断的关键。在聚丙烯酰胺凝胶上较宽弥散被判断为假阳性（阴性）的条带，在琼脂糖胶
PCR－产物电泳银染实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺凝胶（PAG）是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺，在引发剂过硫酸胺（AP）提供自由基和催化剂四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合，所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中，置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性较差，通常 2 个月内用完为好。
双染检测助力宫颈癌前病变诊断
研究发现，全球99%以上的宫颈癌病例都是由人乳头瘤病毒（HPV）所引起，宫颈癌是目前唯一病因明确、可早期预防和治疗、并可实现治愈的恶性肿瘤。然而，HPV感染相当常见，大多数是一过性感染，会被人体自身免疫系统清除。只有长期持续感染高危型HPV病毒才会导致高级别宫颈上皮内瘤变（CIN），进而发展为
免疫组化实验原理
首先来谈一下免疫组织化学（IHC, Immunohistochemistry）、免疫细胞化学（ICC, Immunocytochemistry）和免疫荧光(IF, immunofluorescence technic )的共通之处和区别。 平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织
脂染介导的－DNA－转染实验
下述方法是 Mark Evans 所研究的一种方法的改进（Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒脂染试剂N
脂染介导的－DNA－转染实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠
AOEB双染试剂盒说明书
产品简介：吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微
TLC实验流程
实验流程铺板→点样→展开→显色→计算Rf值