微载体细胞培养技术及应用原理(一)

微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下: 一、微载体培养技术的应用微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认的最有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术,其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点,放大容易。目前微载体培养广泛用于培养各种类型细胞,生产疫苗、蛋白质产品,如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。 使用较多的反应器有两种:贝朗公司的BioStatB反应器,使用双桨叶无气泡通气搅拌系统;NBS公司的CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反应器,使用Cell-lift双筛网搅拌系统。两种系统都能实现培养细胞和收获产物的有效分离。二、微载体介绍微载体是指直径在60-250μm,能适用于贴壁细胞生长的微珠。......阅读全文

小动物光声成像技术原理及应用(一)

Nexus 128小动物光声成像,可针对小动物活体进行3D高分辨率、高对比度光声成像,用于心血管疾病(血管生成、心肌炎、血栓、心梗等)、淋巴、肿瘤、神经系统、血液病、新型分子探针(纳米探针)、血红蛋白浓度和血氧饱和度测量和功能影像等方面的前沿性研究,将进一步提升科研单位在这些领域的研究水平和地位

微流控技术起源及原理解析

微型化、集成化和智能化,是现代科技发展的一个重要趋势。伴随着微机电加工系统( MEMS )技术的发展,电子计算机已由当年的”庞然大物”演变成由一个个微小的电路集成芯片组成的便携系统,甚至是一部微型的智能手机。MEMS技术全称Micro Electromechanical System , MEM

微流控技术的分类及应用案例

在产业化中,主动式微流控一般分为以下几大类型:压力推动式微流控,离心力推动式微流控,液滴微流控,数字化微流控,纸质微流控等。

浅谈微流控技术发展及应用

微流控技术(Microfluidics)是一种用来操纵极微量液体(10-9~10-18L)的新型技术平台。微流控技术被广泛应用于生物学问题研究,其主要特点和优势是将细胞培养、实验处理及成像、检测等步骤高度集成于一张芯片上。微流控技术问世至今,不过近30年历史,但其发展迅猛,被称为下一代医疗诊断“颠覆

Cytodex-1,-Cytodex-3-球形微载体的使用(一)

用于细胞培养的微载体 微载体培养(microcarrier culture)是一种用于高产量培养贴壁细胞的实用技术。CytodexTM专用于培养各类动物细胞,其培养体积可以从数毫升到6000升以上。应用Cytodex微载体技术,可以实现简单的贴壁细胞悬浮化培养,每毫升培养液可得到数百万细胞。微载

细胞转染技术原理及应用

常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染).前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析.一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同

活体成像技术原理及应用

  活体成像技术主要是利用一套非常灵敏的光学检测仪器,能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这个系统,可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。其优点为较传统屠宰动物相比,该技术能够对同一种实验对象在不同时间点进行记录,跟踪同一观察目标(标记细

大连化物所利用微流控技术制备双水相生物微载体

  近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员秦建华团队在利用微流控技术制备具有生物相容性的双水相微载体方面取得新进展,研究成果发表在材料领域刊物Small上。  纳升乃至皮升级液滴作为理想的微载体或反应器被广泛用于药物筛选、化学合成、组织工程等领域。传统基于乳化技术的液滴制备方法均源于油水双相(Wa

微载体培养操作要点

●培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。●贴壁阶段(3-8d)后,缓慢加入培养

微载体的基本介绍

自Van Wezel用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一种微载体问世以来,国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上,包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种:Cyt

微载体的分类系统

生物反应器系统此技术大规模培养,细胞扩增的效率受到诸多因素的影响和限制,其中主要的限制性因素包括:细胞对剪切力的敏感性、氧的传递以及传代和扩大培养等。而研制的各种类型生物反应器系统则可针对上述限制性因素,为微载体细胞培养与扩增提供低剪切力、高氧传递效率、易于细胞传代等适宜的外部环境。已较多使用的微载

一文了解PCR技术的原理特点及主要应用

   PCR技术的基本原理类似于DNA天然复制的一个过程,pcr技术的特异性主要是依赖于与靶序列的寡核苷酸引物。PCR技术其实是一种体外的DNA 产生扩增的技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将需要被扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经过

微流控技术原理及发展史(二)

5.显影用光胶配套显影液通过化学方法除去经曝光的光胶(正光胶)或未经曝光的光胶(负光胶),显影液和显影时间的选择对显影效果的影响很大。选择显影液的原则是,对需要去除的那部分胶膜溶解度大、溶解速度快,对需要保留的那部分溶解度小。显影时间视光致抗蚀剂的种类、胶膜厚度、显影液种类、显影温度和操作方法而异。

微流控技术的PCR生物微芯片技术原理!

  基于数字流控(DMF)的聚合酶链式反应 (PCR)微芯片系统设计 ,主要在于对样品液滴的运动进行控制和对进行PCR所需要的温度控制 。设计了一种基于介电润湿 (Ew0D)原理的数字微流控PCR微芯片,并实现了对芯片不同区域的温度控制以满足PCR所需的要 求。基于数字微流控技术的PCR微芯片系统由

固定化细胞技术载体要求及常用载体介绍

①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)

焦磷酸测序技术原理及应用

焦磷酸测序技术(pyrosequencing)是由Nyren等人于1987年发展起来的一种新型的酶联级联测序技术,焦磷酸测序法适于对已知的短序列的测序分析,其可重复性和精确性能与SangerDNA测序法相媲美,而速度却大大的提高。焦磷酸测序技术产品具备同时对大量样品进行测序分析的能力,为大通量、低成

等温扩增技术的原理及应用

等温扩增技术(isothermal amplification technology,ITA)是近年来发展起来的基于恒温扩增的新型核酸扩增技术,主要包括环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[1]、交叉引物扩增(crossing pr

X荧光分析技术原理及应用

X射线荧光就是被分析样品在X射线照射下发出的X射线,它包含了被分析样品化学组成的信息,通过对上述X射线荧光的分析确定被测样品中各组份含量的仪器就是X射线荧光分析仪。X荧光分析仪仪器应用领域:钢铁行业:生铁、炉渣、矿石、烧结矿、球团矿、铁精粉、铁矿石等。水泥行业:生料、熟料、水泥、原材料等。耐火材料:

扫描电镜技术原理及应用

扫描电镜一种新型的多功能的,用途最为广泛的电子光学仪器。数十年来,扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、冶金学等学科的领域中,促进了各有关学科的发展。关键词:扫描电镜;应用1938 年德国的阿登纳制成了第一台扫描电子显微镜,1965 年英国制造出第一台作为商品用的扫描电镜,使扫描电镜进入实用阶段。近

焦磷酸测序技术原理及应用

  焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术   焦磷酸测序技术(pyrosequencing)是由Nyren等人于1987年发展起来的一种新型的酶联级联测序技术,焦磷酸测序法适于对已知的短序列的测序分析,其可重复性和精确性能与SangerDNA测序法相媲美,而速度却大大的提高。焦磷酸测

WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(四)

微载体用量为3 g/l的 Cytodex3,接种细胞密度为0.3×106细胞/ml。培养条件为37℃,pH 7.3,5% CO2,采用光纤溶氧电极监测溶氧水平。培养基含有 2%  FBS。每小时取样并用结晶紫染色测定总细胞密度,上清中的悬浮细胞和死细胞用台盼蓝染色。MDCK细胞在接种后1 h

WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(二)

用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器  WAVE  Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成,配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50 

贴壁细胞培养方法(平面2D培养、搅拌式培养、微载体培...

贴壁细胞培养方法(平面2D培养、搅拌式培养、微载体培养)优缺点比较贴壁细胞-----真正的贴壁、线性的放大(潮汐式反应器)细胞反应器是某种细胞的培养生长代谢过程的反应器,这个过程需要控制的条件比较多,比较复杂。细胞反应器根据工作方式和功能的分类:一、平面2D培养(培养皿、方瓶、滚瓶):优点:成本低,

WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(三)

结果和讨论     微载体培养的最佳工作体积和混合速度的确定当我们使用 20%到 80%的Cellbag最大工作体积时,微载体培养可以产生均匀的微载体混合分布(图 2)。图 2. 微载体培养的最佳工作体积     在工作体积小于 20%的 Cellbag 最大工作体积时,部分微载体有可能粘在 Cel

WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(五)

MDCK细胞的生长和放大(2% FBS)     为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性,在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%(即Cellbag-1

WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(六)

Vero细胞在转瓶 (Spinner Flask)中无血清条件下的微载体培养      Vero细胞也可以在转瓶中进行微载体培养。如图 14 所示,在无血清条件下,WAVE 和转瓶这两种培养系统中可以获得基本相同的最大细胞密度。相比 Cytodex3,Cytodex  1 具有更大的表面积,

微载体的主要类型介绍

国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上,包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。

解密微流控技术的PCR生物微芯片技术原理

基于数字流控(DMF)的聚合酶链式反应 (PCR)微芯片系统设计 ,主要在于对样品液滴的运动进行控制和对进行PCR所需要的温度控制 。设计了一种基于介电润湿 (Ew0D)原理的数字微流控PCR微芯片,并实现了对芯片不同区域的温度控制以满足PCR所需的要 求。基于数字微流控技术的PCR微芯

分子蒸馏技术及应用推广(一)

引言   分子蒸馏技术是一种特殊的液液分离技术,它产生于20世纪20年代,是伴随着人们对真空状态下气体运动理论的深入研究以及真空蒸馏技术的不断发展而逐渐兴起的一种新的分离技术。目前,分子蒸馏技术已成为分离技术中的一个重要分支。   分子蒸馏(moleculardistillation)也称短程蒸馏(

分子蒸馏技术及应用推广(一)

分子蒸馏技术是一种特殊的液液分离技术,它产生于20世纪20年代,是伴随着人们对真空状态下气体运动理论的深入研究以及真空蒸馏技术的不断发展而逐渐兴起的一种新的分离技术。目前,分子蒸馏技术已成为分离技术中的一个重要分支。  分子蒸馏(moleculardistillation)也称短程蒸馏(short-