His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而,目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。如何选择合适的His标签抗体?我们在选择His抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了,His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫荧光IF实验?我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体?之......阅读全文
βTubulin抗体—做出漂亮WB和IHC图片的内参
Tubulin即微管蛋白,是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin,其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体,是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa,其实际检测条带均在
在WB实验中为什么需要使用内参抗体?
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子
镍柱纯化蛋白没有挂柱是什么原因
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如:因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签;纯化工艺不利于结合作用发挥,例如咪唑;蛋白不稳定,标签掉落。
镍柱纯化蛋白没有挂柱是什么原因
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如:因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签;纯化工艺不利于结合作用发挥,例如咪唑;蛋白不稳定,标签掉落。
pFC30A-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pFC30A His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFC30A His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4312 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFC30A His6Hal
pFN29A-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pFN29A His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFN29A His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4398 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFN29A His6Hal
如何选择Lamin-B1抗体?
Lamin B1是一种蛋白质,在人类由LMNB1基因编码,核纤层由位于内核膜旁边的蛋白质的二维基质组成,层系蛋白家族构成基质并在进化过程中高度保守的。在有丝分裂过程中,板矩阵是可逆拆卸核纤层蛋白蛋白质磷酸化。核纤层蛋白的蛋白质被认为是参与核稳定、染色质结构和基因表达。脊椎动物核纤层蛋白包括两种类型,
抗体纯化工艺开发平台策略亲和层析篇
介绍 在抗体药物纯化工艺中,通常采用经典的三步或两步层析法,蛋白A(Protein A)亲和介质(填料)因其配基上有多个区域对抗体Fc片段具有特异性吸附能力,因此广泛用于抗体捕获步骤(第一步层析)。通过一步亲和工艺,可去除细胞培养澄清液中大部分的杂质,纯度可达95%以上。然而,蛋白A亲和层析填
抗体
抗体是有机体在抗原刺激下产生的,并能与抗原发生特异性结合的一类球蛋白的总称。抗体存在于血清、淋巴液、粘膜分泌物和组织中,但以血清中含量最高,制备抗体也常从血清中获得,所以抗体又常称为抗血清。
异硫氰酸荧光素FITC偶联试剂盒的原理和应用
异硫氰酸荧光素(FITC)是荧光素的衍生物,广泛应用于流式细胞术。 FITC是用异硫氰酸酯反应性基团(-N = C = S)官能化的原始荧光素分子,取代结构底部的氢原子。 该衍生物对包括蛋白质上的胺和巯基的亲核试剂具有反应性。 FITC的荧光为:Ex/Em=492nm/520nm (绿色)。
抗核抗体的抗体分类
抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身
乙肝核心抗体的抗体类别
抗—HBc可分为三型:抗—HBcIgM、抗—HBcIgA、抗—HBcIgG,在HBV感染中这几个型依次出现,也会依次消失,只有IgG这一型可长期存在。在化验室报告的化验单中,如果只标明“抗—HBc”,没有分型,那么它应当是这三型的总和,不过大部分医院化验室报告的都分为IgM和IgG二型。 抗—
多克隆抗体的抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决
抗核抗体的抗体意义
抗核抗体谱包括抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体、抗核内可溶性抗原抗体(ENA)。ENA又包括抗史密斯抗体(Sm)、抗核糖核蛋白体(RNP)抗体、抗干燥综合征A(SSA/Ro)抗体、抗干燥综合征B(SSB/La)抗体、抗硬皮病-70(Scl-70)抗体。临床意义为:[1]ANA:ANA为一系列抗细胞核
抗核抗体的抗体分类
抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身
乙肝e抗体的抗体阳性
乙肝e抗体阳性,是指乙肝两对半检查中,第四项呈现阳性,乙肝e抗体阳性说明乙型肝炎病毒复制不活跃,传染性低或很少,是乙型肝炎病毒感染时间已较长久的标志。但如果HBV-DNA阳性,说明血中仍存在乙肝病毒或病毒已变异,不仅有传染性,而且对机体的危害可能更大。 乙肝e抗体阳性在急性自限性感染的恢复期出
抗原制备
不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位
抗体捕获酶标抗体法测定抗体的介绍
抗体捕获酶标抗体法测定抗体,血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法。先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,去除IgG后再测定特异性IgM。将抗IgM抗体连接在固相载体上,洗涤后加入稀释的血清标
pFN29K-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pFN29K His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFN29K His6HaloTag® T7载体抗性Kanamycin载体长度4393 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数Hig
pFC30K-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pFC30K His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFC30K His6HaloTag® T7载体抗性Kanamycin载体长度4307 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数Hig
pH6HTC-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pH6HTC His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pH6HTC His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度3984 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpH6HTC His6Hal
pH6HTN-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱
pH6HTN His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pH6HTN His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4014 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpH6HTN His6Hal
概述重组人血管内皮抑制素注射液的药代动力学
健康志愿者单次30 min内静脉滴注重组人血管内皮抑制素注射液30mg(4.8×105U )和60 mg(9.6×105U )/m2,及120 min内静脉滴注120mg(19.2×105U )和210 mg(33.6×105U )/m2(滴注速率分别为1、2及1和1.75 mg/m2/min)
镍柱纯化蛋白不挂住怎么办
有his标签么?要不就是beads的事?是你自己装的柱么?多长时间了?还有可能是你的蛋白构象变了,可能把his部分裹在里边了,找找别的条件,或者换NC端。
蛋白的表达与纯化
蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建
蛋白的表达与纯化
蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建
GAPDH抗体|GAPDH抗体大全指导您购买合适的GAPDH抗体
GAPDH抗体大全——总有一款合适的GAPDH抗体在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体
IgM抗体和IgG抗体的区别
IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生
IgM抗体和IgG抗体的区别
IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生
IgM抗体和IgG抗体的区别
IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生