抗原制备

不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位,因此分子太小的多肽或蛋白是很难有一个表位的。(2)外源性强。在个体形成的早期就对自身物质形成了免疫耐受,因此如果和机体内的物质完全一样或者是相似就很难引起机体的免疫应答。如果是利用免疫赦免区的成份(如大脑、眼球、睾丸内部成份)则不必考虑外源性。(3)结构尽量复杂。简单重复的物质是不具有免疫原性的,拿明胶来说,它的分子量非常大,而且外源性也很强,但是组成明胶的氨基酸多为直链氨基酸,在体内容易被降解,因此它的免疫原性很弱。类似地,淀粉、核酸、多聚Lys的免疫原性也很弱。(4)可降解性好。作为抗原,必须是可以降解的,塑料、不锈钢等难降解的......阅读全文

抗原制备

不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位

抗原的制备1

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备方法

实验概要除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。实验步骤一、抗原的提取  

抗原的制备方法

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备2

 2.核酸的分离纯化  从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入E

抗原的制备方法

实验步骤一、抗原的提取  抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中

抗原的制备方法

实验步骤一、抗原的提取抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如

抗原的制备方法2

表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242 278 3

若想提供抗原制备抗体,需要提供多少抗原?

① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是冻干粉。② 如果抗原是蛋白,建议您提供3-5mg浓度为1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的缓冲液和蛋白浓度。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg蛋白用于亲和纯化。 该量

ICC用细胞抗原的制备

一、材料和试剂1、0.01M PBS(pH7.4): NaCl 8.0g; KCl 0.2g; Na2HPO4 1.44g; KH2PO4  0.24g; ddH2O至1000ml ; 高压灭菌,分装。2、0.25%胰酶:称取EDTA 0.02g   NaCl   0.8g  KCl  0.04g 

抗原与免疫血清的制备

实验方法原理 动物产生抗体的量,一方面可因动物的种类、年龄、营养状况及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面还与抗原的种类、注射量、注射途径、注射次数以及注射的间隔时间有关。抗原量低到一定限度时,抗体不能产生或用现有方法不能测出,但超过最高限度对抗体的产生反起抑制作用。在最低限度以上,抗体根据抗原量

酶标记抗体或抗原的制备

  标记方法应符合:技术方法简单、产率高,且重复性好;标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性;酶标志物稳定,应避免酶、抗体(抗原)以及酶标志物各自形成聚合物等。  1.戊二醛交联法:同源双功能交联剂  (1)一步法:连接AP。  ①优点:操作简便、有效,重复性好。  ②缺点:交联时分子间比例不严格,大小

皮肤试验的条件和抗原制备

首先应当制备试验用抗原,如有合格商品可直接购买。可以作为变应原的物质种类繁多,例如动物皮毛、家禽羽毛、鸽粪、昆虫、螨类、真菌、花粉、杂草、物理粉尘和各种食品等都可能成为变应原。不同抗原的制备方法不同,但一般包括以下几个步骤:①收集原料;②粉碎与匀浆;③脱脂与提取;④过滤与分离;⑤分装保存。分装保存之

酶标记抗体或抗原的制备

标记方法应符合:技术方法简单、产率高,且重复性好;标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性;酶标志物稳定,应避免酶、抗体(抗原)以及酶标志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交联法:同源双功能交联剂(1)一步法:连接AP。 ①优点:操作简便、有效,重复性好。②缺点:交联时分子间比例不严格,大小不一,影响效果。(

大肠杆菌O抗原,伤寒杆菌O抗原等的制备

大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克

抗原和免疫血清的制备实验——抗菌血清的制备

抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。实验材料家兔试剂、试剂盒普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实

抗原和免疫血清的制备实验

实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制

固相合成法制备抗原肽环肽

1.1  仪器与试剂多肽合成仪(CS536,美国CSBio公司),半制备型高效液相色谱仪(Waters Delta Prep4000,美国Waters公司),分析型高效液相色谱仪(Agilent 1100,美国Agilent公司),冷冻干燥机(Christ Alpha,德国Christ公司)

抗原呈递细胞的选择和制备

实验步骤基本方案 过 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 备 腹 腔 巨 噬 细 胞材 料单核细胞增多性利斯特氏菌无 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(见 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培养基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V

可溶性抗原的制备及鉴定2

1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分

人工抗原的制备是什么样的

半抗原与载体蛋白的耦联物称之为人工抗原。载体不仅是简单地增加半抗原的分子质量,更重要的是利用其强的免疫原性诱导机体产生免疫应答,对半抗原发生载体效应的作用。蛋白质结构越复杂,免疫原性越好。常用的载体蛋白有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、兔血清白蛋白(RSA)、人血清白蛋白(HSA)、人γ

半抗原性免疫原的制备

半抗原指只具有抗原性而无免疫原性的物质。多见于分子量小于4000的有机物质。半抗原与载体相结合具有免疫原性。(一)载体1. 蛋白质:以牛血白蛋白最常见。2. 多肽聚合物:常用多聚赖氨酸。3. 大分子聚合物和某些颗粒。(二)半抗原与载体的连接方法1. 物理方法:通过电荷和微孔吸附半抗原。2. 化学方法

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针

可溶性抗原的制备及鉴定1

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备 用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低

抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备

实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹

抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备

实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1.  弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2.  人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中

抗原呈递细胞的选择和制备(二)

备 选 方 案 2 Con A 刺激的腹腔巨噬细胞的制备此方案中不使用致病菌,但巨噬细胞获得率较低。将 Con A 溶 解 于 PBS (200ul/ml) ,用 0.22/xm 的滤器过滤,然后保存于 一 20°C 。 每只小鼠腹腔注射 500ul (IOOug)C o n A (附录 2

抗原抗体反应的人单克隆抗体的制备

  小鼠的单克隆抗体蛋白应用于人体后,作为抗原能引起人的免疫应答,大大降低其生物活性,并可能导致变态反应。因此人源单克隆抗体在临床治疗上有广泛应用前景,引起人们的普遍兴趣。但是人单克隆抗体制备存在许多技术上和伦理上的障碍,如人杂交瘤细胞系不稳定,有些抗原不能对人进行人工免疫,人B细胞只能从外周血中分