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可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如：因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签；纯化工艺不利于结合作用发挥，例如咪唑；蛋白不稳定，标签掉落。......阅读全文
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如：因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签；纯化工艺不利于结合作用发挥，例如咪唑；蛋白不稳定，标签掉落。
ni柱中的氯化镍可以与有his（组蛋白）标签的蛋白结合，也可以与咪唑结合。步骤是：过柱子前可以选择ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流速太
ni柱中的氯化镍可以与有his（组蛋白）标签的蛋白结合，也可以与咪唑结合。步骤是：过柱子前可以选择ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流速太
财大气粗到只用一次的话，就不用去除了。如果和我做学生时一样，一定要去除哦。先用纯化buffer，再用无菌水，再用20%乙醇。
步骤是：过柱子前可以选择Ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流速太慢，可以加个恒流泵，但是一定不能太快，太快挂柱效果差，当然你也可以选择循环
有his标签么？要不就是beads的事？是你自己装的柱么？多长时间了？还有可能是你的蛋白构象变了，可能把his部分裹在里边了，找找别的条件，或者换NC端。
Ni柱中的氯化镍可以与有HIs（组蛋白）标签的蛋白结合，也可以与咪唑结合。步骤是：过柱子前可以选择Ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流速太
不用的好,你失去活性你可以监测一下提取,纯化,酶...那些时髦但不一定好用,常用的有透析复性,稀释复性...(包括洗脱液的选择和谁先被洗脱下来等),
Ni柱中的氯化镍可以与有HIs（组蛋白）标签的蛋白结合，也可以与咪唑结合。 步骤是：过柱子前可以选择Ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流
步骤是：过柱子前可以选择Ni柱重生，也就是往柱子里倒氯化镍，一个柱长体积就行了，然后平衡柱子，拿你自己的buffer，给蛋白提供最适的环境，我一般平衡4个柱长，然后蛋白上样，你可以让他自己挂，这样挂柱子的效果好一些，如果流速太慢，可以加个恒流泵，但是一定不能太快，太快挂柱效果差，当然你也可以选择循环