GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择
在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。如何选择合适的GAPDH抗体？内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于GAPDH的检测分子量大约在36kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来......阅读全文
进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体？
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子
如何选择Lamin－B1抗体？
Lamin B1是一种蛋白质,在人类由LMNB1基因编码，核纤层由位于内核膜旁边的蛋白质的二维基质组成,层系蛋白家族构成基质并在进化过程中高度保守的。在有丝分裂过程中,板矩阵是可逆拆卸核纤层蛋白蛋白质磷酸化。核纤层蛋白的蛋白质被认为是参与核稳定、染色质结构和基因表达。脊椎动物核纤层蛋白包括两种类型,
免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项
免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项 Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。 虽然，顺利的时候Western blot做
免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然，顺利的时候Western blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、
Western实验中内参基因的选择及使用方法
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然，顺利的时候Western blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现
如何挑选合适的βActin内参抗体？
如何选择合适的β-Actin抗体？ 现在市场上对于内参抗体选择是比较多，但是也需要遵循一定的原则，那怎么去找到适合自己实验的β-Actin抗体呢？首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于β-
Western－blot如何进行实验质控
WB实验总做不好，那么如何进行WB实验质控呢？ 做过WB实验的小伙伴都经历过成像时忐忑不安，出来结果时的彷徨无措，为什么条带没有出啦，为什么背景这么高，为什么受伤的总是我，看着旁边小伙伴漂亮的结果图，心生羡慕嫉妒，那么小编给大家整理总结了如何进行WB的质控和注意哪些检查点。 蛋白样品
Western－blot如何进行实验质控？
WB实验总做不好，那么如何进行WB实验质控呢？做过WB实验的小伙伴都经历过成像时忐忑不安，出来结果时的彷徨无措，为什么条带没有出啦，为什么背景这么高，为什么受伤的总是我，看着旁边小伙伴漂亮的结果图，心生羡慕嫉妒，那么小编给大家整理总结了如何进行WB的质控和注意哪些检查点。蛋白样品：准备好裂解液后，使
Flag标签抗体在免疫沉淀IP免疫荧光IF中的应用
Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由 8个亲水氨基酸（DYKDDDDK）组成的多
Western实验中内参基因的选择及使用方法
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Western－Blot内参的选择不容忽视
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――
关于PCR内参基因选择策略
关于内参基因的选择很多初级的实验人员很少会去思考这个问题，因为摆在面前的只有两种选择，β-actin和GAPDH，甚至在很多人长期的观念中对于内参的认知也仅仅停留在是一个表达量相对较高较稳定的看家基因，对于分子层面相对表达量的一个重要参照而已，至于为什么要选这两种，还有没有其他
关于PCR内参基因选择策略
关于内参基因的选择很多初级的实验人员很少会去思考这个问题，因为摆在面前的只有两种选择，β-actin和GAPDH，甚至在很多人长期的观念中对于内参的认知也仅仅停留在是一个表达量相对较高较稳定的看家基因，对于分子层面相对表达量的一个重要参照而已，至于为什么要选这两种，还有没有其他的内参，人们的回答往往
gapdh基因跑琼脂糖电泳时用marker多少
gapdh基因跑琼脂糖电泳时用marker多少如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marke
做RTPCR内参的作用
你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢，由于之前RNA提取、反转等步骤，各个步骤
做RTPCR内参的作用是什么
你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢，由于之前RNA提取、反转等步骤，各个步骤
做RTPCR内参的作用是什么
你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢，由于之前RNA提取、反转等步骤，各个步骤
做RTPCR内参的作用是什么
你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢，由于之前RNA提取、反转等步骤，各个步骤
GFP抗体—绿色荧光蛋白的单克隆和多克隆标签抗体
GFP（Green Fluorescent Protein，绿色萤光蛋白）是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色萤光。GFP标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛 应用于各种细胞
抗体选择指南
抗体亲和层析原理是蛋白 A和蛋白 G对不同来源的IgG的Fc-区具有高度亲和性和特异性。这些蛋白被固定在我们的许多填料上，产生了从腹水、细胞培养上清液和血清中分离IgG和IgG亚类的极好方法。关于抗体亲和纯化的全部产品系列，见下页抗体亲和填料和层析柱选购指南。 蛋白A (Protein
流式抗体选择
很多朋友面对各种各样颜色的流式抗体，在选择及搭配上就犯了难，在此我们需要了解下流式细胞仪的各个激发光及各个接收通道是如何工作的、常见的荧光素有哪些、这些荧光的特性是什么样的。了解了这些，选择抗体和搭配不同的颜色就变得非常简单了。我们再回过头来看看流式细胞仪的原理，熟悉一下流式细胞仪的光路系统。从这张
蛋白质印迹（western－blot）技术实验步骤
免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（western blot），它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹（western blot）具有SDS-
关于抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气。在我们实验室western blot实验历程里，我们用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。 进口抗体一般不会出现闪失：Abca
如何根据研究的样本类型和实验条件选择合适的内参基因？
根据研究的样本类型和实验条件选择合适的内参基因可以考虑以下几个方面：样本类型：肿瘤组织：某些肿瘤可能会改变一些常见内参基因的表达，例如在某些癌症中 GAPDH 的表达可能不稳定。此时可以考虑选择 β-actin 或 18S rRNA 等。血液样本：由于血液中细胞成分的复杂性，可能需要选择在不同血细胞
甘油醛3磷酸脱氢酶的基本信息介绍
该酶是糖酵解反应中的一个酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。该酶基因为管家（house keeping）基因，几乎在所有组织中都高水平表达，在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的，且不受含有的部分识别位点、佛波脂等的诱导物质的影响而保持恒定，故被广泛用作抽提tota
甘油醛3磷酸脱氢酶的基本介绍
该酶是糖酵解反应中的一个酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。该酶基因为管家（house keeping）基因，几乎在所有组织中都高水平表达，在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的，且不受含有的部分识别位点、佛波脂等的诱导物质的影响而保持恒定，故被广泛用作抽提total
通过2－△△CT－方法,利用实时定量PCR技术分析相对基...（二）
要使△△CT计算方法有效，目标序列和内参序列的扩增效率必须相等。看两个反应是否具有相同的扩增效率的方法是看他们模板浓度梯度稀释後扩增产物△CT如何变化。图1 显示的是 cDNA 样品在 100 倍稀释范围内的实验结果。对于每一个稀释样本，都用GAPDH 和c-myc 特异的荧光探针及引物进行扩增。计
Myc抗体推荐—高品质Myc标签单克隆抗体
随着蛋白质组学的迅猛发展，重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等，可用于辅助目标蛋白的纯化，这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段（序列为：EQKLISEED
Western－Blot蛋白质磷酸化操作小贴士
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。 Azure君在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。 1、样本是否表达： 查阅资料或通过预实验确定。 2、对照设置：
Western－Blot蛋白质磷酸化操作小贴士
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。1、样本是否表达：查阅资料或通过预实验确定。2、对照设置：阳性和阴性对照。总蛋白抗体对照，对于特定时间的特定样