进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确,而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物,确实是有一定的不确定性的。所以,严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系,对实验结果分析是非常有用的。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础。特别表达量不高时,上样量的差别就很可能影响结果的分析。艾美捷向您推荐使用内参抗体来检测您的实验系统,或者校准您的实验结果。内参即是内部参照(Internal Control),对......阅读全文

进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子

进口内参抗体:在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?     要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子

βTubulin抗体—做出漂亮WB和IHC图片的内参

Tubulin即微管蛋白,是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin,其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体,是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa,其实际检测条带均在

常用内参抗体和标签抗体

Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生产高品质的对特定表位有特异性的小鼠单克隆抗体,与其他公司生产的同类产品相比,具有最高的灵敏度和最高的特异性,并且性价

western中目标抗体出现,内参出不来是为什么

那就算你的内参抗体有问题了,你们购买的哪家的产品呢?放置了多久,既然你自己的抗体可以出条带,那么组织提取的蛋白肯定是没有问题的,就只有是你的内参抗体有问题了

植物内参抗体该怎么选?

  先来说说为什么要用内参抗体?内参抗体的真的是必要的吗?  我举个例子,印度人和韩国人谁更富有?那还用说,当然是韩国人富有。  可是分明印度的GDP更高,为什么说韩国人更富有呢?  那怎样实现呢,如果我们能数一数细胞,不同的泳道上同样数量的细胞是最好的,可是这实现不了。这时候我们就需要一个大致能代

核内参PCNA抗体用于细胞核内参的PCNA单抗

增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系统性红斑狼疮)患者的血清中首次发现并命名,因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质,在细胞核内合成,并存在于

线粒体内参抗体—克隆号为14Y2的COX-IV单克隆抗体

细胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase,简称COX)是一种异源寡聚酶,通常含有13个亚基,定位于线粒体内膜,是线粒体呼吸链的酶复合物。细胞色素c氧化酶中形成催化中心的3个最大的亚基由线粒体DNA编码,其余10个亚基包括COX IV由细胞核内的基因组DNA编码。细胞色素

怎么选择适合的GAPDH内参抗体?

在Western Bloting实验中,在遇到总蛋白浓度测定不准确时候,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。  GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kD

如何挑选合适的βActin内参抗体?

如何选择合适的β-Actin抗体? 现在市场上对于内参抗体选择是比较多,但是也需要遵循一定的原则,那怎么去找到适合自己实验的β-Actin抗体呢?首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-

GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择

在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组

βActin抗体推荐—Abbkine高效价的BetaActin内参抗体

Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,其余两种广泛分布于各种组织中,包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达

为什么选择组蛋白H3为细胞核的内参指标?

为什么选择组蛋白H3为细胞核的内参指标呢?当实验样品中只是核蛋白,而不是细胞总蛋白提取液时,可以用组蛋白H(Histone H),或者增殖细胞核抗原(PCNA)等为核内参抗体。除了这些,其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考

real-time-PCR实验为什么要使用内参基因

这个是根据定量PCR算法决定的,如果是相对定量,就需要内参,内参主要是使样品均一化,你做实验的时候,可能提取RNA时所用的样品是相同的,反转录时所用的mRNA的量是相同的,做定量PCR时所加的cDNA量也是相同的。但是你的样品是新长的部分,还是老的部分?反转录时是加相同的体积还是相同打质量,这些对结

如何选择Lamin-B1抗体?

Lamin B1是一种蛋白质,在人类由LMNB1基因编码,核纤层由位于内核膜旁边的蛋白质的二维基质组成,层系蛋白家族构成基质并在进化过程中高度保守的。在有丝分裂过程中,板矩阵是可逆拆卸核纤层蛋白蛋白质磷酸化。核纤层蛋白的蛋白质被认为是参与核稳定、染色质结构和基因表达。脊椎动物核纤层蛋白包括两种类型,

GAPDH抗体|GAPDH抗体大全指导您购买合适的GAPDH抗体

GAPDH抗体大全——总有一款合适的GAPDH抗体在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体

你的-WB-内参选对了么?

你的 WB 内参选对了么? 关键词: 科研 WB 内参 2019-08-14 17:00 来源:CST 点击次数:19     要想底气十足地秀

PCR实验中内参基因的作用

1. 判断样品提取是否成功。假如你提取了总RNA然后再做逆转录得到cDNA,然后再去跑PCR发现没有结果,是不是表示样品中没有你的目的基因呢?答案是:不一定。要根据使用同一模板跑出的内参基因的结果才可判断。内参基因的CT在一个合理范围(比如20左右)的前提下,才能说明样品制备没问题,在这个前提下,做

WB检测中二抗的选择方法

WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问

WB检测中二抗的选择方法

  WB检测之二抗   二抗选择    二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二

Western实验中内参基因的选择及使用方法

相关专题western blot实验western blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦

Western实验中内参基因的选择及使用方法

Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现

PCR实验时需要设置阳性内参照的目的

保证你检测的每个样品的均一性,保证检测结果的可比性,如果某一个样品中对PCR扩增有干扰作用,那么就会体现在阳性内参照的结果上,阳性内参照做出来是阴性或者比正常阳性内参照的值要低。

荧光定量PCR实验中的内参基因

通常它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。内参基因通常是持家基因(house-keeping gene)因为其表达水平受环境因素影响较小,而且在个体各个生长阶段的几乎全部组织中持续表达变化很小。常用的内参基因包括GAPDH、β-actin(BETA-acti

Abbkine新上市标签内参直标抗体染料细节及优势

标签抗体和内参抗体在生命科学研究中被广泛使用,是WB, IF, IHC等实验必不可少的关键试剂,但尽管如此,研究者们还是需要为他们的实验配上一个合适二抗(HRP或者荧光基团),这不仅增加了实验试剂的采购成本,而且增加了额外的操作步骤和时间消耗,更增加了非特异性信号的潜在可能性。Abbkine凭借

PCR中的内参Ct值相差很大是为什么

不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,但至少可以说明目标基因表达非常低.

Western-blot如何进行实验质控?

WB实验总做不好,那么如何进行WB实验质控呢?做过WB实验的小伙伴都经历过成像时忐忑不安,出来结果时的彷徨无措,为什么条带没有出啦,为什么背景这么高,为什么受伤的总是我,看着旁边小伙伴漂亮的结果图,心生羡慕嫉妒,那么小编给大家整理总结了如何进行WB的质控和注意哪些检查点。蛋白样品:准备好裂解液后,使

Western-blot如何进行实验质控

  WB实验总做不好,那么如何进行WB实验质控呢?   做过WB实验的小伙伴都经历过成像时忐忑不安,出来结果时的彷徨无措,为什么条带没有出啦,为什么背景这么高,为什么受伤的总是我,看着旁边小伙伴漂亮的结果图,心生羡慕嫉妒,那么小编给大家整理总结了如何进行WB的质控和注意哪些检查点。   蛋白样品