杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究一

应用优势■两种具备独特选择性的杂化颗粒色谱柱(BEH130 C18和CSH130 C18)。■在使用最优浓度的HOAc调节流动相时,BEH130 C18和CSH130 C18获得的目标肽峰比使用0.1%TFA时更窄,分离度也更高。利用这一特性,可以通过更少的步骤获得含有药用反离子的肽。■BEH130 C18和CSH130 C18由细胞色素c的胰蛋白酶消化液进行质控测试。沃特世解决方案ACQUITY UPLC® H-ClassBio系统XSelect™CSH130 C18,5μmXBridge™BEH130 C18,5μmMassPREP™肽混合物关键词反相(RP),肽,乙酸(HOAc),表面带电杂化颗粒(CSH),CSH130 C18,BEH130 C18,制备型色谱,肽分离技术(PST)简介经证实,肽在研究中是非常有用的治疗剂和标记物。通常,为了实现这些用途,会通过制备型反相(RP)色谱对肽进行纯化。在大多数情况下,纯化出来的......阅读全文

解析C18液相色谱柱的维护保养

  液相色谱柱是色谱分析系统软件的“心血管”,因为被剖析试品品种繁多,加上试品栽培基质繁杂,色谱柱非常容易被强保存化学物质环境污染。这种强保存化学物质一般无法洗白,数次上样后,集聚在柱子端,阻塞筛板,乃至将会与填充料产生相互作用力造成填充料转性,这会造成柱效降低,分离度减少和峰型出现异常等状况。因此

液相色谱柱通论

选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱      了解色谱填料的物理和化学性

液相色谱柱通论

选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱      了解色谱填料的物理和化学性质。A填

柱填料和柱规格对C18色谱柱有哪些影响?

高效液相色谱(HPLC)法选择性高、灵敏度高、分析速度快,而且大部分可以溶解的药物能用该法分析,所以该技术已经成为药物分析的首要选择。以碳十八硅烷化学键合硅胶固定相(C18或ODS)的反相色谱出色地完成了液相色谱分析任务,而且与其他色谱相比,C18反相色谱有明显的优势,它可直接进样分析水溶性样品,因

液相出现倒峰的原因

  高效液相色谱,色谱柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰,走了好几针空白,每针的响应都不同,有的很高,有的又很低,但杂峰一直存在,不像是色谱柱里有杂质,用流动相冲洗后依然出现此问题,什么原因?

选择液相色谱柱简单思路

1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质,诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱      了解色谱填料的物理和化学性质。A填料基质硅胶基质:纯度高成本低

液相出现倒峰是怎么回事

  高效液相空白色谱柱出峰的原因?  高效液相色谱,色谱柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰,走了好几针空白,每针的响应都不同,有的很高,有的又很低,但杂峰一直存在,不像是色谱柱里有杂质,用流动

液相出现倒峰原因解析

  高效液相空白色谱柱出峰的原因?  高效液相色谱,色谱柱是Kromasil C18(15cm*5Um),流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水,走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰,走了好几针空白,每针的响应都不同,有的很高,有的又很低,但杂峰一直存在,不像是色谱柱里有杂质,用流动

气相色谱柱如何进行安装和维护?

气相色谱柱是气相色谱仪的核心部分,所以色谱柱的使用、保养与维护的内容就很重要,本文主要介绍关于气相色谱柱的相关知识。 一、气相色谱柱的安装 首先,当然是色谱柱的安装。安装色谱柱可以说是气相色谱使用的入门级操作,大家一般情况下都是驾轻就熟的。但是,有几个问题还是要提起注意: 1

蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南(九)

胰蛋白酶水解分析。蛋白质水解产生的肽段利用反相高效液相色谱分析,流动相采用含TFA体系(参见第15-17页),以起始浓度约5%的乙腈梯度洗脱(乙腈起始浓度低于5%可能导致较早洗脱出肽的色谱的不可重现性),乙腈浓度逐渐升至70%(参见图31)。梯度洗脱的时间取决于待水解蛋白的大小。大分子蛋白比小分子蛋

液相色谱仪在各领域应用介绍

液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱及液-固色谱。由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。液相色谱仪在医药方面的应用1、分离分析药物的组合含量:  由于一种药剂常含有多组分,液相色谱仪是既能分离又

高效液相色谱c18柱的洗柱方法是什么

第一、安捷伦的色谱柱有很多种,所以要分清类型去冲洗。第二、作为普通C18柱,尤其是硅胶基质的普通C18柱,对酸碱盐以及水,都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过多(除了带AQ的纯水柱,一般各家品牌都有这款防水柱)我个人认为只要超过80%的水的流动相,都会造成C18的寿命缩短。所以做高水相的流动相分

是真是假│空气会彻底毁灭一根HPLC色谱柱?

  高效液相和超高效液相色谱柱之十大误区  误区10:空气会彻底毁灭一根HPLC色谱柱——假!  当色谱柱不与色谱仪连接的时候,用户需确保色谱柱被紧紧地密封。事实上,实际的应用中是,即使柱的端部进入了少量的空气也不要紧。因为当你将色谱柱连接到色谱仪上使用时,在系统初始加压阶段,在很短的时间

带你走出HPLC和UHPLC色谱柱的十大误区(一)

色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成,是装填有固定相用以分离混合组分的柱管,多为金属或玻璃制作,有直管形、盘管形、U形管等形状。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类,液相色谱通常均采用填充柱,色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。误区1

液相色谱柱参数详细解析

本文主要介绍液相色谱柱参数,分为物理性质参数和化学性质参数。   一、液相色谱柱物理性质参数 1、柱长,内径 如250*4.6mm。一般柱长在2—250mm,柱越长,分离度越高,但柱压更高,分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比,所以一昧增加柱长并不是最有效的分离

HPLC和UHPLC-色谱柱的十大误区

  误区10 空气会彻底毁灭一根HPLC色谱柱  当色谱柱不与色谱仪连接的时候,用户需确保色谱柱被紧紧地密封。事实上,实际的应用中是,即使柱的端部进入了少量的空气也不要紧。因为当你将色谱柱连接到色谱仪上使用时,在系统初始加压阶段,在很短的时间内空气就会被溶剂冲刷掉。所以,不要因为色谱柱进入了空气而认

常规反相色谱柱安装及使用维护指南

何谓常规反相色谱柱?在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如C18、C8、C4或苯基等键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中zui常使用的分离模式,而C18柱是zui常使用的反相色谱柱之一。新色谱柱开启和安装的推荐步骤:使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:        颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。        颗粒分布越宽

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标详解

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。颗粒分布越宽,渗透性差,柱效低。二、颗粒形状:

SunFire色谱柱介绍

沃特世公司推出的SunFire C 18和 C8 色谱柱为行业内的硅胶基质反相 C 18  和C8 柱建立了性能新标杆,沃特世公司多年来在填料颗粒合成和键合封尾技术的研究及在柱产品开发方面的努力,造就了SunFire色谱柱的卓越性能。 而这些性能,完美符合今天食品安全检测技术的特点与需求。 

液相色谱柱流动相的使用注意事项

  (1)由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。  (2)对于正相柱推荐使用沸程为30-60 ℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。  (3)含水流动相最好

wook500液相色谱柱流动相的配制

  wook500液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用,是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,在高压泵作用下,快速将

wook500液相色谱柱流动相的配制

液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用,是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液的

色谱柱使用寿命延长的方法(二)

(4)碳含量即填料中的含碳量。传统的测量技术是将填料加热到碳氢键断裂,然后通过测定损失的重量或形成的二氧化碳来计算碳含量。可以通过增加碳键的长度或增加键合密度来增加碳含量。碳含量增加,柱子的保留值增加。键合相的色谱行为与键合密度有关,也与硅胶的密度及填料的表面积有关,填料的密度越高,填柱所需的硅胶量

高效液相色谱法用于农药残留量的测定

目前蔬菜水果中不同种类农药的残留测定方法主要是气相色谱法(GC)或气相色谱-质谱法(GC-MS),但 GC 对沸点高或热稳定性差的农药需进行衍生化处理,这样就不可避免地增加了样品预处理的难度,也使它的应用受到一定程度的限制。李永新等建立了同时测定蔬菜水果中12种农药残留的反相高效液相色谱分析方法。将

phenyl苯基色谱柱应用与性能

phenyl苯基色谱柱具有苯基官能团π电子色谱柱。对诸如芳香族化合物分离,除疏水性相互作用外,还有固定相和溶质之间π-π电子间相互作用的帮助,因此显示出不同于包含ODS在内的烷基硅胶基质固定相的分离特性。phenyl苯基色谱柱的直链YMC液相色谱柱反相柱(C18、 C8和C4)相比,有π电子作用的苯

C18液相色谱柱使用注意事项

 1.看清说明书后再使用   色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚,因此色谱柱的说明书一定要看清楚,当然也包括说明书上建议的维护保养规定,对我们都非常的有用。对于反相柱来说,溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因为正相柱除了可以适用正相系统,也可以适用反相系统,因此一定要看清楚,对于你的方法来

C18色谱柱及琛航C18色谱柱选柱技巧

液相色谱中使用C18柱的反相色谱法以生物体相关物质为分析对象,能够满足主要研究领域的需要,使用钗惴骸U饫锝允谐∩掀放品倍嗟?lt;/SPAN>C18柱和本公司的C18柱作下简单介绍,以及选柱的一些小技巧。如下图所示,这是C18柱总体的键合思路。将具有烷基链的硅烷化剂与硅胶表面的硅醇基反应,因为使

C18液相色谱柱的死体积怎么测得

计算一下,π(2.3)*2*250,大约是4.2ml左右,不过里面会有大约2.0ml左右的死体积。这个数值因为不同厂家的色谱柱而不同。如果计算可以按照4.2*30计算,大约126ml。 不过一般如果是冲柱子的话,没必要这么久的时间。

实验室分析方法反向液相色谱法原理及发展

反相液相色谱(RPLC)是分离大多数常规样品的首选分离模式,它比其他液相色谱分离模式的适用范围更宽、更方便。据统计,在高效液相色谱法中,70%~80%的样品可采用反相键合相色谱法完成。极性、非极性,水溶性、油溶性,离子性、非离子性,小分子、大分子,以及具有官能团差别或分子量差别的同系物,均可采用反相