分光光度法与衡量法在移液器校准中的优劣探讨(二)

在开始讨论此话题之前,我们应先简单了解下什么是移液器,其功能是什么,以及在校准过程中,哪些因素会影响其校准结果。移液器,顾名思义,即是可以实现液体转移功能的仪器,当然,目前的移液器不仅仅能够实现液体的转移,而且还要能够实现转移过程中的精确计量,因此,移液器的校准,便是对其基础功能以及计量结果的检验。移液器的液体转移功能,可以通过视觉观察来判断,但其计量的结果,则需要通过本文即将探讨的方法来检测、验证。目前,针对移液器计量结果的检测、验证,主流或主要的方法是采用衡量法,有时也被称之为“称重法”。之所以被通称为“称重法”是因为该方法的原理是通过电子天平对移液器计量的一定容量的液体进行称重,并以此数据为依据从而推断出移液器计量结果的实际值。依据此原理,显然移液器的校准过程极容易受到如下因素的影响。1 温度,因为液体的体积是会受温度的影响而改变的,因此,一定质量的液体,在不同的温度下,其体积也是不同的,这就导致利用移液器计量......阅读全文

常用生化实验技术:分光光度法1

有色溶液对光线有选择性的吸收作用,不同物质由于其分子结构不同,对不同波长光线的吸收能力也不同,因此,每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液,虽对可见光无吸收作用,但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光光度法主要是指利用物质特有的吸收光谱来鉴定物质性质及含量的技术,其理论依据是Lamb

关于分光光度法的定量方法介绍

  利用分光光度法对物质进行定量测定,主要有以下几种方法:  1、标准管法  将待测溶液与已知浓度的标准溶液在相同条件下分别测定A值,然后按下式求得待测溶液中物质的含量。  CT=(AT/AS)*CS  2、标准曲线法  先配制一系列浓度由小到大的标准溶液,分别测定出它们的A值,以A值为横坐标,浓度

紫外分光光度法的仪器校正检定

  紫外-可见分光光度法是在190~760nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长

分光光度法测定水中的氨氮

实验方法: 1、 吸取50.0ml澄清水样于50ml比色管中,向水样管中加入1ml酒石酸钾钠溶液(500g/L),混匀。 2、 加入1.0ml纳氏试剂,混匀,后放置10分钟。3、 于420nm波长下,用1cm比色皿,以纯水作参比,测定吸光度。4、 计算:CNH3-N=M/V CNH

原子吸收分光光度法分析的特点

1、选择性强 由于原子吸收谱线仅发生在主线系而且谱线很窄线重叠几率较发射光谱要小得多所以光谱干扰较小选择性强而且光谱干扰容易克服。在大多数情况下共存元素不对原子吸收光谱分析产生干扰。由于选择性强使得分析准确快速。 2、灵敏度高原子吸收分光光度法分析是目前最灵敏的方法之一。火焰原子吸收的相对灵敏度为u

纳氏试剂分光光度法配制试剂

配制试剂用水均应为无氨水3.1 无氨水可选用下列方法之一进行制备:蒸馏法:每升蒸馏水中加0.1mL硫酸,在全玻璃蒸馏器中重蒸馏,弃去50mL初馏液,按取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存.离子交换法:使蒸馏水通过强酸型阳离子交换树脂柱.3.2 1mol/L盐酸溶液.3.3 1mol/L氢氧化纳

快速消解分光光度法测COD特点

快速消解分光光度法综合了上述各种方法的优点,是指采用密封管作为消解管,取小计量的水样和试剂于密封管中,放入小型恒温加热皿中,恒温加热消解,并用分光光度法测定COD 值;密封管规格为φ16mm 长度100mm~150 mm壁厚度为1.0mm~1.2 mm 的开口为螺旋口,并加有螺旋密封盖。该密封管具有

什么叫冷原子吸收分光光度法?

一般AAS不带石墨炉的空气乙炔焰温度约2500摄氏度,做Hg的时候火焰对其共振线的屏蔽作用很强烈,所以灵敏度(单位量的物质得到的响应信号强度)很差。所谓冷原子吸收也是相对的冷(约300~600摄氏度),是利用强还原剂与Hg生成气态氢化物在“冷”的温度就分解,产生自由原子,完成原子化过程,灵敏度比较高

二氯化锡分光光度法测定铑

一、方法要点分析钯的滤液,加盐酸及硝酸蒸干破坏丁二酮肟,在2mol/L的盐酸溶液中加二氯化锡与铑(Ⅲ)加热时逐渐生成红色,于波长475nm处测量吸光度。二、试剂与仪器(1)盐酸:(1+5)的溶液。(2)硝酸。(3)氯化亚锡溶液(25%):称取25g氯化亚锡溶于17mL浓盐酸中,用水稀释至100mL,

紫外分光光度法测定蛋白质

  1 原理:  pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。  2 试剂:  (1) 0.1mol/l

分光光度法的实验原理是什么

  物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。  由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的最大实收波长,形成最大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。

原子吸收分光光度法的特点简介

  (1)灵敏度高  火焰原子吸收分光光度法测定大多数金属元素的相对灵敏度为1.0×10-8~1.0×10-10g·mL-1,非火焰原子吸收分光光度法的绝对灵敏度为1.0×10-12~1.0×10-14g。这是由于原子吸收分光光度法测定的是占原子总数99%以上的基态原子,而原子发射光谱测定的是占原子

摩尔消光系数分光光度法介绍

分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然了解到Bouguer早在1729年已提出上述关系的数学表达式,但通常认为Lambert于1760年最早发现表达式,

分光光度法测定食品中甜蜜素

1)测定原理在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠反应生成环己醇亚硝酸酯,与磺胺重氮化后再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色染料,在550nm波长处测其吸光度,与标准比较定量。2)试剂①三氯甲烷。②甲醇。③透析剂:称取0.5g二氯化汞和12.5g氯化钠于烧杯中,以0.01mol/L盐酸溶液定容至100mL。

原子吸收分光光度法的特点介绍

  ①灵敏度高:常规分析法对大多数元素可达到ppm级;利用特殊手段可达到ppb级的浓度范围;  ②精密度好:一般测定RSD约为1%~3%,利用特殊方法精密度可小于1%。  ③应用范围广:周期表中70多种元素可利用该法测定:  ④干扰少:原子吸收光谱为分立的锐线光谱,且谱线重叠性少,干扰性小;  ⑤试

原子吸收分光光度法的使用要求

  所用仪器为原子吸收分光光度计,它由光源、原子化器、单色器、背景校正系统、自动进样系统和检测系统等组成。  一、 光源:常用待测元素作为阴极的空心阴极灯。  二.、原子化器 主要有四种类型:火焰原子化器、石墨炉原子化器、氢化物发生原子化器及冷蒸气发生原子化器。  (1)火焰原子化器:由雾化器及燃烧

原子吸收火焰分光光度法,怎么用

关于原子吸收分光光度法的定量操作如下一、样品制备样品一定要充分干燥,避免污染,并粉碎成一定粒度。1.标准溶液的制备用纯度大于99.99%的金属配制成浓度较大的贮备液,再由标准贮备液配制成标准工作液。注意标准溶液组成尽可能与未知试样接近2.被测试样的处理液体试样若浓度过大须稀释,注意稀释后黏度与水接近

双波长分光光度法测定的依据

双波长采用的原则是,被测物的化学指标(也有可能是物理指标)随波长1有线性变化,随波长2无变化,则用两个波长的数值相除,就可以得到被测物指标的相对值。一般来说,波长2的值叫做背景值,波长1的值叫做变量值。

红外分光光度法的原理和应用

红外分光光度法是当物质分子吸收- 记波长的光 能,能引起分子振动和转动能级跃迁,产生的吸收光谱一般在2. 5〜25um的中红外光 区,称为红外分子吸收光谱,简称红外光谱。利用红外光谱对 物质进行定性分析或定量测定的方法称红外 分光光度法。由于物质分子发生振动和转动 能级跃迁所需的能量较低,几乎所有的

萃取分光光度法检测甲萘醌的介绍

  研究了维生素K3(vitaminK3,VK3)与碱性染料丁基罗丹明B(butyl rhodamine B,BRB)、乙基紫(ethyl violet,EV)和亚甲基蓝(methylene blue,MB)形成离子对缔合物的反应,确定了反应的最佳条件。建立了测定VK3含量的简单、快速、选择性好和灵

氟尿嘧啶的测定—分光光度法

方法名称: 氟尿嘧啶的测定—分光光度法应用范围: 本方法采用分光光度法测定氟尿嘧啶的含量。本方法适用于氟尿嘧啶。方法原理: 取本品适量,加0.1mol/L盐酸溶液制成每1mL中约含10μg的溶液,照紫外-可见分光光度法,在265nm波长处,测定吸光度,按C4H3FN2O2的吸收系数为552计算,即得

原子吸收分光光度法干扰及消除

  一. 光谱干扰    1. 在测定波长附近有单色器不能分离的待测元素的邻近线 ——减小狭缝宽度    2. 灯内有单色器不能分离的非待测元素的辐射 ——高纯元素灯    3. 待测元素分析线可能与共存元素吸收线十分接近——另选分析线或化学分离   二. 电离干扰   待测元素在高温原子

原子吸收分光光度法有哪些方法?

原子吸收分光光度法是基于元素所产生的原子蒸气中待测元素的基态原子,对所发射的特征谱线的吸收作用进行定量分析的一种技术。在一定条件下,原子的吸光度同原子蒸气中待测元素基态原子的浓度成正比。常用的定量方法有:标准曲线法、标准加入法、内标法。1.标准曲线法配制一系列浓度不同的标准溶液进行测定,以吸光度为纵

常用生化实验技术:分光光度法2

3.朗伯—比尔定律如果同时考虑吸收层的厚度和溶液浓度对光吸收的影响,则必须将朗伯定律和比尔定律合并起来,得=KLCA=KLC即吸光度与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比,这就是朗伯—比尔定律。在上式中,若L用厘米表示,C用克/升表示,则比例常数K称为吸光系数,其值取决于入射的波长,溶液的性质和温度等

分光光度法的误差来源有哪些?

误差来源主要有两方面,一是所用仪器提供的单色光不纯,因为单色光不纯时,朗伯比耳定律中吸光度和浓度之间的关系偏离线性,二是吸光物质本身的化学反应,其结果同样引起朗伯—比耳定律的偏离。

什么是分光光度法的标准曲线

分光光度法的标准曲线定义:标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。

原子吸收分光光度法元素分析概论

原子吸收分光光度法由于其本身所具有的许多优点,已经在冶金、地质、化工、农业、医药环保等各个领域获得了广泛的应用。尽管预处理的方法因试样性质不同而不同,但无论试样是固体还是液体,是无机物还是有机物,都不妨碍用原子吸收分光光度法来进行测定。元素周期表上的大多数元素都可以用原子吸收分光光度法进行测定。1.

红外分光光度法的谱图解析

外可分远中近,中红特征指纹区,1300来分界,注意横轴划分异。看图要知红外仪,弄清物态液固气。样品来源制样法,物化性能多联系。识图先学饱和烃,三千以下看峰形。2960、2870是甲基,2930、2850亚甲峰。1470碳氢弯,1380甲基显。二个甲基同一碳,1380分二半。面内摇摆720,长链亚甲亦

原子吸收分光光度法的定量依据

2.3 原子吸收光谱分析的定量方法原子吸收光谱分析是一种动态分析方法,用校正曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法,如为多通道仪器,可用内标法定量。在这些方法中,标准曲线法是最基本的定量方法,是其他定量方法的基础。2.3.1 标准曲线法标准曲线法(standard curv

紫外分光光度法测定水中的油类

一、实验目的   加深对环境中油类污染的认识,掌握油类的分析方法和技术,学会使用紫外分光光度计。  二、实验原理  水中的油类来自较高级生物或浮游生物的分解,也有来自工业废水和生活污水的污染。漂浮于水体表面的油,影响空气-水体界面中氧的交换。分散于水中的油,部分吸附于悬浮微粒上,或