醋酸纤维薄膜电泳分离血清的蛋白质(一)
实验原理 带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋白质分子小而带电荷多者,泳动速度快;反之,则泳动速度慢。因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带,经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。 以醋酸纤维薄膜(CAM)为支持介质,电泳分离后经染色处理,可展示出清晰的蛋白质电泳图谱。由于染色时染料与蛋白质的结合与蛋白质的量成正比,因此将各蛋白质带剪下,分别用一定量的NaOH稀溶液洗脱下来,即可进行比色,测定出各蛋白质区带......阅读全文
醋酸纤维素薄膜电泳法
仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。 2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5m
醋酸纤维素薄膜电泳介绍
醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体 有以下优点:①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它 对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无 拖尾现象;④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品
电泳技术基本知识和种类
电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。电泳现象早在1890年就
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳条带为什么有宽有窄
因为各种蛋白质的百分含量不同,所以粗细不同。颜色深浅由于含量以及蛋白对染色剂亲和力不同影响。血清白蛋白和球蛋白正常值(表中数字为所占%)各部分醋酸纤维 蛋白质薄膜电泳纸上电泳白蛋白62~71 54~61球蛋白α1 3~4 4~6α2 6~10 7~9β7~11 10~13γ9~18 17~22。白蛋
关于醋酸纤维素薄膜电泳—加样量的基本介绍
醋酸纤维素薄膜电泳—加样量:加样品的多少与电泳条件、样品的性质、染色方法与检测手段灵敏度密切相关。作为一般原则,检测方法越灵敏,加样量则越少,对分离更有利。如加样量过大,则电泳后区带分离不清楚,甚至互相干扰,染色也较费时。如电泳后用洗脱法定量时,每厘米加样线上需加样品0.1μl—0.5μl约相当
电泳技术
电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具 有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷, 在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在 蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。 电泳现象早在1
醋-酸纤维素薄膜电泳技术介绍
醋酸纤维素薄膜电泳是利用醋酸纤维素薄膜做固体支持物的电泳技术。醋酸纤维薄膜具有匀一的泡沫状结构(厚约 120 μ m ),渗透性强,对分子移动无阻力,用它做区带电泳的支持物,用样量少,分离清晰,无吸附作用,应用范围广和快速简便 , 且染色后的薄膜可用乙醇和冰醋酸溶液浸泡透明,透明后的薄膜便于保存和定
关于醋酸纤维素薄膜电泳法的介绍
(1) 醋酸纤维素薄膜 取醋酸纤维素薄膜,裁成2cm×8cm的膜条,将无光泽面向下,浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夹于滤纸中,轻轻吸去多余的缓冲液后,将膜条无光泽面向上,置电泳槽架上,经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。 (2) 点样与电泳 于膜条上距负极端2cm处,
关于醋酸纤维素薄膜电泳的特点介绍
1.(1)醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少,无“拖尾”现象,染色后背景能完全脱色,各种蛋白质染色带分离清晰,因而提高了测定的精确性。 (2)快速省时。由于醋酸纤维薄膜亲水性较滤纸小,薄膜中所容纳的缓冲液也较少,电渗作用小,电泳时大部分电流是由样品传导的,所以分离速度快,电泳时间短,一般电泳45
醋酸纤维薄膜电泳(cellulose-acetate-membrane-electrophoresis...
实验原理醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法。它具有简便、快速、样品用量少,应用范围广,分离清晰,没有吸附现象等优点。目前已广泛用于血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、糖蛋白、多肽、核酸、同工酶及其他生物大分子的分析检测,是医学和临床检验的常规技术。本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血
临床蛋白电泳及进展
分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。蛋白质为两性电解质,在不同pH溶液中带不同的电荷,从而在直流电场中能够泳动,这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术,并成功地将血清蛋
临床蛋白电泳及进展/基本知识/概述
分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。蛋白质为两性电解质,在不同pH溶液中带不同的电荷,从而在直流电场中能够泳动,这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术,并成功地将血清蛋
临床蛋白电泳及进展/基本知识/概述
分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。蛋白质为两性电解质,在不同pH溶液中带不同的电荷,从而在直流电场中能够泳动,这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术,并成功地将血清
哪种染料能用于血清脂蛋白电泳分析实验中
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳与滤纸相比较,有以下优点 。(1)醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少,无“拖尾”现象,染色后背景能完全脱色,各种蛋白质染色带分离清晰,因而提高了测定的精确性。(2)快速省时.由于醋酸纤维素薄膜亲水性较滤纸小,薄膜中所容纳的缓冲液也较少,电渗作用小,电泳时大部分电流是由样品传导
蛋白电泳脱色效果如何?
蛋白电泳nacl脱色效果怎么样 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳与滤纸相比较,有以下优点 。 (1)醋酸答纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少,无“拖尾”现象,染色后背景能完全脱色,各种蛋白质染色带分离清晰,因而提高了测定的精确性。 (2)快速省时.由于醋酸纤维素薄膜亲水性较滤纸小,薄膜中所容纳的缓冲液
电泳现象的研究历史
电泳(Electrophoresis)是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象称为电泳。大分子的蛋白质,多肽,病毒粒子,甚至细胞或小分子的氨基酸,核苷等在电场中都可作定向泳动。1937年Tiselius成功地研制了界面电泳仪进行血清蛋白电泳,它是在一U型管的自由溶液中进行的,电泳后用光学系统使各种蛋
电泳技术的研究历史
电泳(Electrophoresis)是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象称为电泳。大分子的蛋白质,多肽,病毒粒子,甚至细胞或小分子的氨基酸,核苷等在电场中都可作定向泳动。1937年Tiselius成功地研制了界面电泳仪进行血清蛋白电泳,它是在一U型管的自由溶液中进行的,电泳后用光学系统使各种蛋
醋酸纤维薄膜电泳和琼脂糖凝胶电泳的区别
醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。已经广泛用于血清蛋白,血红蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋白,甲胎蛋白,类固醇激素及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单,快速等优点。 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、
电泳仪的研发背景相关介绍
1937年,瑞典生化学家Tiselius集前人百余年探索电泳现象之大成,发明了Tiselius电泳仪,在此基础上建立了研究蛋白质的自由界面电泳方法,利用该法首次证明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白组成,并因此于1948年获得阿果奖。随后电泳技术的发展突飞猛进,1949年,Ricketls
电泳技术及其临床应用新进展
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验,此后各种电泳技术及仪器相继问世,广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和/或鉴定。近年来,先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验|地带网搜
关于醋酸纤维素薄膜电泳—缓冲液的选择
醋酸纤维薄膜电泳常选用pH8.6巴比妥溶液,其浓度为0.05mol/L—0.09mol/L。选择何种浓度与样品及薄膜的薄厚有关。选择时,先初步定下某一浓度,如电泳槽两极之间的膜长度为8 cm—10cm,则需电压25V/cm膜长,电流强度为0.4mA/cm—0.5mA/cm膜宽。当电泳达不到或超过
关于醋酸纤维素薄膜电泳的注意事项介绍
1、醋酸纤维素薄膜电泳— 电量的选择 电泳过程应选择合适的电流强度,一般电流强度为0.4mA/cm—0.5mA/cm宽膜为宜。电流强度高,尤其在温度较高的环境中,可引起蛋白质变性或由于热效应引起缓冲液中水分蒸发,使缓冲液浓度增加,造成膜片干涸。电流过低,则样品泳动速度慢且易扩散。 2、醋酸纤
光学功能薄膜用三醋酸纤维素--醋化值的测定
GB/T 37384-2019 光学功能薄膜用三醋酸纤维素范围本标准规定了光学功能薄膜用三醋酸纤维素(TAC)的要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输、贮存。本标准适用于光学功能薄膜用三醋酸纤维素。要求外观: 白色颗粒或白色疏松纤维。光学功能薄膜用三醋酸纤维素应符合表1中的技术要求。试验方法醋化
光学功能薄膜用三醋酸纤维素--醋化值的测定
本标准规定了光学功能薄膜用三醋酸纤维素(TAC)的要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输、贮存。 本标准适用于光学功能薄膜用三醋酸纤维素。 要求 外观: 白色颗粒或白色疏松纤维。 光学功能薄膜用三醋酸纤维素应符合表1中的技术要求。 试验方法 醋化值的测定
关于醋酸纤维素薄膜电泳的补充分析介绍
根据样品理化性质,从提高电泳速度和分辨力出发选择缓冲液的种类,pH和离子强度。选择好的缓冲液最好是挥发性强,对显色或紫外光等观察区带没有影响,若样品含盐量较高时,宜采用含盐缓冲液。例如血清蛋白电泳可选用pH8.6的巴比妥缓冲液或硼酸缓冲液;氨基酸的分离则可选用pH7.2的磷酸盐缓冲液等。电泳时先
光学功能薄膜用三醋酸纤维素--醋化值的测定
范围 本标准规定了光学功能薄膜用三醋酸纤维素(TAC)的要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输、贮存。 本标准适用于光学功能薄膜用三醋酸纤维素。 要求 外观: 白色颗粒或白色疏松纤维。 光学功能薄膜用三醋酸纤维素应符合表1中的技术要求。 试验方法 醋化值的测定 原理
电泳分析常用方法醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg 的蛋白质可得到
血清蛋白醋酸纤维素膜电泳
原理胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷,带有电荷的胶体颗粒又可以借静电吸引力在电场中泳行,带正电荷者泳向负极,带负电荷者泳向正极,此种现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等电点。各种蛋白质在各自的等电点时呈电中性状态,它的分子所带正电荷量与所带负电荷量相等。将蛋白质置于比其等电点较高的PH缓冲液
血清蛋白醋酸纤维素膜电泳
原理胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷,带有电荷的胶体颗粒又可以借静电吸引力在电场中泳行,带正电荷者泳向负极,带负电荷者泳向正极,此种现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等电点。各种蛋白质在各自的等电点时呈电中性状态,它的分子所带正电荷量与所带负电荷量相等。将蛋白质置于比其等电点较高的PH缓冲液
醋酸纤维素薄膜电泳法的操作法的介绍
(1) 醋酸纤维素薄膜 取醋酸纤维素薄膜,裁成2cm×8cm的膜条,将无光泽面向下,浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夹于滤纸中,轻轻吸去多余的缓冲液后,将膜条无光泽面向上,置电泳槽架上,经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。 (2) 点样与电泳 于膜条上距负极端2cm处,