醋酸纤维薄膜电泳分离血清的蛋白质(一)

实验原理 带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋白质分子小而带电荷多者,泳动速度快;反之,则泳动速度慢。因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带,经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。 以醋酸纤维薄膜(CAM)为支持介质,电泳分离后经染色处理,可展示出清晰的蛋白质电泳图谱。由于染色时染料与蛋白质的结合与蛋白质的量成正比,因此将各蛋白质带剪下,分别用一定量的NaOH稀溶液洗脱下来,即可进行比色,测定出各蛋白质区带......阅读全文

醋酸纤维薄膜电泳分离血清的蛋白质(一)

实验原理        带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质

实验原理        带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质

实验概要1. 掌握醋酸纤维素薄膜电泳的原理和操作方法;2. 了解醋酸纤维素薄膜电泳所分离的血清蛋白质的各带谱及其临床意义。实验原理         带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,

醋酸纤维薄膜电泳分离血清的蛋白质(二)

实验步骤1、电泳槽的准备          将巴比妥-巴比妥钠缓冲液加入电泳槽中(两侧槽内注入等量的缓冲液),调节两侧内的缓冲液,使其在同一水平面,液面与支架的距离约为2~2.5cm。支架宽度到恰好适合CAM的长度,用3~4层滤纸或4层纱布搭桥。2、CAM准备         取醋纤薄膜(2

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质实验方法(一)

实验原理带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋的白质实验(一)

实验原理带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳极泳动速度也不同。蛋

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质实验方法(二)

6、染色    通电完毕,立即取出薄膜直接浸入丽春红S或氨基黑10B染色液中,染色5~10分钟。7、漂洗 至少准备3~4个漂洗皿,装入漂洗液。从染色液中取出薄膜条并尽量沥去染色液,按顺序投入漂洗液中反复漂洗,直至背景漂白为止。此时清晰可见5条色带。待干。8、定量    (1)洗脱比色法  取六支试管

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋的白质实验(二)

4、平衡  将已点样的薄膜加样面朝下,点样端置于阴极端,将膜条紧贴于电泳槽支架的盐桥上并保持平直,桥的另一端垂入缓冲液中,盐桥将膜的两端与缓冲液连通,加上槽盖平衡5min后通电电泳。5、电泳   正确联接电泳槽与整流器对应的正负极,点样侧接负极,另一侧接正极。开启电源通电。调节电压10V~15V/c

血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳

【原理】以醋酸纤维薄膜为支持物,用缓冲液润湿后,将微量血清样品点于膜上,再在电泳槽中进行电泳,可将血清蛋白分离成清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白五条区带,将薄膜置于染色液中,使蛋白质固定并染色后,可看到清晰色带,也可将色带分别于碱溶液中进行定量测定,再计算血清中各种蛋白质的含量百分数。在正常情况下,

血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳

【原理】以醋酸纤维薄膜为支持物,用缓冲液润湿后,将微量血清样品点于膜上,再在电泳槽中进行电泳,可将血清蛋白分离成清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白五条区带,将薄膜置于染色液中,使蛋白质固定并染色后,可看到清晰色带,也可将色带分别于碱溶液中进行定量测定,再计算血清中各种蛋白质的含量百分数。在正常情况下,

醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白原理和实验方法

一、原理醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维素薄膜作为支持物的电泳方法。带电颗粒在电场力作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中,则蛋白质将带正电荷而向负极移动。反之,则向正极移动。因为蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳

原 理以醋酸纤维薄膜为支撑物,浸入pH8.6的缓冲液后吸去多余液体。将微量血清点于膜上,电泳后,将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色,洗去多余染料。操 作1.准备与点样(1)将薄膜切成2.5×8cm的小片。在薄膜无光泽面(正面)的一端约2cm处用铅笔划一线,以标明点样位置。同时在一端边沿写上实验者的学

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳

原理以醋酸纤维薄膜为支撑物,浸入pH8.6的缓冲液后吸去多余液体。将微量血清点于膜上,电泳后,将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色,洗去多余染料。操作1.  准备与点样(1)将薄膜切成2.5×8 cm 的小片。在薄膜无光泽面(正面)的一端约2 cm 处用铅笔划一线,以标明点样位置。(2)将薄膜无光泽面

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验

由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中,则蛋白质将带正电荷而向负极移动。反之则向正极移动。因为蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关,所以可用电泳法将不同的蛋白质分离开来。血清中含有多种蛋白质,等电点都在pH 7.5以下。将血清置于pH 8.6

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验

由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中,则蛋白质将带正电荷而向负极移动。反之则向正极移动。因为蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关,所以可用电泳法将不同的蛋白质分离开来。血清中含有多种蛋白质,等电点都在pH 7.5以下。将血清置于pH 8.6

醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验

电泳法             实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不

醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验

实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和操作步骤2

因此,在电泳时应尽量避免使用具有高电渗作用的支持物。醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法。醋酸纤维薄膜由二乙酸纤维素制成,它具有均一的泡沫样的结构,厚度仅120微米,有强渗透性,对分子移动无阻力,作为区带电泳的支持物进行蛋白电泳有简便、快速、样品用量少、应用范围广、分离清晰、没有吸附

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和操作步骤1

一、目的:学习醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一般原理。二、原理:带电质点在电场中移动的现象称为电泳。电泳现象早在19世纪初期就被人们发现了,并用于胶体化学中,但是电泳技术的广泛应用则在20世纪40年代左右。近年来各种类型的电泳技术发展十分迅速。例如,纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、纤维素或淀粉粉末

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳

实验概要血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳技术实验原理      带电粒子在电场中移动的现象称为电泳。电泳技术被广泛用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定,电泳过程中带电粒子的移动速度与粒子荷电量、电场强度、粒子重量与半径及介质的粘度等有关。其中粒子荷电量又受周围介质的pH和离子强度的影响;电场强度

醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质有什么临床意义

血清蛋白电泳是用电泳的方法,测定血清中各类蛋白占总蛋白量的百分比。血清中的蛋白按照电泳时候的电泳速度不同,可以区分开来,分子量越小带电荷越多、泳动速度就会越快。一般可以粗略的分为清蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白和γ球蛋白。正常情况下白蛋白的数量是最多的,其次是γ球蛋白和β球蛋白。在骨髓瘤的用

醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质有什么临床意义

血清蛋白电泳是用电泳的方法,测定血清中各类蛋白占总蛋白量的百分比。血清中的蛋白按照电泳时候的电泳速度不同,可以区分开来,分子量越小带电荷越多、泳动速度就会越快。一般可以粗略的分为清蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白和γ球蛋白。正常情况下白蛋白的数量是最多的,其次是γ球蛋白和β球蛋白。在骨髓瘤的用

醋酸纤维素薄膜(cellulose-acetate-film)分离血清蛋白

原理 采用醋酸纤维素薄膜为支持物的电泳方法,叫做醋酸纤维素薄膜电泳。醋酸纤维素,是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。将它溶于有机溶剂(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均一的泡沫状的结构,有强渗透性,厚度约为120微米。 醋酸纤

醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验_电泳法

混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋白的分子较小, 因此在

醋酸纤维素薄膜电泳

醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体 有以下优点:①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它 对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无 拖尾现象;④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全

醋酸纤维素薄膜电泳

6、定量(1)浸泡 将膜片上的各蛋白质分离区带分段剪下,分别置于相应的标有编号的试管内,然后各加入0.4mol/L的氢氧化钠溶液进行浸泡。浸泡淡色带所加入的0.4mol/L氢氧化钠溶液的量为4ml,深色带为8ml(此时的稀释倍数是淡色带的2倍)。室温下的浸泡时间为 30min~60min

醋酸纤维素薄膜电泳

醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体 有以下优点:①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它 对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无 拖尾现象;④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全

醋酸纤维素薄膜电泳的特点

醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯,由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质吸附小,能消除电泳中出现的“拖尾”现象。具有分离速度快、样品用量小的特点,适合于病理情况下异常蛋白的检测。

醋酸纤维素薄膜电泳的特点

醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯,由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质吸附小,能消除电泳中出现的“拖尾”现象。具有分离速度快、样品用量小的特点,适合于病理情况下异常蛋白的检测。

醋酸纤维素薄膜电泳法

仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。 2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5m