详述共聚焦显微镜荧光探针的选择步骤及方法

在用共聚焦显微镜进行的试验中,一些实验指标可以利用样品自身或外源性物质的自发性荧光进行检测,但大多数待测物质不具备可测荧光,需要采用荧光探针标记的方法使其具有可测定的荧光信号。那么,怎样选择共聚焦显微镜荧光探针呢? 1、根据实验目的确定需要检测的指标 一旦检测指标确定,则荧光探针的选择范围也随之确定。可见,实验中选择使用何种荧光探针是由实验目的决定的。例如,实验目的是研究发生房颤时心肌细胞内钙离子的变化情况,则可以确定待测物质为心肌细胞内的钙离子,荧光探针的选择范围就限定为能够标记活细胞的钙离子探针。 2、确定可供选择的荧光探针的范围 对于新的实验物质或指标哦,如果实验目的不是探索新的荧光探针,则可以选择应用成熟的探针和标记方法。可以通过查找权威的文献或国内外知名试剂公司产品目录,确定可以标记待测物质的荧光探针种类或范围。 3、考察荧光探针的特性是否符合荧光样品的制备要求 荧光探针的特性直......阅读全文

荧光探针及交联技术的著名企业介绍

荧光探针及交联技术 Molecular Probes: 美国一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,一直致力于开发用于生物医学研究的荧光标记试剂。它们拥有2500多种独家产品,包括离子指示剂,高灵敏度的核酸及蛋白染料、反应染料、荧光蛋白、右旋糖苷结合物、Caged探针、荧光聚苯乙烯微球体、显微及流

使用显微镜的方法步骤

  显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器,是人类进入原子时代的标志。下面是我为大家整理的几种使用显微镜的 方法 步骤,希望您喜欢。  使用显微镜的方法步骤(一)  1安放:显微镜应放在体前偏左,镜筒在前镜臂在后的方向安放好。  2对光:用低倍镜、较大光圈(遮光器上调);眼看目镜,同时

荧光探针有毒吗

有毒的。在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

原子力显微镜探针的分类及应用

     原子力显微镜是一种具有原子分辨率的表面形貌、电磁性能分析的重要仪器。原子力显微镜探针由于应用范围仅限于原子力显微镜,属于高科技仪器的耗材,应用领域不广,全世界的使用量也不多。原子力显微镜探针的分类  原子力显微镜探针基本都是由MEMS技术加工Si或者Si3N4来制备。探针针尖半径一般为10

扫描探针显微镜的薄膜断面定位方法

     扫描力显微镜是一种利用尖锐的微型探针在样品表面上方扫描来检测样品表面的一些性质,如形貌特征和表面电势等等。如图1所示,当针尖在样品表面扫描时,针尖与样品的相互作用力使得微悬臂发生形变。反馈系统根据检测器检测到的形变结果不断调整针尖和样品间的距离,从而保持针尖和样品的作用力恒定。对于表面形貌

激光扫描共聚焦显微镜使用说明

激光扫描共聚焦显微镜可以:(1)光切片扫描、3D图像处理、时间序列拍摄成像;(2)细胞、绿荧光蛋白、生物荧光样品观察分析;(3)荧光原位杂交分析。实验方法原理激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫

共焦显微镜的原理及成像技术

从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。共聚焦显微镜能提供无比准确的三维成像,以及对亚细胞结构和动力学过程的准确测试。共焦显微镜在反射光的

荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别

  荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别  荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。原

荧光显微镜记录荧光图像的方法

荧光显微镜所观察到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察,作为一般定性观察基本上是可靠的。随着技术科学的发展,采用细胞分光光度计、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜和图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果

荧光显微镜记录荧光图像的方法

荧光显微镜所观察到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察,作为一般定性观察基本上是可靠的。随着技术科学的发展,采用细胞分光光度计、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜和图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果

荧光团共定位

当研究荧光团共定位时,要考虑的最重要的一点是:确保样品标记的质量最好。抗体和合成荧光团都应进行特异性的分析和选择,背景要低、没有交叉活性。为了降低串色影响,发射光谱分得比较开的荧光探针组合最适合做共定位实验。要做合适的 control 实验,包括用每个探针单独标记样品及未标记的只有自发荧光的样品,都

激光共聚焦显微镜技术的应用

最近需要做成骨细胞培养的实验,师兄给个建议,说是可以做激光共聚焦显微镜 检测。关于这个我还真不知道该如何下手设计这个实验,网上搜集了一些资料,分享给大家,供参考。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世纪80年代发展起来的一项具

扫描探针显微镜(SPM)结构及特点

扫描探针显微镜(SPM)结构1、探针:STM金属探针,AFM微悬臂、光电二极臂。2、机械控制系统:压电扫描器、粗调定位装置、振动隔离系统。3、电子学控制系统:电子学线路、接口,控制软件。扫描探针显微镜(SPM)特点1、局域探针:探测样品的局域特性、表面形貌、电子结构、电场、磁场等其他局域特性、2、高

原子力显微镜的原理详述

原子力显微镜的原理详述如下图所示,激光束经过光学系统聚焦在微悬臂(Cantilever)背面,并从微悬臂背面反射到位置检测器(Detector)。在样品扫描时,由于样品表面的原子与微悬臂探针尖端的原子间的相互作用力,微悬臂将随样品表面形貌而弯曲起伏,反射光束也将随之偏移,因而,通过检测光斑位置的变化

如何选择倒置显微镜与荧光显微镜?

在细胞培养及相关衍生实验中,显微镜是一个很重要的仪器。目前,市场上有各种类型的显微镜,选择一款符合需求又适用的显微镜是一个挑战,下面为大家介绍倒置显微镜和荧光显微镜的原理,便于大家选择。倒置显微镜组成和普通显微镜一样,主要包括三部分:机械部分、照明部分、光学部分。 倒置显微镜组成和普通正置显微镜一样

共聚焦荧光显微镜的三维图像

每一幅焦平面图像实际上是标本的光学横切面,这个光学横切面总是有一定厚度的,又称为光学薄片。由于焦点处的光强远大于非焦点处的光强,而且非焦平面光被针孔滤去,因此共聚焦系统的景深近似为零,沿Z轴方向的扫描可以实现光学断层扫描,形成待观察样品聚焦光斑处二维的光学切片。把X-Y平面(焦平面)扫描与Z轴(光轴

激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器,与传统的光学显微镜相比,大大地提高了分辨率,能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品,通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值,Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标,对细胞动力

中科院大连化物所等研制出高选择荧光探针

  中科院大连化物所杨凌团队与大连理工大学精细化工重点实验室崔京南团队合作,在药物代谢领域取得新突破,研制出人源性细胞色素P450 1A酶的高选择荧光探针。相关研究近日发表于《美国化学会志》。  细胞色素P450 1A(CYP1A)是人体重要的药物I相代谢酶,参与多种临床药物、环境污染物及致癌物(如

实验室荧光显微镜的标本制作方法与正确步骤

  一、 玻片及盖玻片(Slide and Coverslips)   玻片及盖玻片质量必需很好而没有荧光,玻片厚度≦1.0mm 者便可用,玻片之清洗,必需以中性清洁剂洗净,再浸于含有3%HCl 之乙醇12~24 小时,然后再贮存于纯酒精。要用时,以清洁纱布擦净或火焰烘干。用完后可浸于水中,移去封

(双光子、共聚焦)荧光显微镜和普通显微镜的区别

  最近试着做了一些小鼠的冰冻切片,接下来要使用荧光显微镜看自己打的病毒是否在自己想要的脑区。荧光显微镜的一些基本原理需要简单学习一下,也在此分享一下。  荧光显微镜是利用紫外线为光源,用以照射被检验的物体,使该物体发出光源,然后在显微镜下进行对物体的观察。主要是用于免疫荧光细胞,主要是由光源、滤板

显微镜的结构和使用的实验方法及步骤

以生物显微镜为例,讲述一下原理、构造和实验方法、步骤。一、光学显微镜的原理普通光学显微镜主要由物镜和目镜组成,均为凸透镜。物镜的焦距(f1)短,目镜的焦距(f2)长。物镜到标本(AB)的距离稍大于物镜(Lo)的焦距,标本经物镜放大后,形成放大倒立的实像A’B’,实像A’B是目镜的物体,它位于目镜的焦

显微镜的结构和使用的实验方法及步骤

以生物显微镜为例,讲述一下原理、构造和实验方法、步骤。一、光学显微镜的原理普通光学显微镜主要由物镜和目镜组成,均为凸透镜。物镜的焦距(f1)短,目镜的焦距(f2)长。物镜到标本(AB)的距离稍大于物镜(Lo)的焦距,标本经物镜放大后,形成放大倒立的实像A’B’,实像A’B是目镜的物体,它位于目镜的焦

BX53荧光显微镜安装步骤

1、打开主开关,调节亮度,如图①(主开关)②(亮度调节按钮)。2、选择光路(三目镜筒)如图四④(光路选择按钮)。3、将样品放在载物台上,如图⑤(夹片器)⑥(X/Y轴旋钮)。4、将10X物镜转进光路,如图⑦(物镜转盘)。5、对样品进行聚焦,如图⑧(粗/微调焦旋钮)。6、调节视场光阑,如图13(孔径光阑

激光扫描共聚焦显微镜使用说明

实验方法原理 激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微

详述如何清洁偏光显微镜

偏光显微镜在光学显微镜的光学系统中插入了起偏振镜和检偏振器,用以检查样品的各向异性和双折射性的显微镜]。起偏振镜和检偏振镜都是由偏光棱镜或偏光板的尼科耳(nicol)棱镜制成。前者安装在光源与样品之间,后者安装在接物镜与接目镜之间或接目镜之上。在生物样品中,肌肉纤维、骨骼和牙齿等具有各向异性,淀粉粒

详述如何清洁偏光显微镜

详述如何清洁偏光显微镜偏光显微镜在光学显微镜的光学系统中插入了起偏振镜和检偏振器,用以检查样品的各向异性和双折射性的显微镜。起偏振镜和检偏振镜都是由偏光棱镜或偏光板的尼科耳(nicol)棱镜制成。前者安装在光源与样品之间,后者安装在接物镜与接目镜之间或接目镜之上。在生物样品中,肌肉纤维、骨骼和牙齿等

详述如何清洁偏光显微镜

详述如何清洁偏光显微镜偏光显微镜在光学显微镜的光学系统中插入了起偏振镜和检偏振器,用以检查样品的各向异性和双折射性的显微镜]。起偏振镜和检偏振镜都是由偏光棱镜或偏光板的尼科耳(nicol)棱镜制成。前者安装在光源与样品之间,后者安装在接物镜与接目镜之间或接目镜之上。在生物样品中,肌肉纤维、骨骼和牙齿

激光共聚焦的前期步骤

1、做细胞爬片(爬片的步骤就不详述了),注意:洗片子的PBS和固定用的4%多聚甲醛一定要新鲜配制的(一周以内的都能用), 因为PBS和4%多聚甲醛放久了后,都会有自发荧光。2、抗体的孵育:预实验的时候荧光根据文献和经验设定一、二抗的浓度,一抗4度孵育过夜(时间8~12h);二抗(荧光抗体)孵育时要避

荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡

  一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。  常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种染料与  DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的

检测酶活性的荧光探针

检测酶活性的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜除了具备荧光显微镜检测荧光酶细胞化学的作用以外,在检测活细胞酶活性动态变化方面有着无可比拟的优势。通过对细胞施予不同的处理因素可检测细胞内相应的酶被激活或灭活的动态变化过程。有的酶荧光探针是自身就可发出荧光、有的是与酶结合后发出荧光、有的则是被酶分解后发出荧