详述共聚焦显微镜荧光探针的选择步骤及方法
在用共聚焦显微镜进行的试验中,一些实验指标可以利用样品自身或外源性物质的自发性荧光进行检测,但大多数待测物质不具备可测荧光,需要采用荧光探针标记的方法使其具有可测定的荧光信号。那么,怎样选择共聚焦显微镜荧光探针呢? 1、根据实验目的确定需要检测的指标 一旦检测指标确定,则荧光探针的选择范围也随之确定。可见,实验中选择使用何种荧光探针是由实验目的决定的。例如,实验目的是研究发生房颤时心肌细胞内钙离子的变化情况,则可以确定待测物质为心肌细胞内的钙离子,荧光探针的选择范围就限定为能够标记活细胞的钙离子探针。 2、确定可供选择的荧光探针的范围 对于新的实验物质或指标哦,如果实验目的不是探索新的荧光探针,则可以选择应用成熟的探针和标记方法。可以通过查找权威的文献或国内外知名试剂公司产品目录,确定可以标记待测物质的荧光探针种类或范围。 3、考察荧光探针的特性是否符合荧光样品的制备要求 荧光探针的特性直......阅读全文
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
一、原理不同 1、荧光显微镜:是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 2、激光共聚焦显微镜:在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。 二、特点不同 1、荧光显微镜:用于研究细胞内物质的吸收、运输
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下: 一、荧光显微镜 1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
一、原理不同1、荧光显微镜:是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。2、激光共聚焦显微镜:在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。二、特点不同1、荧光显微镜:用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定
详述土壤养分速测仪操作步骤
土壤养分速测仪简介及介绍,土壤养分速测仪又称土壤养分速测仪、土壤肥料速测仪、植株养分速测仪;主要用于土壤中水分、盐分、ph值、全氮、铵态氮、碱解氮、有效磷、有效钾、钙镁、硼等及肥料中氮、磷、钾含量测试。首先跟大家熟悉下土壤耕层土样的采集、制备和储存。为研究耕作层中养分供应情况,只需取耕层0~20cm
共聚焦显微镜及配件
共聚焦显微镜及配件制造商提供的软件可对荧光团共定位进行散点图分析。图 4 显示了一系列分析图,这个图是印度麂鹿皮肤成纤维细胞,用 AlexaFluor568 染色(标记对象是黏着斑蛋白,红色通道),同时用 Alexa Fluor488染色(标记对象是纤维状肌动蛋白,绿色通道)。在散点图中选择一个感兴
基因芯片检测原理
杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法,如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、化学发光、荧光各向异性等等,但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质,需要确定杂交信号在芯片上的位置,尤其是大规模DNA芯片由于
生物芯片的检测原理
杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法,如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、 化学发光、荧光各向异性等等,但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质,需要确定杂交信号在芯片上的位置,尤其是大规模DNA芯
激光扫描共聚焦荧光显微镜的辅助设备
风冷、水冷冷却系统及稳压电源。 激光扫描共聚焦显微镜的基本工作原理是首先由激光器发射的一定波长的激发光,光线经放大后通过扫描器内的照明针孔光栏形成点光源,由物镜聚焦于样品的焦平面上,样品上相应的被照射点受激发而发射出的荧光,通过检测孔光栏后,到达检测器,并成像于计算机监视屏上。这样由焦平面上样
激光扫描共聚焦荧光显微镜的历史发展
·1957年,Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理,获得了美国的ZL。 ·1967年,Egger和Petran成功地应用共聚焦显微镜产生了一个光学横断面。 ·1977年,Sheppard和Wilson首次描述了光与被照明物体的原子之间的非线性关系和激光扫描器的拉曼光
激光扫描共聚焦荧光显微镜的样品要求
1,样品经荧光探针标记; 2,固定的或活的组织; 3,固定的或活的贴壁培养细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上; 4,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片; 5,载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右 6,标本不能太厚,如太厚激发光大部
倒置生物显微镜使用方法及步骤
1、DXS系列倒置显微镜中经常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色,是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要,这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。 2、开机 2.1 接连电源。 2.2 打开镜体下端的电控开关。 3、使用 3.1 准备
偏光显微镜清洁方法及详细步骤介绍
偏光显微镜的使用过程中,会进入些灰尘,油脂之类的东西,这些杂质会对偏光显微镜的成像有很严重的影响,如何清洁显微镜,下面格图在线就给大家来推荐下方法:偏光显微镜清洁步骤:1、用清洁空气吹掉表面浮尘。如果不能吹干净,取两张镜头纸裹在棉签上或将镜头纸折叠使之比要清洁的面积稍大。 2、擦拭偏光显微镜光学零件
Alexa-Fluor-探针
Alexa Fluor 探针之间的光谱叠加程度会随着探针发射峰之间的距离增加而下降,如 Figure2(b)所示。在这种情况下, Alexa Fluor 488 和深红色染料 Alexa Fluor 633 与 Figure2 (a)比较,重叠区域明显降低。这两种染料人眼都很容易区分,光谱重叠程度低
摇核酸的荧光探针
DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA,如为获得单独的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜
荧光探针的功能介绍
在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。
荧光探针的分类检测
常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。 检测荧光探针的方法主要有单点测定和电荷耦合装置(CCD)荧光成像(包括用于微区分析的激光共聚
荧光探针技术的概念
受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为
荧光探针的相关介绍
在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。 与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性
荧光显微镜检测原理及方法(一)
荧光显微镜检测方法 一、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像(图3-15)。 图3-15 荧光显微镜的结构和主要部件 (一)光源
荧光显微镜检测原理及方法(二)
(四)聚光镜 专为荧光显微镜设计制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明视野聚光器的暗视野聚光器两种。还有相差荧光聚光器。 1.明视野聚光器 在一般荧光显微镜上多用明视野聚光器,它具有聚光力强,使用方便,特别适于低、中倍放大的标本观察。 2.暗视野聚光器
荧光显微镜检测原理及方法(二)
荧光显微镜标本制作要求(一)载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。(二)盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面
共聚焦荧光显微镜基本原理
共聚焦荧光显微镜基本原理:采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜收集,并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致,约100-200nm;相对于焦
激光共聚焦荧光显微镜原理是什么
激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。 原理:
保护柱的选择及使用步骤
保护柱的选择保护柱的选择与更换应注意些什么事项一、保护柱的选择选择保护柱的原则是:在满足分析分离要求的前提下,尽可能的选择较短的保护柱结构,对分离样品有比较小的保留性的色谱填料。在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁。对于大部分分析工作来说,一支1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是,如果
简述荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印
开尔文探针力显微镜的开尔文探针力显微镜
原子力显微镜(atomic force microscope,简称AFM),也称扫描力显微镜(scanning force microscope,SFM)是一种纳米级高分辨的扫描探针显微镜,优于光学衍射极限1000倍。原子力显微镜的前身是扫描隧道显微镜,是由IBM苏黎士研究实验室的海因里希·罗雷
荧光探针及交联技术的著名企业介绍
荧光探针及交联技术 Molecular Probes: 美国一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,一直致力于开发用于生物医学研究的荧光标记试剂。它们拥有2500多种独家产品,包括离子指示剂,高灵敏度的核酸及蛋白染料、反应染料、荧光蛋白、右旋糖苷结合物、Caged探针、荧光聚苯乙烯微球体、显微及流
关于定硫仪的使用步骤详述
1 电解液的配制:碘化钾 5 克,溴化钾 5 克,溶入 250~300ml 的蒸流水 中,然后加入 10ml 冰醋酸(冰乙酸)电解液可重复使用,当电解液的 PH 值应为 1~2 之间,当 ph 值
如何分析细胞免疫荧光的结果
细胞免疫荧光(Immunofluorescence, IF)是一种常用的技术,用于检测细胞内特定蛋白质或其他分子的分布和表达情况。分析细胞免疫荧光的结果涉及多个步骤,包括图像采集、图像处理、定量分析和数据解释。以下是详细的步骤和方法:1. 图像采集显微镜选择:使用荧光显微镜(如共聚焦显微镜)进行图像
如何分析细胞免疫荧光的结果
细胞免疫荧光(Immunofluorescence, IF)是一种常用的技术,用于检测细胞内特定蛋白质或其他分子的分布和表达情况。分析细胞免疫荧光的结果涉及多个步骤,包括图像采集、图像处理、定量分析和数据解释。以下是详细的步骤和方法:1. 图像采集显微镜选择:使用荧光显微镜(如共聚焦显微镜)进行图像